ABSTRACT

Durine and Glanders are cronic and progressive infectious diseases of horses, donkeys and mules, and human beings in case of glanders. These diseases are caused by a parasite, Trypanosoma equiperdum (T. equiperdum) and a bacteria Burkholderia mallei (B. mallei), respectively. In Peru there are no information about the clinical and serological evidence of durine and glanders. The objective of this study was to detect antibodies against T. equiperdum and B. mallei in serum samples from horses (n=505) of normal appearance, and from different areas of Peru but mainly from Lima by using the complement fixation test. No antibodies against T. equiperdum and B. mallei were detected in the serum samples tested. These results suggest that both diseases are absent or the prevalence are below 1% in the studied Peruvian horses . 

Key words: durine, Trypanosoma equiperdum, glanders, Burkholderia mallei, antibodies, complement fixation, horse, donkey, mule.

El Perú cuenta con una población de 2'175,730 équidos de los cuales 1'062,154 son caballos y 1'113,576 son burros y mulas (INEI, 1996). A diferencia de otras especies, existe poca información sobre la situación zoosanitaria de los équidos en el país. La literatura reporta enfermedades infecciosas y parasitarias de impacto económico y algunas restrictivas para el comercio internacional de estos animales como la durina y el muermo, consideradas en la Lista B del Organismo Internacional de Epizootias (OIE). 

La durina es una enfermedad venérea crónica caracterizada por la presencia de lesiones edematosas en el tracto genital del macho y la hembra, y en el sistema nervioso central, acompañada de una progresiva emaciación. La enfermedad es producida por el parásito T. equiperdum relacionado morfológica y serológicamente a los T. brucei, rhodesiense y gambiense (Foreign Animal Disease, United States Animal Health Association, 1998). 

El T. equiperdum está presente en las sercreciones uretrales y vaginales de los animales infectados de donde puede ser transmitido al animal susceptible durante el servicio. Los signos clínicos son variables dependiendo del grado de virulencia de la cepa infectante y de factores estresantes. La enfermedad ha sido erradicada de muchos países pero aún persiste en el Asia, sureste de Europa, norte y sur de Africa y América del Sur (Foreign Animal Disease, United States Animal Health Association, 1998). 

El muermo es una enfermedad caracterizada por el desarrollo de nódulos y úlceras, localizados frecuentemente en las vías respiratorias superiores, pulmones y piel de los équidos. Es producida por la bacteria Burkholderia mallei (B. mallei), un bacilo gram negativo, inmóvil, aerobio y anaerobio facultativo (OIE, 1996). Estudios recientes indican que la bacteria puede tener cápsula, que es un factor que contribuye a su persistencia en macrófagos del hígado, bazo y pulmón (Popov et al., 2000).

La B. mallei es transmitida por via digestiva, pero probablemente también por inhalación y heridas. Los animales mal nutridos y mantenidos en condiciones deficientes de higiene son más susceptibles (Radostitis et al., 1994). La enfermedad se ha presentado ocasionalmente en leones, tigres y leopardos de zoológicos como resultado del consumo de carcasas de caballos infectados con B. mallei. El hombre es también susceptibe y la infección es casi siempre mortal. Esta enfermedad ocurre en personas que trabajan con el microorganismo en el laboratorio o que manipulan animales enfermos (OIE, 1996; Radostitis et al., 1994).

Actualmente, la Asociación Nacional de Criadores y Propietarios de Caballos Peruanos de Paso, tiene la posibilidad de exportar sus caballos a países de la Unión Europea, pero siempre que el país esté libre de estas enfermedades. Esta razón motivó la realización del presente estudio cuyo objetivo fue determinar la presencia de anticuerpos contra T. equiperdum y B. mallei en equinos, mediante la prueba de fijación del complemento y también de esta manera contribuir con el Servicio Nacional de Sanidad Agraria (SENASA) en lo referente al sistema de vigilancia epidemiológica de enfermedades exóticas para el Perú.

Se muestrearon 505 caballos de apariencia normal, procedentes de diversos lugares del país, y de diferente actividad: Caballos Peruanos de Paso (n=176), caballos de trabajo (salto, equitación, de la escolta presidencial, labores agrícolas) (n=264) y caballos de carrera (n= 65). El tamaño muestral se obtuvo mediante la fórmula de prevalencia límite, tomando como referencia una prevalencia crítica de 1%, con un nivel de confianza del 95% (CEPANZO, 1979). Las muestras de sangre fueron obtenidas en un matadero de Lima Metropolitana (n=184), y en los respectivos centros de crianza (n=321). Las muestras fueron procesadas en el Laboratorio de Virología de la Facultad de Medicina Veterinaria de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos.

