Abstract

VIVAS RUIZ, Dan et al. Barnetobina: un nuevo principio coagulante purificado del veneno de la serpiente peruana Bothrops barnetti. Rev. Soc. Quím. Perú [online]. 2010, vol.76, n.3, pp.261-270. ISSN 1810-634X.

Se ha aislado una enzima similar a trombina, barnetobina, del veneno de la serpiente peruana Bothrops barnetti, mediante dos pasos cromatográficos sobre CM Sephadex C-50 y Sephadex G-100, en ambos casos utilizando acetato de amonio 0,05 M a pH 5,0. La enzima fue purificada 45 veces con un rendimiento de 14% y por PAGE-SDS se obtuvo una sola banda proteica de 52 kDa en condiciones reductoras con 2β-mercaptoetanol y de 48 kDa en condiciones no reductoras, determinαndose que la enzima consta de una sola cadena polipeptνdica con al menos un enlace disulfuro. El tratamiento con N- glicosidasa (PNGasa F) determinσ que es una glicoproteνna, con un 45% de contenido total de carbohidratos. La enzima mostró tener actividad coagulante sobre plasma citratado y fibrinógeno. También mostró actividad amidásica sobre BApNA y Chromozym TH. La potencia coagulante sobre fibrinógeno bovino fue equivalente a 131 unidades NIH de trombina/mg. La enzima es inhibida por PMSF y por el inhibidor de tripsina de soya calificándola como una serinoproteasa; el pH óptimo para la actividad amidolítica fue de 8,0 y es estable hasta los 40°C. Se demostró mediante inmunoelectroforesis e inmunodifusión la antigenicidad de la enzima frente al suero antibotrópico polivalente, así como su neutralización probada sobre plasma citratado (Dosis eficaz: 250 µl de antiveneno/ mg de enzima).

Keywords : Veneno; serpiente; enzima similar a trombina; Bothrops barnetti; coagulante.

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