Determinación de anticuerpos contra toxoplasma gondii en búfalos de agua (bubalus bubalis) en el distrito de jenaro herrera, Loreto, Perú

Determination of antibodies against toxoplasma gondii in buffalos (bubalus bubalis) of jenaro herrera district, Loreto, Peru

 

Karla Esteves V.¹, Amanda Chávez V.^1,3, Eva Casas A.¹, Olga Lí E.²

1 Laboratorio de Microbiología y Parasitología Veterinaria,

2 Laboratorio de Patología Clínica y Biología Molecular, Facultad de Medicina Veterinaria, Universidad Nacional Mayor de San Marcos, Lima

3 E-mail: achavezvg@gmail.com

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RESUMEN

El objetivo del estudio fue determinar la seroprevalencia de Toxoplasma gondii en búfalos del distrito de Jenaro Herrera, región Loreto, Perú. Se recolectaron 70 muestras de sangre de búfalos hembras en agosto de 2008 para la detección de anticuerpos contra T. gondii mediante las técnicas diagnósticas de hemaglutinación indirecta (HAI) e inmunofluorescencia indirecta (IFI). Los resultados indicaron que el 35.7 ± 11.2% de las muestras fueron positivas a HAI y el 17.1 ± 8.8% a IFI.

Palabras clave: toxoplasmosis, búfalos, HAI, IFI, seroprevalencia

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ABSTRACT

The aim of this study was to determine the seroprevalence of Toxoplasma gondii in buffalos in the Jenaro Herrera district, Loreto, Peru. A total of 70 blood samples were collected in female buffalos for the detection of antibodies against T. gondii by the Indirect Hemaglutination Test (IHA) and the Indirect Immunofluorescence Test (IFI). The results showed that 35.7 ± 11.2% of the samples were positive by IHA and 17.1 ± 8.8% were positive by IFI.

Key words: toxoplasmosis, buffalo, IHA, IFI, seroprevalence

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INTRODUCCIÓN

La toxoplasmosis es una enfermedad parasitaria de distribución mundial producida por el Toxoplasma gondii, protozoario cuyos hospederos definitivos son los miembros de la familia Felidae y los hospederos intermediarios son las aves y mamíferos, incluido el hombre. Este parásito ocasiona problemas reproductivos en la ganadería, que se traducen en infertilidad, aborto, muerte fetal, momificación y mortalidad neonatal, presentándose como incidentes esporádicos pero que pueden llegar a afectar a una proporción importante de las hembras gestantes (Rojas et al., 1989).

En el Perú se ha reportado la seroprevalencia de T. gondii en varias especies domésticas. Se encontró el 17% en bovinos utilizando la prueba de inmunofluorescencia – IFI (Tejada y Balbin, 1989). En otras especies, utilizando mayormente la prueba de hemaglutinación indirecta (HAI), se reportan una diversidad de valores; por ejemplo, de 10 a 32% en llamas (Gómez et al., 2003; Saravia et al., 2004), 21 a 53% en alpacas (Gómez et al., 2003; Poma et al., 2008), 14.9% en vicuñas (Pastor et al., 2003), 39 a 85% en ovinos (Rojas, 1990; Caldas, 2005), 57.9% en caprinos (Vidal, 1990) y de 27.7% en cerdos (Saavedra y Ortega, 2004). Se requiere identificar las causas de la gran variación de la seroprevalencia a toxoplasmosis en las especies animales de producción, así como en las áreas geográficas del país, a fin de determinar las zonas de mayor riesgo para la salud pública.

