Animales

Se utilizaron 26 alpacas hembra adultas mantenidas en pasturas naturales. Los animales se encontraban en adecuadas condiciones sanitarias, corporales y reproductivas. Se realizó un empadre controlado en 21 alpacas utilizando machos de capacidad reproductiva conocida y se determinó la gestación mediante ecografía transrectal a los 20 días de la monta.

Las hembras fueron divididas en dos grupos:

Las hembras vacías fueron faenadas y el tracto reproductor fue procesado mediante la técnica de repleción-corrosión para obtener el molde vascular uterino, el mismo que fue posteriormente utilizado para la comparación con los úteros grávidos. Las hembras del Grupo 2 fueron faenadas en las fechas programadas (90, 180 y 280 días pos-monta aproximadamente). Tres (3) especímenes de cada subgrupo fueron procesados para obtener el molde vascular uterino y cuatro (4) especímenes fueron utilizados para obtener el molde vascular placentario y fetal. El faenamiento de los animales fue de acuerdo con el procedimiento estándar en el país (aturdimiento e hipovolemia).

Procesamiento de Muestras

Luego del faenado, las hembras fueron cuidadosamente evisceradas a fin de describir la irrigación arterial uterina, placentaria y fetal. Para este fin se utilizó la técnica de repleción-corrosión, (^{Bustamante et al., 2007}) la cual sigue los siguientes pasos:

El presente estudio fue autorizado por el Comité de Ética y Bienestar Animal de la Facultad de Medicina Veterinaria de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos, mediante Constancia de Autorización Ética N.º CEBA-2020-01.

Irrigación Uterina

La irrigación arterial del útero de la alpaca vacía no presenta gran variación con aquella de la hembra grávida (Figura 1), siguiendo el mismo patrón, a excepción de la forma de las arterias espiraladas que se encuentran muy sinuosas, porque el útero se encuentra en su tamaño normal, aún sin distenderse por causa de la gravidez.

Figura 1. A: Irrigación arterial de útero no grávido (vista dorsal). B: Irrigación uterina de útero no grávido (Vista ventral). C: Vista ventral del cuerno derecho. Se observa la rama uterina medial proveniente de la arteria ovárica (flecha roja), la rama uterina medial proveniente de la arteria uterina caudal (flecha amarilla), y la anastomosis arterial de la arteria uterina medial (flecha verde). D: Vista dorsal del cuerno derecho. Obsérvese las arterias espiraladas que se capilarizan en el borde anterior del cuerno 

La estructura arterial del útero grávido de alpaca se presenta en la Figura 2. La irrigación arterial del tracto reproductivo proviene de diversas arterias que tienen como origen la arteria aorta abdominal, donde a nivel de las vértebras L4-L5 se origina la arteria ovárica con dirección lateroventral hasta alcanzar el ligamento ancho. Esta arteria se sitúa lateral al tracto reproductivo y alcanza al ovario mediante una rama lateral denominada arteria ovárica propia. Asimismo, se observa otra rama encargada de irrigar el oviducto, parte del ligamento ancho y el extremo del cuerno uterino, denominada rama oviductal; sin embargo, la arteria principal denominada ahora arteria uterina craneal, continua hasta acercarse al mesometrio, donde se bifurca en dos ramas que ingresan a los cuernos uterinos mediante su borde caudal, una es la rama lateral que se dirige por la cara dorsal del borde posterior de los cuernos uterinos, y la otra rama denominada rama medial se dirige por la cara ventral de los cuernos uterinos. Estas dos ramas se continúan con las ramas lateral y medial de la arteria uterina caudal, respectivamente, formando un círculo de irrigación de la cual se desprenden las arterias espiraladas (Figura 2D,E,F). Estas últimas irrigan los cuernos uterinos, dorsalmente se pueden ver entre 21 a 23 arterias y ventralmente entre 14 a 16 (Figura 2A,C).

