Ysaac Chipayo G.¹; Víctor Leyva V.² y Wilber García V.³

El efecto del estradiol (E2) durante el periodo del reconocimiento maternal de la preñez (días 9-11 post-ovulación) fue estudiado en 44 alpacas con descanso postparto 20 días. Los animales fueron sometidos a una monta controlada con macho entero (15 minutos) y se les aplicó 500 UI de gonadotropina corionica humana (hCG) vía im. Los animales fueron divididos en 3 grupos: El grupo G1 (n=14), recibió 0.2 ml de una solución de vitamina A, D y E vía im los días 8 y 9 post-ovulación. El grupo G2 (n=15) recibió 200 mg de E2 vía im + 0.2 ml de la solución de vitaminas aplicada en G1 los días 8 y 9 post-ovulación. El grupo G3 (n=15) recibió 20 mg de progesterona + 0.2 ml de la solución vitamínica el día 9 post-ovulación. Las hembras fueron enfrentadas al macho para evaluar el comportamiento sexual de las hembras y se les realizó una ecografia transrectal los días 2, 8, 13, 19, 27, 30 y 60 post-ovulación. La ecografía se realizó para determinar el tamaño del folículo dominante y del cuerpo lúteo, y cambios en los cuernos uterinos compatibles con gestación. La tasa de supervivencia embrionaria a partir del día 19 fue mayor en G2 (86.7%), con relación a G1 (57.1%) (p<0.08), pero no hubo diferencias con G3 (73.3%). Este mismo comportamiento se observó en el día 30 y 60. El tamaño de folículo dominante fue menor en el grupo G1 (6.0 ± 2.4) que en los grupos G2 (7.5 ± 1.5) y G3 (8.1 ± 3.2) (p<0.1) en el día 8 post-ovulación. La dinámica folicular fue diferente entre alpacas con supervivencia embrionaria de aquellas con mortalidad embrionaria en el día 2 (p<0.1) pero similar en el día 8. No se encontraron diferencias entre grupos con relación al tamaño del cuerpo lúteo pero el tamaño fue menor en aquellos con mortalidad embrionaria en el día 13 (10.7 ± 1.6 vs 13.3 ± 1.5, p<0.05), lo que mostraría el inicio de la luteólisis a partir del día 13 en las hembras con mortalidad embrionaria. Estos resultados indican que las fallas en el reconocimiento maternal de la preñez y subsecuentemente la tasa de mortalidad embrionaria fueron reducidas por el efecto del estradiol, sugiriendo que el estradiol juega un papel importante en el proceso del reconocimiento maternal de la preñez en alpacas.

Palabras clave: estradiol, alpaca, reconocimiento maternal, cuerpo lúteo.

The effect of oestradiol (E2) during the maternal recognition of pregnancy (9-11 days after ovulation) was studied in 44 alpacas that were 20 days after delivery. The alpacas were mated with an intact male (15 minutes) and received 500 IU of hCG to induce ovulation. The females were divided in 3 groups: The group G₁ (n=14) received 0.2 ml. Im of an A, D and E vitaminic complex days 8 and 9 post-ovulation. In the second group G₂ (n=15) each alpaca received 200 mg of E₂ and 0.2 ml im. of the vitamin complex on (similar to G₁) on days 8 and 9 post-ovulation. The group (G₃; n=15) received 20 mg of progesterone and 0.2 ml im of the some vitamin complex on day 9 post-ovulation. The females were confronted with a male to evaluate their sexual behavior (accept or denial) after then, transrectal ecography of the ovaries and uterus was conducted on days 2, 8, 13,19, 27, 30 and 60 post-ovulation. Embryonic survival was higher in G2 (86.7%) at day 19 in comparison to G1 (57.1% p<0.08), but without G₃ (73.33%). Follicular dinamics in alpacas with embryonic servival was different at day (p<0.01) but not on day 8 relating to those animal with embrionic mortality. In days 30 and 60 post ovulation the differences between G₁ (50%) and G2 (80%) were still present (p<0.1) and G3 (73.33)continue without differences to G1. The size of the corpus luteum did not have statistical differences between the three groups but was smaller in those with embryonic mortality at day 13 (10.7 ± 1.6 vs. 13.3 ± 1.5, p<0.05) which would show that the luteolisis process began at day 13 in that group. These results suggest that failure in maternal recognition of pregnancy and subsequent embryo mortality were reduced by the oestradiol, and there fave indicating that o estradiol plays an important rol in the process of maternal recognition of pregnancy in alpacas.

Key words: oestradiol, alpaca, maternal recognition, corpus luteum.

