Revista Peruana de Medicina Experimental y Salud Publica

Uso de armas biológicas: una amenaza no muy lejana

Diseño y estandarización de una prueba de PCR para el diagnóstico de la Bartonelosis causada por Bartonella bacilliformis

Objetivo: Diseñar una prueba de PCR para el diagnóstico de la Bartonelosis causada por Bartonella bacilliformis. Materiales y métodos: Se usó la secuencia del locus de invasión ialB para diseñar los oligonucleótidos ialBF y ialBR, además del ADN geonómico purificado de una cepa referencial de B. bacilliformis para estandarizar las condiciones de la prueba. Finalmente, la prueba fue preliminarmente evaluada con 12 cepas de B. bacilliormis aisladas en 3 áreas endémicas y 10 muestras de sangre total de pacientes con Bartonelosis confirmada. Resultados: La prueba detectó el ADN de aislamientos de B. bacilliformis de 3 áreas bartonelósicas endémicas del Perú: Ancash, Cuzco y Lima; mientras que no detectó el ADN de B. hensenlae, ni de B. vinsonii, ni de otras bacterias y parásitos. Además, esta prueba fue positiva para 10 muestras sanguíneas de pacientes con bartonelosis confirmada y negativa para 5 muestras de pacientes con malaria por P. falciparum. Conclusión: Esta prueba de PCR podría ser útil para el diagnóstico de la bartonelosis causada por B. bacilliformis.

Objective: To design a PCR test for the diagnosis of Bartonellosis produced by Bartonella bacilliformis. Material and methods: ialB locus was used to design ialBF and ialBR primers, and PCR conditions were standardized using genomic DNA from a referral strain. Furthermore, the test was preliminary assessed in 12 clinical isolates from three Peruvian endemic areas and 10 whole blood samples of bartonelosis confirmed cases. Results: This test detected DNA from B. bacilliformis strains from three Peruvian endemic places of bartonellosis: Ancash, Cuzco and Lima. Genomic DNA of B. hensenlae, B. vinsonii, and other pathogens were not detected. In addition, this test was positive for ten whole blood samples of patients with confirmed bartonellosis and it was negative for five whole blood samples of patients with P. falciparum malaria. Conclusions: This PCR test could be useful for diagnosing bartonellosis caused by B.bacilliformis.

Estudio basal de prevalencia de sífilis y VIH y comportamientos asociados en población privada de libertad, Perú 1999

Objetivos: Estimar la prevalencia de sífilis y VIH e identificar los comportamientos de riesgo asociados en personas privadas de libertad (PPL). Materiales y métodos: Estudio transversal realizado durante el año 1999 en 22 establecimientos penitenciarios peruanos. Se realizó RPR para la detección de sífilis (datos ligados) y ELISA para tamizaje de VIH (datos no ligados), confirmándose con IFI o Western Blot. Se realizó una encuesta estructurada y se analizaron los datos mediante los programas SPSS 9,0 y AMOS 4. Resultados: Participaron 6963 PPL. La prevalencia de VIH fue 1,1% y de sífilis 4,1%. Los comportamientos de riesgo asociados a VIH más significativos fueron: consumo de drogas (OR:2,7), infecciones de transmisión sexual (OR: 2,3), relaciones sexuales entre hombres (OR: 2,2), uso de cocaína (OR: 2,1), úlcera genital (OR: 2,1), haber sido encarcelado previamente (OR: 2) y tener tatuajes (OR: 1,99). Mientras los asociados a sífilis fueron: tener relaciones sexuales entre hombres OR: (2,8), infecciones de transmisión sexual (OR: 2,4), úlcera genital (OR:1,8), haber tenido relaciones sexuales con trabajadora sexual (OR: 1,5) y tener más de dos parejas sexuales (OR: 1,5). Utilizando un modelo de ecuaciones estructurales se asoció VIH con el reporte de tener tatuaje, más de dos parejas sexuales, más de un encarcelamiento previo y úlcera genital. Conclusiones: Se encontraron importantes valores de prevalencia de VIH y sífilis en este grupo de personas, siendo necesario continuar realizando estudios similares que nos permitan conocer las tendencias (vigilancia de segunda generación) y conocer el impacto de posibles intervenciones.