Caudal al origen de las arterias ováricas en la arteria aorta abdominal, se originan dos arterias de mayor calibre, denominadas arterias iliacas internas, de la cual se origina la arteria pudenda interna y la cual a su vez da origen a la arteria urogenital, de donde sale la arteria vaginal y la arteria uterina caudal. Esta última recorre cerca al borde de inserción del ligamento ancho a nivel del cérvix, avanzando en forma caudocraneal por el borde lateral del útero y los cuernos uterinos. La arteria, a nivel del final del cuerpo uterino, se bifurca, dando origen a dos ramas arteriales uterinas, la rama lateral y la rama medial, las que se continúan con las ramas lateral y medial de la arteria uterina craneal, respectivamente. Ventralmente, la arteria uterina caudal derecha, posterior a la bifurcación que dan origen a las ramas lateral y medial, da origen a una rama medial izquierda que irriga la porción media anterior del cuerno uterino izquierdo, anastomosándose con ramas colaterales de la rama uterina medial izquierda (Figura 2E,F).

Figura 2. Irrigación sanguínea en útero grávido de alpaca. A, origen de la irrigación arterial desde la arteria Aorta Abdominal (AA). B, Irrigación arteriovenosa de útero grávido, vista ventral (AU: A. uterina; AVC: A. arco cervical). C, Útero grávido, vista dorsal (Irrigación arterial en rojo), nótese las arterias espiraladas se encuentran distendidas. D, anastomosis arterial entre las ramas laterales (AUD) y mediales (AUV) de la A. ovárica - A. uterina craneal (AO) y la A. uterina caudal (AU). CD: cuerno derecho; CI: cuerno izquierdo. E: Esquema lateral de la angioarquitectura reproductiva de la alpaca (solo se consideran las arterias que irrigan al tracto reproductivo). U, útero; V, vagina, R, recto, Vg, vejiga; O, ovario. 1: A. aorta abdominal; 2: A. iliaca; 3: A. urogenital; 4: A. uterina caudal; 5: rama medial de 4; 6: rama lateral de 4: 7: Arterias espiraladas; 8: A. ovárica; 9: A. ovárica Propia; 10: bifurcación de la A. uterina craneal: 11: A. vesical; 12: A. vaginal; 13 A. pudenda interna. F: Esquema ventral de la angioarquitectura uterina de la alpaca (solo se consideran las arterias que irrigan al tracto reproductivo). U, útero; Ov, oviducto; Ova, ovario; La, ligamento ancho; CUD, cuerno uterino derecho, CUI, cuerno uterino izquierdo. 1: A. ovárica; 2: A. uterina caudal derecha; 3: A. uterina caudal izquierda; 4: rama lateral de 2; 5: Rama medial de 2: 6: Rama medial de 2; 7: Rama lateral de 2; 8: Rama medial de 3; 9: Rama lateral de 9; 10: Anastomosis entre 2 y 3; 11: arterias espiraladas; 12: A. ovárica propia; 13: A. oviductal 

^{Sato y Montoya (1990}) describen que la irrigación arterial uterina de la alpaca es suministrada principalmente por las arterias ováricas y las arterias uterinas caudales, teniendo origen en la arteria aorta abdominal, de la misma forma a lo descrito en el presente trabajo. Sin embargo, en ninguno de los especímenes se pudo observar el origen de las arterias ováricas de un tronco común, tal como lo mencionan dichos autores. La presencia de la anastomosis entre la rama medial de la arteria uterina caudal derecha y la rama medial de la arteria uterina caudal izquierda fue descrita por ^{Del Campo et al. (1996}), quienes indican que esta característica asimétrica permite mayor provisión sanguínea hacia el cuerno izquierdo, considerando su funcionalidad durante la gestación en mayor porcentaje de ese lado (^{Valencia, 2008}). Las anastomosis entre las ramas mediales y laterales de las arterias uterinas caudales y de las arterias uterinas craneales incrementan el suministro sanguíneo hacia los cuernos, característica que también fue descrita por ^{Carrera (2004}) en alpacas (Vicugna pacos) y por ^{Gallegos (1997}) en vicuñas (Vicugna vicugna). No obstante, existen diferencias con la angioarquitectura uterina de llama (Lama glama), donde ^{León et al. (2011}) reportaron la presencia de la arteria uterina dorsal, arteria que no fue observada en el presente estudio.

