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Revista de Investigaciones Veterinarias del Perú

versión impresa ISSN 1609-9117

Rev. investig. vet. Perú vol.30 no.1 Lima ene./mar. 2019

http://dx.doi.org/10.15381/rivep.v30i1.14935 

ARTÍCULOS PRIMARIOS

Parámetros hematológicos de reproductores de Brycon amazonicus (Bryconidae) en cultivo

Hematological parameters of Brycon amazonicus (Bryconidae) broodstock in captivity

 

Anaí Gonzales1,2,4, Giana Curto1,3, Christian Fernández-Mendez1

1 Instituto de Investigaciones de la Amazonía Peruana-IIAP, Programa para el Uso y Conservación del Agua y sus Recursos-AQUAREC, Iquitos, Perú

2 Programa de Pós-Graduação em Biodiversidade Tropical (PPGBIO), Universidade Federal do Amapá (UNIFAP), Macapá, Brasil

3 Dirección Regional de la Producción de Loreto, Gobierno Regional de Loreto, Iquitos, Loreto, Perú

4 E-mail: anaigonzalesf@gmail.com


RESUMEN

El objetivo de este estudio fue determinar los valores hematológicos de reproductores de Brycon amazonicus bajo cultivo en Iquitos, Perú. Se tomaron muestras de sangre de 12 ejemplares (1.62 ± 0.45 kg y 51.38 ± 2.93 cm) mantenidos en estanques de tierra y alimentados dos veces al día con una dieta comercial extruida al 22% de proteína bruta. Los peces fueron colectados con una red y anestesiados con eugenol. La extracción de sangre se realizó con jeringas descartables conteniendo EDTA (10%). Los valores obtenidos de la serie eritrocítica fueron: hematocrito 53.3 ± 4.8%; hemoglobina 20.1 ± 3.2 g/dl; eritrocitos 2.8 ± 0.5 x106/µl; VCM 194.4 ± 54.4 fl; CHCM 37.7 ± 4.8 g/dl; HCM 72.6 ± 17.7 pg. El número de leucocitos fue de 8.1 ± 6.0 x103/µl. En el recuento diferencial de leucocitos, los linfocitos y monocitos fueron las células de mayor proporción en comparación con los neutrófilos, eosinófilos y basófilos. La proteína total sérica fue de 3.7 ± 0.4 g/dl y la glucosa de 60.2 ± 39.1 mg/dl. Los valores encontrados para B. amazonicus fueron comparados con otras especies del género Brycon mostrando algunas variaciones, pero dentro del rango reportado para peces teleósteos.

Palabras clave: Amazonía; acuicultura; hematología; sanidad


ABSTRACT

The objective of this study was to determine the hematological values of Brycon amazonicus broodstock under culture in Iquitos, Peru. Blood samples were taken from 12 specimens (1.62 ± 0.45 kg and 51.38 ± 2.93 cm) maintained in earthen ponds and fed twice a day with a commercial diet with 22% crude protein. The fish were collected with a net and anesthetized with eugenol. Blood extraction was performed with disposable syringes containing EDTA (10%). The values obtained from the erythrocytic series were: hematocrit 53.3 ± 4.8%; hemoglobin 20.1 ± 3.2 g/dl; erythrocytes 2.8 ± 0.5 x106/µl; VCM 194.4 ± 54.4 fl; CHCM 37.7 ± 4.8 g/dl; HCM 72.6 ± 17.7 pg. The number of leukocytes was 8.1 ± 6.0 x103/µl. In the differential count of leukocytes, the lymphocytes and monocytes had greater proportion in comparison with neutrophils, eosinophils and basophils. The total serum protein was 3.7 ± 0.4 g/dl and the glucose was 60.2 ± 39.1 mg/dl. The values found for B. amazonicus were compared with other species of the genus Brycon showing some variations, but within the range reported for teleost fishes.

Key words: Amazonia; aquaculture; hematology; health


INTRODUCCIÓN

Brycon amazonicus Spix y Agassiz, 1829,esunpeznativodela cuencadelAmazonas (Lima, 2017), presenta características migratorias y régimen alimenticio omnívoro (Blanco-Parra et al., 2006). La alimentación en el medio natural está relacionada con el ciclo hidrobiológico del agua, siendo que en la época de creciente del cauce de los ríos se alimentan de insectos adultos y restos de peces y en la época de vaciante se alimentan de vegetales (Val y Almeida-Val, 1995; Pizango-Paima et al., 2001). La carne de esta especie es apreciada por parte de los pobladores amazónicos y, por lo tanto, es una de las especies de mayor desembarque en los mercados de Iquitos, Perú, superadas solo por especies como Arapaima gigas, Colossoma macropomum y Brachyplatystoma rousseauxii (García-Vásquez et al., 2012).