Objective: To determine HIV and syphilis prevalence and to identify behavioral risk factors in jail prisoners. Materials and methods: Cross-sectional study conducted during 1999 in 22 Peruvian jails. RPR was used to detect syphilis (linked results) and ELISA to screen HIV (non-linked results). Positive results were confirmed with IFI and Western Blot. A structured survey was carried out, resulting data was analized with SPSS 9,0 and AMOS 4. Results: 6 963 PPL participated. HIV and syphilis seroprevalence were 1,1 % and 4,1% respectively.The most significant HIV risks factors were: drug abuse (OR: 2,7), sexually transmitted diseases (OR: 2,3), sexual intercourse between males (OR: 2,2), cocaine use (OR: 2,1), genital ulcer (OR: 2,1), previus incarcelation (OR:2), and having a tattoo (OR: 1,99). The most significant syphilis risks factors were, sexual intercourse between males (OR: 2,8), sexually transmitted diseases (OR: 2,4), genital ulcer (OR: 1,8), sexual intercourse with sex workers (OR: 1,5) and having more than two sexual partners (OR: 1,5). An association between HIV infection and having a tattoo, having more than two sexual partners, more than one previous imprisonment and genital ulcer, was found using a structural equation model. Conclusions: Important rates of HIV and Syphilis prevalence were found among this group, thus making necessary the performace of similar research that may allow the knowledge of new trends (second generation surveillance) and to assess the impact of possible interventions.

Identificación de una nueva área de infección por Rickettsias del grupo typhi: estudio de un brote de tifus en Huánuco

Objetivos: Investigar un brote de síndrome febril en el distrito de Punchao mediante una evaluación clínica, laboratorial y entomológica para conocer los factores asociados a la aparición de dicho brote. Materiales y métodos: Debido al reporte de tres pacientes con cuadro clínico febril asociado a cefalea, mialgias y postración en la semana epidemiológica Nº41 del año 2000, procedentes del distrito de Punchao, Humalíes, Huánuco y ante la información de presentación inusual de pacientes febriles en la última semana en dicho lugar, se decidió investigar la naturaleza y características del brote. Se definió como caso a todo paciente con cuadro febril agudo y uno de estos síntomas: cefalea, mialgias o postración; procediéndose a la búsqueda activa de éstos y a la evaluación de presencia de anticuerpos para rickettsias en suero mediante inmunofluorescencia indirecta (IFI). Se capturaron roedores y se colectaron ectoparásitos en las viviendas (roedores, animales domésticos y humanos), a fin de identificar la presencia de Rickettsias en ellos mediante IFI, aislamiento o PCR. Resultados: No se logró el aislamiento del agente causal. Se evidenció circulación de la Rickettsia sp. (serología positiva) tanto en humanos (en casos y en no casos) como en roedores. Se evidenció mayor presencia de malos hábitos de aseo y condiciones inadecuadas de saneamiento básico en los casos (respecto a los no casos) y una disminución de los casos luego del inicio de las medidas de control. Conclusiones: Las evidencias encontradas permitieron identificar un brote de tifus en Punchao, no pudiéndose determinar la especie involucrada debido a que no se aisló el agente causal.

Objectives: To assess an outbreak of febrile syndrome in Punchao district through a clinical, laboratorial and entomological evaluation and to find out the factors associated to the occurrence of such outbreak. Materials and methods: Due to the report of three patients from Punchao, Huamalíes (Huanuco) presenting with fever associated to headache, myalgia and postration, on the 41st epidemiological week 2000; and because of an inusual presentation of feverish patients in the last week in such site; we decided to investigate the nature and characteristics of the outbreak. We define as case every patient with a time of illness less than 15 days with fever and one of these symptoms: headache, myalgias and postration and we started actively to look for these cases and to assess the presence of anti-Rickettsias antibodies in serum using IFI. We captured rodents and collected ectoparasites in houses (in rodents, domestic animals and humans), with the purpose of identifying Rickettsias using IFI, isolation and/or PCR. Results: We could not isolate the causal agent. The circulation of Rickettsia (positive serology) in humans (cases and no cases) and in rodents was confirmed. A greater presence of bad habits of cleanliness and inadequate conditions of basic sanitation in cases (in relation to no cases) and a decrease in the number of cases after the beginning of control measures, was evident. Conclusions: The evidences found allowed the identification of a typhus outbreak in Punchao; however, the determination of the involucrated species was not possible because the causal agent was not isolated.