La crianza de búfalos de agua (Bubalus bubalis) en el continente americano está cada vez más difundida, pudiendo encontrarse en Argentina, Bolivia, Brasil, Colombia, Cuba, Ecuador, Paraguay, Perú, Venezuela y Trinidad y Tobago, entre otros países (Borghese y Mazzi, 2005). Estudios de seroprevalencia de toxoplasma en búfalos de agua en India reportan valores de 100% (Selvaraj et al., 2007) y en Irán, usando la técnica modificada de aglutinación (MAT), se reportan valores de 7 y 4% con diluciones de 1:25 y 1:50, respectivamente (Hamidinejat et al., 2010), en tanto que en Brasil se han encontrado prevalencias de 3.8 a 49.9% (Gondim et al., 1999; Melo de Souza, 2001).

La población de búfalos de agua en el Perú se estima en 30 000 cabezas (Almaguer, 2007). Esta especie fue introducida en la llanura amazónica peruana en 1966 por la Universidad Nacional de la Amazonía Peruana (Isuiza et al., 1996), tornándose como una especie productiva de importancia para la economía rural. El distrito de Jenaro Herrera, ubicado en el noreste de la selva peruana, provincia de Requena, Loreto, cuenta con 402 cabezas dedicadas a la producción lechera (García, 2006). Los criadores de búfalos conforman un 99% de la población del distrito, prevaleciendo el sistema de crianza extensivo, y donde solo el 44% de los criadores estabula el ganado por las noches. Los ganaderos poseen, además, equinos, vacunos, porcinos y caprinos (García, 2006).

Existe escasa información sobre las enfermedades parasitarias que pueden afectar a los búfalos de agua de la llanura amazónica, por lo que el objetivo del presente estudio fue determinar la seroprevalencia de T. gondii en esta especie.

MATERIALES Y MÉTODOS

El estudio se desarrolló en agosto de 2008 en el distrito Jenaro Herrera, ubicado en la margen derecha del bajo Ucayali, Perú. La zona es considerada como bosque húmedo tropical, con una precipitación promedio anual de 2759 mm, temperatura media de 26.8 ºC con máxima de 32.6 y mínima de 21.1 ºC, y humedad relativa promedio anual de 87% (Isuiza et al., 1996), y se encuentra a una altitud de 125 msnm.

El tamaño muestral se calculó mediante el método para una proporción de una población conocida (Thrusfield, 1990), consi derando una prevalencia de 3.85%, tomada de un estudio realizado en búfalos del Estado de Bahía, Brasil, utilizando una técnica de aglutinación en látex (Gondim et al., 1999). Se consideró un nivel de confianza de 95% y un error esperado de 5%, dando como resultado 50 animales dentro de una población de 402 (García, 2006). Sin embargo, en el estudio se llegó a muestrear a 70 animales.

 

La muestra se distribuyó en tres grupos etarios (2 a 4, 5 a 7, 8 a 12 años). Se colectaron muestras de sangre solamente a animales hembras. Los sueros resultantes fueron transportados a 4 ºC hasta el Centro de Investigación IVITA en Iquitos, y de allí en congelación al Laboratorio de Parasitología de la Facultad de Medicina Veterinaria, Universidad Nacional Mayor de San Marcos, en Lima.

Se empleó la técnica de hemaglutinación indirecta (HAI) para la detección de anticuerpos contra T. gondii mediante el kit comercial Toxotest-HAI (Wiener Lab, Argentina). Se emplearon diluciones hasta de 1/64 en los sueros. Se consideró positivos a valores ≥1/16 (punto de corte) de acuerdo al kit. Adicionalmente y para confirmar el diagnóstico, se empleó la técnica de inmunofluorescencia indirecta (IFI) a una dilución de 1:64 (Melo de Souza et al., 2001).

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

La seroprevalencia de T. gondii fue de 35.7 ± 11.2% usando la prueba de hemaglutinación indirecta (HAI) y de 17.1 ± 8.8% con la técnica IFI (Cuadro 1). Esta seroprevalencia fue menor que los valores de 49.9% hallados para esta especie en Sao Paulo, Brasil con la prueba de IFI (Melo de Souza et al., 2001), aunque bastante mayores al 3.9% de prevalencia registrada en Bahía, Brasil, con aglutinación en látex (Gondim et al., 1999).