Actualmente se viene realizando el cultivo de esta especie con potencial piscícola a fin de reducir la presión de pesca, además que posee características favorables como la reproducción por inducción hormonal, aceptación al alimento balanceado y rápido crecimiento (Romagosa et al., 2001; Zaniboni et al., 2006; Nuñez, 2009). Sin embargo, existen factores que limitan el desarrollo de la crianza como es el intenso canibalismo en los primeros estadios de vida (Zaniboni et al., 2006; Leonardo et al., 2008). Se han desarrollado estudios de la respuesta fisiológica del estrés ante la densidad, manipulación y transporte (Carneiro y Urbinati, 2001, 2002; Urbinati et al., 2004; Rocha et al., 2004).

Los parámetros hematológicos son una herramienta útil para medir el estado fisiológico de los peces (Ranzani-Paiva et al., 2013) frente a diversas condiciones; entre ellas, la respuesta al estrés, enfermedades y desnutrición, que pueden alterar el patrón característico del eritrograma y de los valores bioquímicos (Tavares-Días y Moraes, 2004). Es poco lo que se conoce sobre los parámetros hematológicos de B. amazonicus, tanto en el medio natural como en cautiverio. Por lo tanto, se requiere investigar en esta área porque se ha encontrado variaciones dentro de especies del género Brycon, pudiendo deberse a la localidad de distribución o la especie estudiada (Tavares-Días et al., 1999;Arias et al., 2003; Oliveira et al., 2015). De esta manera, el objetivo del presente estudio fue determinar los parámetros hematológicos de reproductores B. amazonicus mantenidos en condiciones de cautiverio.

MATERIALES Y MÉTODOS

Condiciones de Cultivo

Se utilizaron 12 ejemplares adultos de B. amazonicus (peso: 1.62 ± 0.45 kg; longitud total: 51.38 ± 2.93 cm), cultivados en un estanque de tierra, a una densidad de 1 pez/ 26 m2, en las instalaciones del Centro de Investigaciones Fernando Alcántara Bocanegra (CIFAB) del Instituto de Investigaciones de la Amazonía Peruana (IIAP), localizado en la carretera Iquitos-Nauta, provincia de Maynas, Loreto, Perú (03° 48' 48.9'’ S -73° 19' 2'’ O).

Los peces fueron alimentados con una dieta comercial extruido al 22% de proteína bruta, dos veces al día (08:00 y 14:00) con una tasa de alimentación de 1.5%. Los parámetros de agua se analizaron tres veces al día (07:00, 12:00, 18:00) con mediciones diarias de temperatura (29.31 ± 1.44 °C), oxígeno disuelto (6.33 ± 1.48 mg/l), pH (5.96 ± 0.38) y conductividad (14.70 ± 1.68 µS/cm) con un multiparámetro portátil (Hach, HQ40D). Los parámetros del agua fueron similares a los reportados durante el cultivo de reproductores de B. amazonicus (Arias et al., 2003).

Colecta de Sangre y Análisis

Los peces fueron colectados con una red y anestesiados inmediatamente con eugenol (0.05 ml/l). Los peces, una vez inmóviles, fueron trasladados con una «almohadilla» a una mesa. Se emplearon toallas húmedas para la inmovilización del pez y vendaje de los ojos. Se extrajo 1 ml de sangre mediante punción de la arteria caudal a nivel del arco hemal, utilizando jeringas desechables de 3 ml conteniendo EDTA (10%). Una parte de cada muestra se colocó en tubos de 2 ml y fueron conservadas en refrigeración (4 °C) para preservar la viabilidad de las células, mientras que la otra parte se colocó en tubos de 0.5 ml y centrifugadas para obtener el plasma sanguíneo con el fin de realizar las pruebas bioquímicas.

Se realizó la determinación de hematocrito (Hct) por el método del microhematocrito (Goldenfarb et al., 1971), concentración de hemoglobina (Hb) por el método de la cianometahemoglobina (Laboratorios BIOLAB, UK) a 540 nm, conteo de eritrocitos (Er) y leucocitos (Leu) con la solución Natt-Herrick (Natt y Herrick, 1952) a través de la cámara de Neubauer. La determinación de los índices hematimétricos: volumen corpuscular medio (VCM), concentración de hemoglobina corpuscular media (CHCM) y hemoglobina corpuscular media (HCM) según el método de Wintrobe (1934). Para el recuento diferencial de leucocitos se realizaron frotis sanguíneos teñidos con reactivo Wright por 10 min (Hawkey y Dennett, 1989). Para los parámetros bioquímicos, se determinó la concentración de proteínas totales (método colorimétrico de Biuret: Proti2: Laboratorios Wiener®) a 540 nm y glucosa (método Trinder: Laboratorios FAR Diagnostics) a 510 nm. Las lecturas fueron realizadas en un espectofotómetro UV visible (Agilent Technologies, Cary 60. California, EEUU).