Comportamiento estacional del Anopheles (nyssorhynchus) darlingi root 1926 en localidades de Loreto y Madre de Dios, Perú 1999- 2000

Objetivos: Determinar el comportamiento estacional del Anopheles darlingi en las localidades de Santa Clara (Loreto) y Villa Luz (Madre de Dios). Materiales y métodos: En las localidades de Santa Clara y Villa Luz, entre agosto de 1999 y junio de 2000 se realizó mensualmente la inspección de criaderos, colecta de larvas de Anopheles darlingi por el método del cucharón y colecta de mosquitos adultos por el método cebo humano (intradomicilio y peri domicilió), trampa Shannon y refugio animal (extradomicilio). Se calcularon los indicadores: criadero positivo y densidad larvaria por cucharonada, índice de picadura hombre noche (IPHN), índice de picadura hombre hora (IPHH), índice esporozoítico y tasa de paridad. Resultados: El IPHN en ambas localidades se incrementó en la estación lluviosa con los valores más altos en mayo (Santa Clara) y febrero (Villa Luz). En Santa Clara, el comportamiento de la picadura del Anopheles darlingi de agosto a diciembre de 1999, fue unimodal presentándose el pico de IPHH entre las 19.00 y 21.00 horas; sin embargo, de marzo a junio de 2000, el comportamiento fue bimodal con dos picos del IPHH: entre las 19.00 y 22.00 horas, y entre las 2.00 y 4.00 horas. En Villa Luz, el comportamiento de la picadura, de agosto a junio de 1999, se mantuvo unimodal, con el pico de IPHH entre las 21.00 y 24.00 horas. Las especies inmaduras de Anopheles darlingi representaron menos del 20% de las larvas encontradas en los criaderos permanentes. Conclusiones: El Anopheles darlingi presenta mayor densidad poblacional en meses de estación lluviosa, con comportamientos de picadura distintos según localidad y estación. Los criaderos evaluados no serían criaderos tan importantes de esta especie.

Objetives: To determine the seasonal behavior of Anopheles darlingi in Santa Clara (Loreto) and Villa Luz (Madre de Dios) sites. Materials and methods: Between august 1999 and june 2000, we performed monthly inspection of breeding places, the collection of aquatic stages of Anopheles darlingi using the ladle method and the collection of adult mosquitoes with human baits (indoor and outdoor capture) and using Shannon traps (extradoor capture) and animal refugees, in both sites. We calculated the following indicators: positive breeding place, larvae density by ladle, human night bite index (HNBI), human hour bite index (HHBI), sporozoitic index and parity rate. Results: The HHBI in both sites was high in the rainy season. In Santa Clara, the bites from Anopheles darlingi from august to december, had an unimodal behavior, with HHBI values peaking between 19:00 and 21:00 hours; however, from march to june, the behavior was bimodal with two peaks of HHBI: between 19:00 and 22:00 hours, and between 2:00 and 4:00 hours. In Villa Luz, the behavior of the bite, was unimodal along the study period, with a peak between 21:00 and 24:00 hours. The immature species represented less than 20% of the larvae of Anopheles in the permanent breeding places. Conclusions: There was a greater population density of Anopheles darlingi in the rainy season, with different behaviors for biting by site and season. The breeding places assessed would not be important breeding places for this species.

Determinación mediante inmunohistoquímica de infección por virus de la fiebre amarilla y virus de la hepatitis b

La inmunohistoquímica (IHQ) constituye una herramienta para definir la etiología en el síndrome icterohemorrágico. Objetivo: Identificar mediante IHQ la presencia en hígado del antígeno de superficie de la hepatitis B y del virus de la fiebre amarilla. Materiales y métodos: Se incluyeron muestras de tejido hepático procedentes de 55 fallecidos por síndrome icterohemorrágico, remitidos entre enero de 2000 y diciembre de 2001 al Instituto Nacional de Salud, (Lima, Perú). Resultados: La prueba se realizó únicamente en 46 muestras, 33% (15/46) fueron diagnosticados por histopatología como fiebre amarilla, de ellos, 9 casos fueron positivos por IHQ para fiebre amarilla, siendo 2 de ellos también positivos para HBsAg. Histológicamente, se reportaron 6 casos como hepatitis con necrosis submasiva o masiva, que por IHQ fueron sólo 2 casos positivos para fiebre amarilla. En 39% (18/46) no se llegó al diagnóstico etiológico de la hepatitis, y finalmente hubo 2 casos con diagnóstico histopatológico de ádenocarcinoma hepático y sólo se obtuvo positividad por IHQ para HBsAg en uno. Conclusión: La IHQ es una alternativa para la confirmación diagnóstica de hepatitis B y fiebre amarilla.