La detección de anticuerpos contra el T. equiperdum y B. mallei fue realizado mediante la prueba de fijación del complemento. Para el muermo se utilizó un kit de reactivos de procedencia comercial, Muermo (id-dlo, The Netherlands), y para la durina se utilizaron reactivos donados por Onderstepoort Veterinary Institute, Sud Africa. Se utilizaron los protocolos descritos en el manual del OIE (2000), el manual del National Veterinary Services Laboratories, Ames Iowa (1997) de los Estados Unidos y el manual del Onderstepoor Veterinary Institute (1996).

El tamaño muestral fue diseñado para que con un nivel de confianza del 95% se obtenga por lo menos un animal positivo a anticuerpos entre los animales muestreados si la durina o muermo hubiesen tenido una prevalencia de 1%.

La ausencia de animales reactores al T. equiperdum y B. mallei en 505 muestras de caballos de diversos lugares del país (Cuadro 1) indicó que los animales muestreados no fueron expuestos a los microorganismos en estudio significando su ausencia en el país o de existir, tendrían una prevalencia menor a 1%, representando en este caso un riesgo mínimo para la salud de los equinos, por lo menos de áreas en riesgo como podría ser Lima.

En el Perú no existen reportes de la ocurrencia clínica ni serológica de la durina o del muermo en la población de équidos. Los resultados del presente estudio podría confirmar la ausencia de esta infección en la población de caballos muestreados. Sin embargo, del total de muestras de suero estudiadas, 17 (3.37%) presentaron actividad anticomplementaria, por lo que no es posible indicar que se obtuvo un 100% de resultados negativos.

En la actualidad, la durina y el muermo han sido erradicados de muchos países del mundo pero continúan siendo prevalentes en muchos países de medio oriente y Asia, como Turquía (Arun et al., 1999), Irak (Al-Ani et al., 1998), Pakistán (Muhammad et al., 1998), Mongolia, Myanmar, Indonesia y China (FAO, 1997; OIE, 1996). El muermo ha sido reportado además en Brasil en 1968 (FAO, 1997); en 1999 fue nuevamente reportada en équidos de trabajo en los Estados Brasileños de Alagoas y Pernambuco (OIE, 1999), y según el último reporte de la FAO, hasta la fecha, el muermo se ha detectado en el noreste del Brasil, que comprende los Estados de Alagaos, Ceara, Sergipe, Maranhao, Pernambuco y Piauí (OIE, 2000).

Se debe tener presente que las enfermedades crónicas o subclínicas constituyen el mayor riesgo de ser introducidas a una área, región o país libre, a través del comercio internacional de caballos (Muhammad et al., 1998), por lo que actualmente se exige que los caballos a ser importados sean seronegativos a durina, muermo y otras enfermedades como la piroplasmosis (Katz et al., 1999).

Un caballo infectado en forma aguda o crónica por la B. mallei desarrolla anticuerpos (IgG, IgM) desde la primera semana de la infección y los anticuerpos perduran por mucho tiempo en los casos crónicos (Al-Ani et al., 1998; OIE, 1996). La prueba de fijación del complemento es considerada como prueba oficial para el comercio internacional de caballos. Es una prueba sumamente engorrosa y que no puede ser utilizada con sueros hemolisados y sueros anticomplementarios que siempre existen; posee alta especificidad (90-95%) aunque su sensibilidad es menor; y es capaz de detectar anticuerpos desde la primera semana post- infección. Actualmente estan desarrollándose técnicas de ELISA como pruebas de tamiz y otras como inmunotransferencia, inmunofluorescencia como pruebas alternativas confirmatorias para el comercio internacional (Alemu et al., 1997; Katz et al., 1999). 

Agradecimiento

Los autores agradecen a los veterinarios de campo del SENASA, Ministerio de Agricultura, por su colaboración en la colección de las muestras de los equinos de los diferentes haras del valle de Lima.

El presente trabajo fue financiado por la Asociación de Propietarios y Criadores de Caballos Peruanos de Paso del Perú.

LITERATURA CITADA

1. Al-Ani, F.K.; O.F. Al-Rawashdeh; A.H. All; F.K. Hassan. 1998. Glanders in horses: clinical, biochemical and serological studies in Iraq. Veterinarski Arhiv. 68: 155-162.         [ Links ]

2. Alemu, T.; A.G. Luckins; L.P. Phipps; S.W.J. Reid; P.H. Holmes. 1997. The use of enzime linked immunosorbent assays to investigate the prevalence of Trypanosoma equiperdum in Ethiopian horses. Vet. Parasitol. 71: 239-250.         [ Links ]

3. Arun, S.; H. Neubauer; A. Gurel; G. Ayyildiz; B. Kuscu; T. Yesildere. 1999. Equine glanders in Turkey. Vet. Rec. 144: 255-258.         [ Links ]

4. Cepanzo. 1979. Procedimientos para estudios de prevalencia por muestreo. Nota técnica No 18. p. 28-29. OPS/OMS. Buenos Aires. Argentina.         [ Links ]

5. FAO. 1997. Anuario de sanidad animal. p. 42, 57, 72. Roma.         [ Links ]