Abstract

MESIA GUEVARA, Marco; LAZO MANRIQUE, Fanny  and  YARLEQUE CHOCAS, Armando. Purificación y caracterización de un nuevo principio coagulante del veneno de la serpiente peruana Bothrops pictus. Rev. Soc. Quím. Perú [online]. 2011, vol.77, n.3, pp.182-190. ISSN 1810-634X.

Se ha purificado una proteína coagulante del tipo enzima similar a trombina, del veneno de la serpiente peruana Bothrops pictus mediante dos pasos cromatográficos, sobre Sephadex G-100 SF y CM-Sephadex C-50, en ambos casos utilizando buffer acetato de amonio 0,05M pH 6,0. La enzima fue purificada 18 veces con un rendimiento de 40,74% y por PAGE- SDS se obtuvo una sola banda proteica de 54,4 kDa en condiciones reductoras con 2 β-mercaptoetanol y de 45,4 kDa en condiciones no reductoras, por lo que se estableciσ que la enzima consta de una sola cadena polipeptνdica con al menos un enlace disulfuro. La enzima coagulante mostrσ tener actividad sobre fibrinσgeno bovino así como sobre el substrato cromogénico BApNA; siendo inhibida por heparina y por el inhibidor de serinoproteasa PMSF. La enzima registró un pH óptimo de 8,0 para su actividad amidolítica. Los ensayos térmicos mostraron que es estable hasta los 50 °C. El ion Mn²⁺, a una concentración final de 10mM, es un potente activador de la enzima, mientras que Ca²⁺ y Mg²⁺ no muestran efecto significativo.

Keywords : Veneno; serpiente; enzima similar a trombina; Bothrops pictus; coagulación.

        · abstract in English     · text in Spanish     · Spanish ( pdf )