Immunohistochemistry (IHC) is considered a useful tool for determining the etiology of icterohemorrhagic syndrome. We identified the surface antigen of hepatitis B virus and yellow fever virus in the liver from 55 fatal cases with icterohemorrhagic syndrome submited to INS between january 2000 and december 2001. 33% were diagnosed as yellow fever by histopathology, of these, nine cases were positive for yellow fever by IHC, with 2 cases also positive for HbsAg by IHC. Histologically 6 cases were reported as hepatitis with submassive or massive necrosis, and by IHC only two were positive for yellow fever. In 39% an etiologic diagnosis was not possible, and finally, two cases were hepatic adenocarcinoma by histopathology with positive result for HBsAg by IHC in one case.

Aproximación al efecto del programa de desayunos escolares sobre el rendimiento intelectual en alumnos de educación inicial y primaria del Perú

Objetivos: Evaluar el efecto del Programa de Desayunos Escolares (PDE) sobre el rendimiento intelectual en alumnos pertenecientes al nivel inicial y primario, atendidos por el PDE en el año 2001. Materiales y métodos: En este estudio transversal descriptivo se evaluaron mediante las pruebas cognitivas Catell 1 (4-8 años) y Catell 2 (9-13 años) escolares de 4 a 13 años (seleccionados por muestreo probabilístico multietápico) de los distritos atendidos por el PDE, calculándose los promedios del puntaje total y puntajes de cada uno de los subtests incluidos en estas pruebas. Para identificar a los niños que recibieron la intervención, se usó dos modalidades: el testimonio del profesor de "consumo usual" del desayuno escolar y la observación del consumo el día de la evaluación. Resultados: Fueron evaluados 1787 escolares: 922 de inicial y 865 de primaria. La proporción de niñas y niños fue similar. El consumo reciente del desayuno mostró efectos positivos en el puntaje total y subtests específicos en escolares de inicial de Lima, la costa y la selva con el Catell 1 y en escolares de primaria de la costa con el Catell 2. El consumo usual mostró efectos positivos en el puntaje total y subtests específicos en escolares de inicial de la costa y la selva con el Catell 1. Conclusiones: Existen efectos positivos del consumo reciente y consumo regular de la ración del PDE sobre el rendimiento intelectual, siendo este efecto mayor en escolares del nivel inicial y en lugares de la costa y la selva.

Objectives: To assess the effects of the School Breakfast Program (SBP) on the intellectual performance of elementary and primary level school students attended by SBP in Peru, during 2001. Materials and Methods: In this analytic cross-sectional study we assessed students of 4 to 13 years (chosen using multi-stage probabilistic sample) from districts attended by SBP, with the Catell 1 (4-8 years) and Catell 2 (9-13 years) cognitive tests, and we calculated the average of total scores and scores for each subtest included in this test. Two methods were used for the identification of children that received the intervention: teacher's evidence of "usual consumption" of the school breakfast and the observation of the consumption during the day of the assessment. Results: 1787 school students were evaluated: 922 of elementary and 865 of primary eduactional level. The proportion of girls and boys was similar. Recent consumption of breakfast showed positive effects in the total scores and specific subtests in Coast and Jungle students of elementary level, using Catell 1 test and in primary level students from the Coast, using Catell 2 test. Regular consumption showed positive effects in the total scores and in the specific tests in elementary school students of Coast and Jungle, using Catell 1 test. Conclusions: There are positive effects due to recent consumption and regular consumption of PDE ration on the intellectual performance, showing a greater effect in students of elementary level and in Coast and Jungle study sites.