INTRODUCCIÓN

Las alpacas muestran una alta tasa de mortalidad embrionaria, que puede llegar al 50% dentro de los primeros 35 días de gestación (Fernández-Baca et al., 1970b). Estudios realizados por Leyva y García (1999b) reportan un 12% de mortalidad embrionaria en los primeros 5 días post-ovulación, que estaría causado por un efecto negativo del estradiol sobre el desarrollo del cuerpo lúteo en este periodo (Leyva y García, 2000). 

Entre los días 9-11 post-ovulación se suceden cambios hormonales en las hembras preñadas (Aba et al., 1995), mientras que en las hembras vacías se produce la luteólisis (Fernández-Baca et al., 1970a), por lo que se considera que en este periodo se produce el reconocimiento maternal de la preñez en alpacas (Adams et al., 1991; Aba; et al., 1995; Novoa y Leyva, 1996). 

Se acepta que la prostaglandina es el agente luteolítico en camélidos sudamericanos; sin embargo, los mecanismos que intervienen en el reconocimiento maternal de la preñez en alpacas son aún desconocidos. En otros rumiantes, como la oveja y la vaca, el aumento de la secreción de estradiol tiene un efecto luteolítico al estimular de manera indirecta la secreción de prostaglandina F_2á (Mc Craken, 1984, citado por Hafez, 1996). Por otro lado, los resultados de Leyva y García (2000) sugieren el efecto negativo de los folículos estrogénicos alrededor del periodo de formación del cuerpo lúteo sobre la supervivencia embrionaria de alpacas. Sin embargo, Arainga (2002) reporta haber encontrado folículos grandes (7 mm), alrededor del día 12 post-ovulación en alpacas con supervivencia embrionaria mientras que Skidmore et al. (1994) sugiere que el estradiol cumple un rol importante en el reconocimiento maternal de la preñez en el Camelus dromedaris, otra especie de la familia de las alpacas. 

En base a los resultados antes mencionados, el objetivo del presente trabajo fue determinar el efecto del estradiol sobre la mortalidad embrionaria de alpacas en el periodo del reconocimiento maternal de la preñez (días 9-11 post-ovulación).

MATERIALES Y MÉTODOS

El trabajo se realizó en el fundo San Luis durante los meses de febrero-marzo del 2001. El fundo pertenece a la Estación Experimental del Centro de Investigación IVITA-Maranganí, Facultad de Medicina Veterinaria de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos, y se encuentra ubicado en el distrito de Ñuñoa, provincia de Melgar, departamento de Puno, a una altitud aproximada de 4,200 msnm. 

Se seleccionaron 44 alpacas adultas hembras (2 años) con historia de partos anteriores y con un descanso sexual ≥ 20 días post-parto. Los animales tenían conducta manifiesta de celo ante la presencia del macho y un folículo pre-ovulatorio 6 mm detectado por ecografía transrectal ovárica. Todas las hembras seleccionadas recibieron las mismas condiciones de manejo en praderas naturales.

Los animales recibieron un servicio (≥ 15 minutos) con macho fértil y se les aplicó 500 UI de gonadotropina coriónica humana (hCG) i.m. para asegurar la ovulación. Las hembras fueron asignadas al azar en los siguientes grupos experimentales:

• G₁ (n=14): Grupo testigo. 0.2 ml de un complejo vitamínico (Vitaminas A D E) en vehículo oleoso vía im los días 8 y 9 post-ovulación.
• G₂ (n=15): 200 µg de estradiol/día, vía im los días 8 y 9 post-ovulación, además del complejo vitamínico del G1.
• G₃ (n=15): 20mg de Progesterona (P₄), vía im el día 9 post-ovulación, además del complejo vitamínico del G1.

El propósito del complejo vitamínico en el G₁ para reproducir el trauma de la inyección. En el G₂ y G₃ para aumentar el volumen de la solución inyectable. 

Procedimiento metodológico

El momento de la ovulación se consideró el día 0. Los tres grupos fueron evaluados los días 2, 8, 13, 19, 27, 30 y 60 post-ovulación a través de la observación de la conducta sexual; considerándose como receptivas (adoptan posición de cópula) o no receptivas (rechazo al macho). Inmediatamente después de evaluar el comportamiento sexual se realizaron ecografías transrectales de ovario y útero, usando un ecógrafo B-mode Aloka 210 equipado con un transductor lineal tipo array de 5 MHz de frecuencia.

Se obtuvieron datos sobre tamaño del folículo dominante y del cuerpo lúteo hasta el día 19 postovulación. A partir del día 13 se evaluó la forma de los cuernos uterinos como un indicador de preñez (engrosamiento de las paredes, presencia de vesícula embrionaria y estructuras fetales).