Las arterias espiraladas irrigan los cuernos uterinos y tienen su origen de las ramas laterales y mediales de las arterias uterinas caudales y craneales anastomosadas. Se observaron de 20 a 23 en el cuerno izquierdo y de 18 a 20 en el cuerno derecho (Figura 2A,C), mientras que en hembras vacías se observan de una forma altamente sinuosa y que se ramifican y disminuyen su calibre a medida que ingresan hacia la mucosa uterina, donde llegan en forma de capilares (^{Valencia, 2008}). Sin embargo, en estado de gravidez, por la distensión del útero, pierden este aspecto sinuoso y se muestran más rectas, siendo este estiramiento progresivo a medida que avanza la gestación y el útero se distiende, sobre todo en estadios más avanzados de la gestación (Figura 2A,C).

Irrigación Placentaria

Las placentas procesadas por la técnica de repleción-corrosión fueron limpiadas y descritas según los vasos sanguíneos observados (Figura 3).

Figura 3. Irrigación placentaria en la alpaca. A: embrión de 30 días. Se observa la vena umbilical (línea naranja) y la arteria umbilical izquierda (línea azul), que aún no se encuentran contorneadas. B: placenta a los 40 días de gestación (primer tercio). Se observa al embrión dentro del saco amniótico y la irrigación placentaria predominante en el cuerno izquierdo. C: placenta y feto de 165 días (segundo tercio). Irrigación predominante en el cuerno izquierdo. D: molde vascular de irrigación placentaria a los 280 días (tercer tercio). E: Esquema de la Angioarquitectura placentaria. CU, cuerpo del útero; CI, cuerno izquierdo, CD, cuerno derecho; Fa, franja avillosa; Api, Arteria placentaria izquierda; Apd, Arteria placentaria derecha 

La placenta desde estadios muy tempranos ocupa todo el interior uterino, abarcando los dos cuernos y el cuerpo. En el presente estudio, el cuerno grávido fue el izquierdo en todos los casos. La irrigación fetoplacentaria observada siempre fue en mayor grado en el cuerno grávido. Hubo un mayor número de ramas venosas y arteriales en dicho cuerno. El calibre se incrementa con la edad gestacional, así como una mayor ramificación. Todas las ramas arteriales y venosas se anastomosan entre sí. Desde el segundo tercio de gestación en adelante se observan cuatro grandes vasos saliendo de la placenta por el cordón umbilical hacia el feto, dos de los cuales corresponden a las arterias y dos a las venas umbilicales. De estas, una vena y una arteria se generan de la parte anterior del cuerno grávido, llegando sus ramificaciones hasta la mitad de este cuerno, en tanto que los otros dos vasos, una arteria y una vena, se generan de la parte posterior del cuerno grávido, llegando hasta el cuerpo y el cuerno no grávido, con evidente menor ramificación que el cuerno grávido. Todos los vasos (arterias y venas) presentes en la placenta, se encuentran anatómicamente debajo del corion. Por otro lado, en el borde anterior de ambos cuernos placentarios, se puede observar una franja libre de vellosidades coriónicas, denominada franja avillosa (^{Meesters et al., 2019}), de aspecto liso, donde se ubican los vasos más grandes.

La placenta de alpaca es de tipo epitelio-corial difusa (^{Olivera et al., 2003}). En el primer mes de la gestación comienza a formarse las microvellosidades, puesto que macroscópicamente la superficie exterior del corion tiene aspecto liso (Figura 3B), mientras que en el segundo mes es posible ver el característico aspecto rugoso de las microvellosidades coriónicas (^{Fowler, 2010}). En estadios tempranos (30 días de gestación), se logró observar vasos sanguíneos atravesando el cordón umbilical primitivo, los que corresponderían a la vena umbilical (Figura 3A, línea naranja), que estarían dirigiéndose a formar el seno venoso, a través del hígado aun en formación (^{Castro et al., 2015}). También se observó la arteria umbilical izquierda, la que se dirige hacia la zona inguinal del embrión (Figura 3A, línea azul). No obstante, debido al reducido tamaño y la friabilidad extrema del tejido embrionario, fetal y placentario durante el primer tercio de gestación, no se pudo realizar la técnica de repleción-corrosión con látex, pero que según ^{Noden y De Lahunta (1985}), estos vasos se estarían originando en las arterias y venas alantoideas en estadios muy tempranos de desarrollo.