Análisis de Datos

Los datos se analizaron mediante estadística descriptiva, considerando promedio, desviación estándar, valor mínimo y máximo. Para determinar la correlación entre las variables se usó el coeficiente de Pearson (r), con el software estadístico «Sigma Plot 11».

RESULTADOS

Los resultados de la serie eritrocítica y bioquímica sérica con mayor variación fueron el HCM, VCM y glucosa (Cuadro 1). De la serie leucocitica, los linfocitos fueron las células más abundantes, seguidas por los monocitos, mientras que los neutrofilos, basófilos y eosinofilos fueron las células menos frecuentes (Cuadro 2).

Se encontró correlación positiva (p<0.05) lineal entre VCM-hematocrito, HCM-hematocrito, CHCM-hemoglobina y VCM-HCM, y lineal negativa entre HCM-eritrocitos, VCM-eritrocitos, mostrando un buen coeficiente de correlación (r>0.5) (Figura 1).

DISCUSIÓN

Al comparar los valores de los parámetros eritrocíticos con otras especies de reproductores de Brycon (Cuadro 3), se aprecia que los valores de eritrocitos y de VCM son similares para B. amazonicus. Sin embargo, los valores de hematocrito, hemoglobina, HCM y CHCM variaron ampliamente y superaron los promedios reportados para reproductores de B. insignis y B. amazonicus (Ranzani-Paiva, 1991; Arias et al., 2003). No obstante, al ser comparados con valores de alevinos y juveniles de B. amazonicus y B. orbignyanus mantenidos en cautiverio mostraron el mismo patrón de comportamiento (Arias et al., 2003; Tavares y Moraes, 2006; Tavares-Días et al., 1999, 2008), y coincide con valores reportados en otros teleósteos (Tavares-Días y Moraes, 2004). Tales variaciones de estos parámetros hematológicos pueden ser atribuidas a factores intra e interespecíficos como el sexo, edad, maduración gonadal, variación genética, hábitat, hábito alimenticio, clima y estrés causado durante la manipulación (Tandon y Joshi, 1976; Tavares-Días et al., 2003; Tavares-Días y Moraes, 2004).

Mayores valores de hematocrito se presentan en peces más activos y menores en peces de ambientes lénticos y sedentarios (Larsson et al., 1976). Sin embargo, otros factores externos también pueden interferir en el porcentaje de hematocrito; entre ellos, los anestésicos mal administrados (Coffigny y Perez, 2003), pudiendo actuar como un factor estresante adicional (Carneiro et al., 2002), ocasionando hemoconcentración en peces de agua dulce (McDonald y Milligan, 1997).Así mismo, cambios en el hematocrito pueden deberse a variaciones en el volumen de los eritrocitos (VCM) por factores ambientales y fisiológicos, como el equilibrio ácido-base de la sangre, ocurriendo en muchos peces amazónicos, en donde se evidenciaron cambios en el hematocrito sin comprometer los valores de glóbulos rojos presentes en la sangre (Nikinmaa, 1990; Val y Almeida-Val, 1995). Este mismo comportamiento se observó al comparar con reproductores de B. amazonicus donde se aprecia valores de eritrocitos similares, pero valores superiores de hematocrito y VCM (Arias et al., 2003).

La hemoglobina mostró valores altos, posiblemente debido al estrés ocasionado durante la manipulación y la administración del anestésico (Urbinati y Carneiro, 2001). Así mismo, los valores de HCM y CHCM se incrementaron al ser dependientes de la hemoglobina, mostrando mayor similitud a los valores obtenidos en reproductores de B. amazonicus (Arias et al., 2003). En este sentido, todos estos factores expresan la importancia de los estudios hematológicos, principalmente en la comprensión de la relación entre las características sanguíneas y la adaptación de los peces al ambiente (Tavares-Días y Moraes, 2004).