Análisis estadístico

El análisis se realizó con el programa estadístico del SAS (Statistic Analisis System; SAS Institute Inc., 1990). La prueba de análisis de varianza (ANOVA) fue utilizada para analizar la diferencia por efecto de: (a) tamaño de folículo dominante en el día de empadre y en el día 2, 8, 13 y 19 post-ovulación, (b) tamaño de cuerpo lúteo el día 8, 13 y 19 post-ovulación.

La receptividad sexual y la mortalidad embrionaria fueron evaluadas por la prueba Fisher exacto en los días: -1 (empadre), 2, 8, 13, 19, 27, 30 y 60 post-ovulación.

RESULTADOS

Tasa de supervivencia embrionaria

Desarrollo folicular

El tamaño del folículo dominante en el momento del servicio fue similar para los tres grupos tratados teniendo en todos los casos un tamaño superior a 6 mm (tamaño pre-ovulatorio). 

Tamaño folicular de acuerdo a la supervivencia embrionaria 

Desarrollo del cuerpo lúteo 

Tamaño del cuerpo lúteo de acuerdo a la supervivencia embrionaria 

Receptividad sexual

Este es el primer reporte, en base a los resultados obtenidos, que sugiere que la administración de estradiol en los días 8 y 9 de la gestación temprana ocasiona un incremento en la tasa de supervivencia embrionaria. La administración del estradiol se hizo alrededor del periodo en que ocurre la disminución de los niveles séricos de P4 (Aba et al., 1995), y que se presume es el periodo en que se realiza el reconocimiento maternal de la preñez en las alpacas. Estos resultados sugieren que el estradiol puede jugar un rol importante en el proceso del reconocimiento maternal de la preñez, lo cual podría además apoyarse en los resultados obtenidos por Arainga (2002) y Skidmore et al. (1994) indicados previamente. Estos resultados indicarían un mecanismo similar al que se produce en el caso del cerdo para el reconocimiento maternal de la preñez, donde el estradiol bloquea el efecto luteolítico de la prostaglandina F_2a (Geizer et al., 1994; Bazer et al., 1996) para asegurar el mantenimiento del cuerpo lúteo y la preñez.

En el presente trabajo se observó que la administración de P4 en el día 9 post-ovulación produjo una tasa de supervivencia embrionaria (77.3%) mayor que en el grupo control (50.0%). Esto podría ser explicado por el hecho de que la aplicación de P₄ no afecta la vida del cuerpo lúteo maduro, mientras que el efecto contrario se conoce que ocurre en el cuerpo lúteo de reciente formación (antes del día 4 post-ovulación) en ovinos (Thawaites, 1971; Woody et al., 1967), vacunos (Woody et al., 1967) y alpacas (Leyva y García, 1999a). También podría aducirse al efecto positivo de la progesterona exógena cuando se administra entre los días 4 y 5 postovulación en alpacas, cuando el cuerpo lúteo se encuentra en la fase de crecimiento significativo (Leyva y García, 1999a) y en el día 10-17 en vacas gestantes (Robinson et al., 1989, citado por Hansen, 1997). Estos resultados podrían deberse al efecto de la progesterona sobre el endometrio, estimulando el desarrollo de glándulas secretorias y bloqueando la motilidad endometrial (Hafez, 1996), favoreciendo un mejor desarrollo del embrión y un mejor estímulo en el proceso del reconocimiento maternal de la preñez (Garret et al., 1988, citado por Hansen, 1997).

El grupo G₁ tuvo la mayor tasa de mortalidad embrionaria y el menor promedio de tamaño folicular en el día 8 post-ovulación. Esto concuerda con los resultados de Arainga (2002) que sugiere el efecto positivo de la presencia de folículos estrogénicos sobre la supervivencia embrionaria en esta etapa. Por otro lado, al analizar la dinámica del desarrollo folicular en los animales que mantuvieron o perdieron el embrión, se observó que el tamaño del folículo dominante en el día 2 post-ovulación, fue menor en el grupo con supervivencia embrionaria, lo que confirma los resultados de Leyva y García (2000) y Arainga (2002) sobre el efecto negativo de los folículos estrogénicos durante la etapa de formación del cuerpo lúteo (entre los días 0 y 4 post-ovulación). Sin embargo, en el día 13 se produjo un incremento del tamaño del folículo dominante en los animales con supervivencia embrionaria, sugieriendo que estos animales necesitan niveles bajos de estradiol en las etapas de formación del cuerpo lúteo, pero requieren de niveles altos en la etapa del reconocimiento maternal de la preñez.

El 14.3% de las hembras que perdieron el embrión siguieron mostrando rechazo al macho el día 13 post-ovulación, lo que podría deberse a la presencia de un cuerpo lúteo que en la fase de regresión estuvo secretando niveles bajos de progesterona aunque suficientes para inhibir el retorno al celo en esta etapa.

LITERATURA CITADA

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