http://dx.doi.org/10.15381/rivep.v26i1.10916

Factores de riesgo asociados a la Seroprevalencia de Neospora caninum en bovinos naturalmente infectados en la ceja de Selva de Oxapampa, Perú

Risk factors associated with the seroprevalence of neospora caninum in naturally infected bovine in the tropical highlands of Oxapampa, Peru

 

Carlos Portocarrero M.¹, Rosa Pinedo V.^1,4, Néstor Falcón P.², Amanda Chávez V.^1,3

¹ Laboratorio de Microbiología y Parasitología Veterinaria, Facultad de Medicina Veterinaria, Universidad Nacional Mayor de San Marcos, Lima, Perú

² Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia, Universidad Peruana Cayetano Heredia, Lima, Perú

³ E-mail: achavezvg@gmail.com

⁴ E-mail: rosita_vet99@gmail.com

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RESUMEN

El objetivo del estudio fue determinar los factores de riesgo asociados a la seroprevalencia de Neospora caninum en bovinos naturalmente infectados en la ceja de selva de Oxapampa, Perú. El trabajo se desarrolló en 20 hatos ganaderos de los distritos de Chontabamba y Oxapampa. Se obtuvieron muestras de sangre de 388 bovinos mayores de 6 meses, y mediante una encuesta se levantó información situacional y epidemiológica de las ganaderías para identificar los potenciales factores de riesgo. La presencia de anticuerpos contra N. caninum se determinó mediante la técnica de ELISA de competencia (cELISA), utilizando un kit comercial. La asociación entre la seroprevalencia a N. caninum ylas variables evaluadas (grupo etario, procedencia, tamaño del hato, eliminación de restos de animales muertos y número de perros por hato) se analizaron mediante regresión logística. Se encontró una seroprevalencia de 18.8 ± 3.9%. Los factores de riesgo asociados con la seropositividad de N. caninum fueron la presencia de más de tres perros en el hato, la eliminación de restos de animales muertos al aire libre y un tamaño de hato mayor de 100 animales (p<0.05), en tanto que la edad y procedencia no influyeron en el riesgo de presentación de N. caninum.

Palabras clave: anticuerpos, abortos, ELISA de competencia, odds ratio, prevalencia corregida

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ABSTRACT

The aim of the present study was to determine the risk factors associated with the seroprevalence of Neospora caninum in naturally infected bovine in the tropical highlands ofOxapampa, Peru.Thestudywas carried outin 20 herds in Chontabambaand Oxapampa districts. Blood samples were collected from 388 animals older than 6 months of age, and a survey was conducted to identify potential risk factors in the herds. The presence of antibodies against N. caninum was done by the c-ELISA test using a commercial kit. The association between seroprevalence of N. caninum and the variables evaluated (age group, origin, herd size, disposal of animal remains, number of dogs per herd) were analyzed by the logistic regression. The seroprevalence of N. caninum was 18.8 ± 3.9%. The risk factors associated with seroprevalence of N. caninum in bovine were the presence of more than three dogs in the herd, the disposal of animal remains in the environment and a herd size larger than 10 animals (p<0.05), whereas age and origin did not influence the presence of N. caninum.

Key words: antibodies, abortions, competitive ELISA, odds ratio, corrected prevalence

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INTRODUCCIÓN

La neosporosis es una enfermedad parasitaria causada por un protozoario denominado Neospora caninum. Afecta principalmente al ganado bovino, adquiriendo gran importancia a nivel mundial por los altos índices de prevalencia y estar implicado como uno de los principales agentes causales de aborto (Thilsted y Dubey, 1989; Andresen, 1999). N. caninum presenta un ciclo de vida indirecto que incluye al perro (Canis familiaris) y coyote (Canis latrans) como hospederos definitivos (McAllister et al., 1998; Gondim et al., 2004). Así mismo, se describen diversos hospederos intermediarios, tanto animales domésticos (caninos, bovinos, ovinos, caprinos, búfalos y equinos) como silvestres (lobos, coyotes, zorros, ciervos y alces) (Moore et al., 2002; Fuchs et al., 2005).