Estudio preliminar de leptospirosis en roedores y canes en salitral, Piura-1999

Objetivo: Determinar serológica y bacteriológicamente la presencia de Leptospira en muestras de suero y riñón de carnes y roedores, del distrito de Salitral, departamento de Piura (norte del Perú).Materiales y métodos: Estudio realizado en octubre de 1999. Se capturaron roedoresutilizando trampas tomahawk en las localidades de Salitral y Malacasi. Se utilizó la prueba de aglutinación microscópica (MAT) para la detección de anticuerpos y el cultivo de tejido de riñón para el estudio bacteriológico. Asimismo, se evaluaron muestras de suero de canes de la localidad del Salitral.Resultados: 2 de 12 roedores identificados como Rattus rattus (16,6%) reaccionaron con Leptospira serovar grypotyphosa a un título de 1/200 y 1/400, en tanto que una de las 3 muestras de suero de can colectadas reaccionó con Leptospira serovar canicola. De los 12 cultivos de las muestras de riñón de roedores ninguno fue positivo a Leptospira. Conclusiones: La detección de anticuerpos contra Leptospira en el distrito de Salitral sugiere ampliar los estudios de Leptospira en la zona.

Objective: To determine serological and bacteriologically the presence of Leptospira in samples of serum and kidney from dogs and rodents, of the district of Salitral, department of Piura (North of Peru). Materials and methods: Study made in October 1999. Rodents were captured using tomahawk traps in the localities of Salitral and Malacasi. The test of microscopic agglutination (MAT) for the detection of antibodies and the culture of kidney tissue for the bacteriological study were used. Also, serum samples from dogs of the locality of the Salitral were assessed. Results: 2 of 12 rodents identified as Rattus rattus (16,6%) reacted with leptospira to serovar grypotyphosa to a title of 1/200 and 1/400, whereas one of the 3 collected serum samples of dog reacted with leptospira to serovar canicola. None of the 12 cultures of kidney tissue was positive to Leptospira. Conclusions: The detection of antibodies against Leptospira in the district of Salitral suggests to extend the studies of Leptospira in the area.

La implantación de la viruela en los Andes, la historia de un holocausto

La historia de las epidemias de viruela en los Andes tiene el carácter tétrico del relato de un holocausto. Esta presentación está destinada a resaltar las etapas más importantes del proceso de la implantación de la viruela en las poblaciones andinas en general y, en particular, en el Perú, desde principio del siglo XVI hasta nuestros días.

The history of Smallpox outbreaks in the Andes shows the somber characteristic of an holocaus story. This study aims to point out the most important stages of the Smallpox introduction process among the Adean population, specially in Peru, since the beginning of the XVI Century until nowadays.

Rol de las proteínas no estructurales en los eventos de replicación del ARN del virus dengue: propuesta de un modelo de replicación del ARN

Un modelo ilustrativo de los procesos de replicación para el virus dengue y flavivirus en general ha sido diseñado con base a datos experimentales publicados en los últimos diez años. El modelo propone cuatro pasos bien definidos durante el proceso de replicación de ARN: 1) circularización del ARN viral mediada por un stem-loop del extremo 3' y la región 5' terminal TR, 2) linearización y síntesis de la forma intermedia replicativa mediada por el complejo NS3-NS5 y la glicoproteína NS1, 3) cambio de estado de NS5 a la forma rígida para la síntesis de formas replicativas y 4)Desensamblaje del sistema de replicación NS3-NS5 mediado por fosforilación y la unión específica de NS5 con un receptor beta de la importina. Este modelo podría ser útil para el planteamiento de nuevos trabajos de investigación destinados al estudio de la replicación en flavivirus.

An illustrative model for dengue virus and flavivirus replication has been designed on the basis of experimental data published in the last ten years. Four very well defined steps during the RNA replication are proposed in this model: 1) Viral RNA circularization through the stem-loop of the 3´ ending and the 5´ TR terminal region, 2) linearization and synthesis of the intermediate replicative form through NS3- NS5 complex and NS1 glycoprotein, 3) change to the rigid form of the NS5 structure for the synthesis of replicative forms, and 4) NS3- NS5 replicative system disassembly through fosforilation and NS5 specific binding with an importine Beta receptor. This model could be helpful for outlining new research on flavivirus replication.

VIRUELA (CIE -9 - 050, CIE -10 B03)