De los parámetros bioquímicos evaluados, solo la glucosa obtuvo valores dentro de los rangos reportados para reproductores y juveniles de B. amazonicus (Arias et al., 2003; Tavares-Días et al., 1999). Este parámetro bioquímico es un buen indicador de situaciones de estrés en peces (Sánchez et al., 2017). Por otro lado, la proteína plasmática evidenció resultados por debajo a lo reportado para reproductores (Arias et al., 2003). Al parecer, los valores de proteína pueden verse afectados por cambios en el volumen del plasma que puede ocurrir a causa del estrés u otros factores (Groff y Zinkl, 1999). Así mismo, existe referencia de correlación significativa positiva entre la proteína y el peso en hembras de Carassius auratus (Summerfelt et al., 1967); sin embargo, este comportamiento no se pudo determinar en el presente estudio dado que no se hizo la separación entre sexos. Los valores de los parámetros bioquímicos tienen una estrecha relación con el tipo de alimentación proporcionada a los peces durante el cultivo (Groff y Zinkl, 1999).

La concentración de leucocitos fue superior a lo reportado por Arias et al. (2003) y Tavares-Días et al. (1999), pero inferior al valor obtenido por Tavares-Días et al. (2008), en todos los casos en B. amazonicus. Los linfocitos son las células más abundantes y los valores encontrados coinciden con otros estudios de B. amazonicus (Arias et al., 2003; Tavares-Días et al., 1999, 2008), siendo estas células leucocitarias las que mayor porcentaje se presentan en diversas especies de teleósteos (Tavares-Días y Moraes, 2004; Gonzáles et al., 2016). Estas células cumplen un rol importante en el sistema inmune de los peces, actuando ante la presencia de virus, bacterias y otros agentes patogénicos que podrían comprometer la sobrevivencia del pez (Ruiz et al., 2003), y son sensibles a la presencia de contaminantes, cambios físicos y químicos del agua (Salazar-Lugo et al., 2012).

Los monocitos, al igual que los linfocitos, producen anticuerpos durante la respuesta inmune del pez (Tavares-Días et al., 2008) y en el presente estudio fueron la segunda célula de mayor abundancia, coincidiendo con lo reportado para Pterophyllum scalare (Iannacone et al., 2006). Sin embargo, los valores de los monocitos en otros reportes en B. amazonicus son bastante inferiores, donde la segunda célula sanguínea más abundante son los neutrófilos (Arias et al., 2003; Tavares-Días et al., 1999, 2008). Los eosinófilos estuvieron dentro del rango reportado para B. amazonicus y B. hilarii (Arias et al., 2003; Tavares-Días et al., 2003). Los eosinófilos se encuentren generalmente ausentes en peces (Tavares-Días y Moraes, 2004), donde altos porcentajes están relacionados a posibles infecciones parasitarias en Piaractus mesopotamicus y Colossoma macropomum (Ranzani-Paiva et al., 1999). No se reportó presencia de basófilos en Brycon, los cuales raramente se les encuentra en peces (Tavares-Días y De Moraes et al., 2004), pudiendo esta ausencia estar atribuida al uso de técnicas de coloración inadecuadas (López-Ruiz et al., 1992).

Las variaciones en la proporción de las células sanguíneas se pueden atribuir a la diversidad de técnicas de coloración para la identificación y cuantificación morfológica de los leucocitos; además de la dificultad en diferenciar monocitos de linfocitos, así como en la identificación de cada tipo de granulocito (Tavares-Días y De Moraes, 2004).

Las correlaciones positivas entre las variables hematológicas han sido reportadas en estudios de teleósteos (Bittencourt et al., 2003; Alesso et al., 2005; Macias y Rincon, 2010; Hahn-von-Hessberg et al., 2014). La hemoglobina, hematocrito, eritrocitos y los parámetros hematimétricos (VCM, HCM y CHCM) están íntimamente ligados, de allí que al modificarse alguno, los demás valores también pueden modificarse (Hahn-von-Hessberg et al., 2014). Las correlaciones negativas encontradas en el presente estudio concuerdan con estudios realizados en Brycon henni, Leporinus obtusidens y Oreochomis niloticus (Alesso et al., 2005; Bittencourt et al., 2003; Macías y Rincón, 2010).

CONCLUSIONES

Los valores hematológicos obtenidos en reproductores B. amazonicus en cautiverio muestran algunas variaciones con respecto a otras especies del género Brycon, pero se encuentran dentro del rango de otros teleósteos.

Agradecimientos

Los autores manifiestan su agradecimiento a la Blga. Miriam Alvan Aguilar y al Blgo. Pedro Ramírez Arrarte (IAAP) por el apoyo durante la obtención de los peces y muestras de sangre. Al Dr. Marcos Tavares Días, responsable del Laboratorio de Patología y Sanidad de Organismos Acuáticos del EMBRAPA (Brasil), por sus valiosos aportes, revisiones y sugerencias del documento.

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Recibido: 25 de julio de 2018

Aceptado para publicación: 2 de enero de 2019

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