El parásito puede ser transmitido de forma horizontal a los bovinos, sea por la ingestión de alimento o a través de agua contaminada con ooquistes del protozoo expulsados con las heces en perros agudamente infectados, o de forma vertical desde la madre infectada a su cría durante la gestación (Dubey et al., 2006, 2007). Esto último es una característica importante de la enfermedad, ya que el parásito puede permanecer latente como una infección crónica. Si la infección del feto no resulta en aborto, la cría resultante puede convertirse en portador clínicamente sano (asintomático), pudiendo transmitir la infección a la siguiente generación (Anderson et al., 2000).

En el Perú, estudios realizados en ganado bovino registran la presencia de N. caninum con prevalencias de 30 a 57% en las cuentas lecheras de Lima y Arequipa (Andersen, 1999; Silva et al., 2002). La manifestación de la infección por N. caninum presenta un carácter multifactorial donde pueden estar involucrados factores intrínsecos atribuibles al animal, así como factores extrínsecos atribuibles al rebaño o de la finca ganadera asociados a determinadas prácticas de manejo. En la actualidad, la información acerca de los factores de riesgo es escasa y, además, no existe un tratamiento específico contra la neosporosis. Por lo tanto, las medidas orientadas a la prevención y control fundamentadas en el conocimiento de la epidemiología de la neosporosis bovina son de gran relevancia. El objetivo del estudio fue determinar los factores de riesgo asociados a la seroprevalencia de N. caninum en bovinos naturalmente infectados en la ceja de selva de Oxapampa, Perú.

MATERIALES Y MÉTODOS

Lugar y Animales del Estudio

El estudio se llevó a cabo en 20 hatos bovinos de doble propósito en los distritos de Oxapampa y Chontabamba, departamento de Pasco, Perú, entre mayo y setiembre de 2012. Esta zona de carácter tropical se encuentra ubicada en el flanco amazónico de los Andes centrales y en la porción oriental de la región Pasco. Presenta un clima húmedo semicálido, con temperatura promedio de 13 a 20 ºC (Municipalidad Distrital de Oxapampa, 2009).

Los animales eran, en su mayoría, cruces de razas Bos taurus con razas Bos indicus y con predominio de los cruces Gyr x Holstein (Girolando) y Gyr x Brown Swiss, además de los cruces entre las razas Simmental, Brahman y Jersey con ganado criollo adaptado a la zona. Se trabajó con animales mayores de seis meses de edad, criados en forma semiextensiva, cuya alimentación estuvo basada principalmente en pastos naturales (Paspalum conjugatum, Brachiaria decumbens y B. brizantha).

Tamaño Muestral y Muestras

El tamaño mínimo muestral se determinó mediante la fórmula de proporción de poblaciones finitas con 95% de confianza y 5% de precisión (Daniel, 1996), utilizando 13.2% como prevalencia referencial (Puray et al., 2006). El número mínimo necesario para el estudio fue de 162 muestras; sin embargo, se llegaron a recolectar 388 muestras procedentes de 20 ganaderías. Para esto, se muestreó el 20% de cada hato; es decir, entre 10 y 26 animales por hato.

Se obtuvieron muestras de sangre en tubos Vacutainer®, por punción directa de las venas yugular o coccígea media. Se registró la fecha de muestreo, sexo, edad (mediante dentición y registros), propietario y distrito de procedencia. El material colectado fue almacenado en refrigeración durante dos días y posteriormente trasladado en recipientes térmicos con refrigerante al Laboratorio de Parasitología de la Facultad de Medicina Veterinaria, Universidad Nacional Mayor de San Marcos, Lima, para la extracción de suero, mediante centrifugación a 3500 rpm por 5 minutos.

Determinación de Anticuerpos contra N. caninum

Se utilizó un «kit» comercial de ELISA de Competencia (Neospora caninum Antibody Test Kit, cELISA de VMRD, EEUU) y se siguió el protocolo del fabricante. Se consideraron como muestras positivas aquellas con densidades ópticas que mostraron un nivel de inhibición igual o mayor que 30% y como muestras negativas a un nivel de inhibición menor de 30%.