Estas diferencias están probablemente influenciadas por factores medioambientales, presencia del hospedero definitivo (felinos domésticos y silvestres) y la técnica diagnóstica utilizada (Luzón et al., 1997). Sao Pablo posee un clima subtropical con temperaturas de 16 a 22.5 ºC y 1450 mm de precipitación pluvial anual. Bahía posee un clima tropical donde las temperaturas llegan hasta los 37 ºC y 1500 mm de precipitación y Loreto tiene un clima tropical con temperaturas que llegan hasta 32 ºC y con 2000 a 3000 mm de precipitación. Los ooquistes, cuya ingestión es la principal forma de contagio para los hervíboros, sobreviven con más facilidad en suelos húmedos y cálidos con temperaturas alrededor de los 25 ºC (Dubey, 1994).

La técnica de HAI posee una sensibilidad de 81.6% y una especificidad de 97.1%, en tanto que la técnica IFI tiene una especificidad de 100% y sensibilidad de 75% (Ruenretai et al., 2010). No obstante, la prueba de aglutinación en látex posee una sensibilidad de 45.9% y una especificidad de 96.6% (Dubey, 1995), pudiendo ser esta la causa de los bajos valores de seroprevalencia en los búfalos de Bahia (Gondim et al., 1999).

La prueba «Dye test» es la prueba «gold standard» para el diagnóstico de toxoplasmosis en el hombre; sin embargo, la prueba ha demostrado ser poco confiable en otras especies. Por otro lado, la inmunofluorescencia indirecta (IFA) es una prueba más segura y permite diferenciar los anticuerpos IgM e IgG. Asimismo, la prueba de aglutinación directa y la prueba de aglutinación en látex son relativamente rápidas y no requieren de complejas instalaciones de laboratorio, en tanto que la técnica de ELISA requiere un laboratorio con equipos más sofisticados, pero puede manejar gran número de muestras y no requiere contar con interpretación humana para el resultado (OIE, 2012).

Se debe reflexionar sobre la presencia del hospedero definitivo en el medio ambiente. La presencia de félidos silvestres, como el otorongo y el jaguar, es frecuente en Loreto, pudiendo actuar estos como diseminadores de la forma infectiva (el ooquiste). Se debe tener en cuenta que los félidos silvestres pueden sustituir al gato en las circunstancias epizootiológicas donde este último no interviene (Cordero del Campillo et al., 1999). Por otro lado, la presencia de gatos en la zona no está documentada; sin embargo, durante la toma de muestras se evidenció su presencia. Se sabe que un gato infectado puede eliminar ooquistes durante una a dos semanas y una sola deyección puede contener millones de ellos (Cordero del Campillo et al., 1999).

Se conoce que la prevalencia de toxoplasma se incrementa con la edad, ya que existe mayor riesgo de exposición al parásito a medida que aumenta la edad (García Vázquez et al., 1990; Acha y Szyfres, 1992; Botero y Restrepo, 1998). Los resultados del presente estudio coincide con esto, observándose que la prevalencia para los animales de 8 a 12 años fue de 53.3 ± 11.6 y de 20.0 ± 9.3% con las técnicas de HAI e IFI, respectivamente.

La seroprevalencia de T. gondii en búfalos de agua ha sido estudiada en muchos países, pero este pareciera ser el primer estudio serológico sobre este agente en esta especie en el país.

CONCLUSIONES

La seroprevalencia para Toxoplasma gondii en búfalos de agua en el distrito Jenaro Herrera, Loreto, Perú, fue de de 35.71 ± 11.2% con la técnica de diagnóstico de hemaglutinación indirecta (HAI) y de 17.1 ± 8.8% con la técnica de inmunofluoresecencia (IFI).

 

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Recibido: 24 de julio de 2012

Aceptado para publicación: 11 de abril de 2013