A partir del segundo tercio de gestación se pudo aplicar el látex de moldeo a través de los vasos umbilicales, los cuales pueden diferenciarse macroscópicamente por el evidente mayor grosor de la pared muscular en las arterias umbilicales y las paredes más flácidas y delgadas en las venas umbilicales (^{Barrios-Arpi et al., 2016}). Se observan cuatro vasos a lo largo de todo el cordón umbilical (2 arterias y 2 venas). Las arterias y venas umbilicales se distribuyen por debajo del corion (^{Fowler, 2010}), ramificándose en arterias de segundo y tercer grado (Figura 3D) hasta terminar en capilares que ya no fueron posibles de moldear, ubicados al exterior del corion, en íntima oposición al endometrio, tal como fue descrito en dromedarios (^{Eisa, 2008}), los que se anastomosan mayormente hacia el borde caudal de la placenta (^{Ayala, 2019}).

Hacia el borde anterior de la placenta, del segundo tercio en adelante, se observa una zona libre de vellosidades coriónicas, la franja avillosa (^{Meesters et al., 2019}), que va desde la zona medial hasta el extremo de los cuernos uterinos, debajo de la cual se ubican los grandes vasos provenientes de las arterias y venas umbilicales. Ante esto, para una mejor descripción anatómica, se propone denominarlas arteria y vena placentaria izquierda y derecha, respectivamente (Figura 3D,E).

Irrigación Fetal

La irrigación fetal fue descrita en especímenes procesados mediante la técnica de repleción-corrosión y se realizó la descripción en base a lo observado y la evidencia fotográfica (Figura 4). La irrigación arterial en el feto presenta características particulares que la diferencian de la circulación extrauterina, siendo la diferencia más resaltante que la sangre oxigenada ingresa mediante las venas umbilicales y la sangre venosa sale mediante las arterias umbilicales (^{Valentich et al., 2008}).

Figura 4. Irrigación fetoplacentaria en la alpaca. A: Fotografía de un complejo fetoplacentario en tercer tercio de gestación. F, feto; CU, cordón umbilical; CD, cuerdo derecho; CI, cuerno izquierdo. B: esquema de A, nótese los detalles de la irrigación fetal. C: Nacimiento de las arterias umbilicales, AA, arteria aorta; AI, Arteria iliaca; AUD, Arteria umbilical derecha; AUI, Arteria umbilical izquierda. D: Conducto venoso (CV), VC, Vena cava; H, hígado. E: Conducto arterioso (CA), AA, Arteria aorta; C, corazón; TP, tronco pulmonar 

De la misma forma, la sangre ingresa al feto mediante dos venas umbilicales, las mismas que se mantienen separadas a lo largo de todo el cordón umbilical, pero se anastomosan dentro de la cavidad abdominal del feto formando un solo vaso llamado seno venoso, que ingresa al hígado, tal como fue reportado en dromedarios (Camelus dromedarius) (^{Elgozouli y Osman, 2013}), donde se ramifica en tres vasos medianos, los cuales a su vez se distribuyen a lo largo de todo el órgano. Esos vasos, hacia la cara posterior, se vuelven a juntar en uno solo que emerge hacia atrás para unirse a la vena cava posterior, formando el conducto venoso (Figura 4D), que se une craneal a la emergencia de la vena gástrica (^{Elgozouli y Osman, 2013}). La circulación continúa mediante la vena cava posterior, la cual ingresa a la aurícula derecha, donde la presencia del agujero oval permite que la sangre ingrese a la aurícula izquierda, desde donde pasa al ventrículo izquierdo y sale mediante la arteria aorta, donde se encuentra el Conducto Arterioso (^{Sanchez y Von Lawzewitsch, 1984}; ^{Arteaga-Martínez et al., 2017}) que desvía parte de esta sangre hacia el tronco pulmonar (Figura 4E.).

La arteria aorta se continúa con la aorta abdominal, y caudal a la ramificación de las arterias iliacas, existen dos ramas que emergen, haciendo una curva cercana a la región ventral del abdomen, se juntan y se dirigen hacia la región umbilical. Estos vasos salen por el cordón umbilical, denominándose venas umbilicales (^{Elgozouli y Osman, 2013}), de las cuales, la vena umbilical derecha se dirige hacia el cuerno derecho y la vena umbilical izquierda se dirige hacia el cuerno izquierdo, manteniendo su lateralidad (Figura 4C).