Análisis de la Información

Se levantó información situacional y epidemiológica de cada rebaño mediante una encuesta. Se colectó información sobre tipo de explotación, tamaño del hato, número de canes por fundo, antecedentes de abortos, disposición de restos de animales muertos y otros aspectos de manejo.

En el análisis se consideraron tres grupos etarios (1 a <3, 3 a 5, >5), dos zonas de procedencia (Oxapampa y Chontabamba), tres tamaños de hato (1 a 50, 51 a 100, >100), dos formas de eliminación de los restos de animales muertos (enterrados, al aire libre) y tres números de perros por hato (0, 1 a 3, >3).

Se determinó la prevalencia de N. caninum mediante la fórmula de Thrusfield (1990), así como los intervalos de confianza. Se calculó la prevalencia corregida según la sensibilidad (97.6%) y especificidad (98.6%) de la prueba (Baszler et al., 2001). Asimismo, se analizó la asociación entre la seroprevalencia a N. caninum y los potenciales factores de riesgo mediante regresión logística, considerando factores de riesgo aquellos con valores p<0.05 (Boubeta y Varela, 2008).

RESULTADOS

La seroprevalencia de neosporosis en bovinos de la zona de Oxapampa fue de 18.8 ± 3.9% (Cuadro 1).

La asociación entre las variables independientes (posibles factores de riesgo) y la variable dependiente (seroprevalencia de N. caninum) mostró asociación significativa (p<0.05) para la variable número de perros por hato. La presencia de más de tres perros en un hato representó 3.21 veces más riesgo de infectarse en comparación con el estrato basal (ningún perro por hato). En forma similar, hatos con más de 100 bovinos y la eliminación al aire libre de restos de animales muertos constituyeron factores de riesgo para la infección con Neospora caninum (OR de 2.89 y 3.31, respectivamente). Otras variables en estudio (grupo etario y procedencia) no mostraron asociación significativa con la seropositividad de N. caninum en bovinos.

DISCUSIÓN

La neosporosis es una enfermedad que está estrechamente involucrada con fallas reproductivas (aborto, mortalidad neonatal) en el ganado bovino. Seroprevalencias de N. caninum en otros países revelan cifras de 46, 56 y 61% en Nueva Zelanda, México y Uruguay, respectivamente (Dubey et al., 2007). En el Perú es altamente prevalente, con valores cercanos al 60% en la región de Arequipa (Andresen, 1999).

El nivel de seroprevalencia de N. caninum encontrada en el presente estudio (18.8 ± 3.9%) es moderado e inferior a otros hallazgos en las principales cuencas lecheras del país como Lima, Arequipa y Cajamarca, cuyas seroprevalencias se encuentran entre el 30 y 60% (Andresen, 1999; Cabrera et al., 2000; Silva et al., 2002). Es posible que estas diferencias se expliquen por el tipo de explotación y mecanismo de reemplazo que realizan los hatos lecheros de Oxapampa, los cuales crían a sus animales bajo un sistema semiextensivo y con animales de reemplazo de la misma zona, en contraste al manejo intensivo donde se tiene el ingreso de animales genéticamente mejorados de otras zonas del país y del extranjero, sin que se realicen exámenes que descarten la presencia de N. caninum. Hasta el presente, el descarte de este protozoo no es obligatorio para la importación de vacunos.

Asimismo, otro aspecto importante a considerar es el patrón racial. El ganado cebuino y, en alguna medida, sus cruces, se caracterizan por su adaptabilidad a ambientes con temperaturas elevadas y su resistencia a enfermedades parasitarias. Investigaciones en Brasil coinciden en afirmar que hembras Holstein tienen 2.13 veces más oportunidad de ser seropositivas a N. caninum que las de raza cebú (Guimarães et al., 2004). No obstante, esta variable no pudo ser evaluada en el presente estudio.

Estudios realizados en bovinos de la selva del Perú son escasos. Rivera et al. (2004) encontraron una seroprevalencia no mayor de 2% en bovinos de la selva baja de Pucallpa; sin embargo, en este caso, la población bovina pertenecía a un centro de investigación, caracterizado por ser un hato con diversos grados de cruces con ganado cebú, escasa introducción de animales y ausencia de perros, frenando la posibilidad de infección horizontal. Por el contrario, Quevedo et al. (2003) en la selva alta de Amazonas señalan una seroprevalencia de 40.4%, explicada por la presencia habitual de perros en las fincas ganaderas y la introducción de vientres procedentes de zonas como Cajamarca, que tiene un alto índice de infección a N. caninum.

La literatura muestra que animales de mayor edad presentan usualmente una seroprevalencia más elevada, pues han tenido mayores posibilidades de tener contacto con el parásito (Jensen et al., 1999; Dyer et al., 2000). Sin embargo, los resultados del presente estudio no mostraron diferencias significativas entre grupos etarios, concordando con lo mencionado por Davison et al. (1999), quienes demostraron que el factor edad no es relevante, pero demostraron la relevancia de la transmisión vertical. Por otro lado, la similitud de la seroprevalencia entre los dos distritos podría deberse a que los ganaderos emplean similares prácticas de manejo.

Los resultados demuestran que bovinos pertenecientes a hatos con más de 100 animales son más susceptibles de presentar la enfermedad (Cuadro 1). Observaciones similares fueron presentadas por Quintanilla- Gozalo et al. (1999) en ganaderías españolas, quienes encontraron asociación significativa entre el tamaño del rebaño y la presencia de la infección en ganado de aptitud cárnica, no así en ganado lechero, siendo más frecuente (64%) en rebaños de tamaño medio (11-49 animales) que en pequeños y grandes (49%).

La práctica de dejar los restos de animales muertos al aire libre es una práctica cotidiana en la zona que influyó sobre la presencia de neosporosis (Cuadro 1). Esta acción facilita el acceso de perros y cánidos silvestres a restos de abortos y a la ingestión de quistes tisulares con bradizoitos. Los canes infectados pasarían a eliminar ooquistes con las heces, contaminando la pastura y forraje; empero, Fischer et al. (2003) no pudieron demostrar asociación con este factor.

La tenencia de tres o más perros representó un riesgo 3.21 veces mayor de infección en el hato que en ausencia de ellos, concordando con otros estudios (Paré et al., 1998; Basso et al., 2001). La presencia de perros en las explotaciones ganaderas representa un factor de riesgo importante, dado que los canes expulsan los ooquistes del parásito en sus heces, facilitando la transmisión horizontal de la neosporosis. Sin embargo, todo indica que 1 o 2 perros no es decisivo, hecho que ha sido corroborado por McAllister et al. (1998), al demostrar que son pocos los ooquistes eliminados a partir del día 8 de la infección y que estos son excretados irregularmente por un corto periodo.

El aborto es el principal signo clínico asociado a la neosporosis bovina (Dubey et al., 2006). Los ganaderos de la zona reportaron una baja ocurrencia de abortos, pero ante la carencia de registros fue imposible establecer su incidencia, así como los índices reproductivos. Por otro lado, los abortos en el bovino pueden presentarse como reacción concomitante a otro tipo de patologías como DVB o IBR (Barr et al., 1997; Dubey, 1999, 2003; Anderson et al., 2000), y que los valores serológicos no necesariamente indican que el animal se encuentre desarrollando la enfermedad, ya que esta prueba únicamente indica que los animales estuvieron expuestos a la infección en algún momento de sus vidas (Oviedo et al., 2007).

CONCLUSIONES

· La seroprevalencia de Neospora caninum en bovinos de ceja de selva de la provincia de Oxapampa, Pasco, fue moderada (18.8 ± 3.9%).

· Los factores de riesgo asociados con la seropositividad de N. caninum fueron la presencia de más de tres perros en el hato, la eliminación de restos de animales al aire libre y un tamaño de hato mayor de 100 animales (p<0.05), en tanto que la edad y procedencia no influyeron en el riesgo de presentación de N. caninum.

Agradecimiento

El presente estudio fue financiado por el Fondo de Promoción de Trabajo de Tesis de Pregrado del Consejo Superior de Investigaciones- UNMSM (Código: 120801057). Los autores agradecen al personal de la Dirección Agencia Agraria Oxapampa por las facilidades prestadas para la ejecución en campo del estudio.

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Recibido: 1 de diciembre de 2013

Aceptado para publicación: 20 de agosto de 2014