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INTRODUCCIÓN
La crianza de cuyes es un sistema pro- ductivo de constante crecimiento económico en el Perú; sin embargo, la carencia de tecnificación sumado al escaso conocimiento de los factores epidemiológicos de las enfermedades que afectan a esta especie en crianzas semitecnificadas y de traspatio trae como consecuencia problemas en el manejo productivo y sanitario. El cuy es susceptible a diversas enfermedades infecciosas, dentro de las que se encuentran las de tipo bacteriano (Chauca, 1997; Sánchez-Macíaset al., 2018).
La linfadenitis cervical es una enferme- dad crónica de consideración en cuyes, que se caracteriza por la presentación de abscesos a nivel de ganglios o nódulos linfáticos, siendo los cervicales los comprometidos con mayor frecuencia, además de otros órganos (Percy y Barthold, 2007; Brabb et al., 2012; Shomer et al., 2015). Este proceso general- mente es causado por la bacteria Streptococcus equi subsp. zooepidemicus (S. zooepidemicus), un coco encapsulado gram- positivo que produce beta hemólisis en agar sangre (Percy y Barthold, 2007; Gruszynski et al., 2015). Se conoce además que las transmisiones bacterianas se dan por vía oral, piel, mucosas con pequeñas abrasiones, aerosol o genitales (Murphy et al., 1991; Fox et al., 2002; Percy y Barthold, 2007).
S. zooepidemicus es la bacteria más importante dentro de los principales agentes infecciosos en cuyes de crianza familiar-comercial, siendo hallada con una frecuencia de 19.6% en Ancash a partir de animales con sintomatología (Morales, 2017). Su implicancia en casos de linfadenitis en Cusco, Arequipa y Ayacucho ha sido reportada con frecuencias de 70 y 100% en cuyes muestreados con lesiones; sin embargo, otros agentes bacterianos también han sido registrados, como son Salmonella enterica serovar Thyphimurium, Salmonella enteritidis, Staphylococcus aureus, Micrococcus spp, Streptococcus spp y Corynebacterium spp (Concha, 2014; Flores, 2018; Mescco, 2019).
La evaluación de la susceptibilidad antimicrobiana contribuye a una completa descripción del patógeno, información de referencia para establecer tratamientos clínicos y aplicación de políticas epidemiológicas, con la finalidad de evitar o disminuir problemas de resistencia antibiótica de importancia en la terapéutica y salud pública (Cantón, 2010).
El departamento de Cusco, Perú, es considerado una región altamente productiva en cuyes, siendo Canchis una de sus trece provincias más importantes en este tipo de producción (INEI, 2012). Hasta el momento, no se cuentan con estudios en la provincia sobre la identificación y frecuencia de patógenos bacterianos relacionados a linfadenitis en cuyes y su perfil de susceptibilidad antimicrobiana, lo que podría repercutir en el abordaje sanitario en los diferentes sistemas de crianza. Es así que el objetivo del presente estudio fue determinar la frecuencia de patógenos bacterianos asociados a linfadenitis cervical y su perfil de susceptibilidad antimicrobiana en aislados de muestras clínicas de abscesos en cuyes provenientes de centros de crianza familiar-comercial de Canchis, Cusco.
MATERIALES Y MÉTODOS
Población de Estudio
Se consideraron en el estudio a cuyes de dos centros de crianza de crianza familiar-comercial de la provincia de Canchis, Cusco, con sospecha de abscesos a nivel cervical que fueron remitidos al Laboratorio de Bacteriología de la Estación IVITA- Maranganí de la Facultad de Medicina Veterinaria, Universidad Nacional Mayor de San Marcos, ubicada en Maranganí, Cusco. El estudio se realizó entre setiembre de 2018 y marzo de 2019. Los animales fueron sacrificados por los productores propietarios de los cuyes.
Diagnóstico Microbiológico
Aislamiento
En la necropsia se hizo una incisión aséptica a nivel cervical para evidenciar la presencia de abscesos, procediendo a la toma de muestra del material purulento con un hisopo estéril. Las muestras fueron remitidas al laboratorio dentro de las dos primeras horas después del sacrificio. Se realizó la siembra microbiológica por estrías en los agares McConkey y Sangre (Tripticasa de soya base con 5% de sangre desfibrinada de carnero). Las placas fueron puestas en anaerobiosis dentro de una jarra de Brewer hermética uti- lizando el sistema Anaerocult® C, para ser incubadas por 24-48 horas a 37 ºC. Las colonias resultantes fueron identificadas por técnicas microbiológicas convencionales según su morfología macroscópica, tipo de hemólisis, tinción de Gram, actividad catalasa y pruebas bioquímicas para el caso de gram negativas (Vadillo et al., 2002).
Susceptibilidad antibiótica in vitro
La prueba de susceptibilidad antibiótica in vitro fue realizada según lo descrito en el Manual de Procedimientos para la Prueba de Sensibilidad Antimicrobiana por el Método de Disco Difusión (Instituto Nacional de Salud, 2002). De un cultivo puro de cada aislado microbiano se tomaron varias colonias que fueron seguidamente suspendidas en agua destilada estéril a una concentración equivalente a 0.5 de la escala de McFarland. Luego se sembró en tres direcciones con un hisopo estéril sobre una placa con agar Mueller- Hinton. Se dejó reposar unos minutos a temperatura ambiente y se colocaron un máximo de cinco discos de antibióticos separados sobre la superficie del agar. Las placas fueron incubadas a 37 ºC por 24 horas.
Los discos comerciales de antibióticos correspondieron a antimicrobianos utilizados en el manejo sanitario de cuyes: enrofloxacina (5 µg), ciprofloxacina (5 µg), gentamicina (10µg), trimetoprima-sulfametoxazol (1.25/23.75µg), oxitetraciclina (30 µg) y fosfomicina (20µg) (Donnelly, 2020). Los halos de inhibición fueron medidos con una regla y expresados en milímetros (mm). Se determinó como resistente, susceptible o intermedio según indicaciones del fabricante (Oxoid, Inglaterra).
Figura 1 Distribución de cuyes con abscesos positivos a agentes bacterianos según la etapa productiva (n=61)
RESULTADOS
De las 64 muestras de abscesos evaluadas a nivel cervical, en el 95.3% (61/64) se aisló al menos un agente bacteriano, don- de en el 91.9% (56/61) se determinó a Streptococcus sp beta-hemolítico, en 45.9% (28/61) a Staphylococcus sp y en 21.31% (13/61) a Klebsiella sp. Asimismo, se obtuvo un total de 97 cepas aisladas, de las cuales 57.7% correspondió a Streptococcus sp beta-hemolítico, 28.9% a Staphylococcus sp y 13.4% a Klebsiella sp.
La frecuencia de aislamientos con dos agentes bacterianos dentro de una misma muestra de linfadenitis cervical resultó en Streptococcus sp beta-hemolítico y Staphylococcus sp con 52.4% (32/61), se- guido de Streptococcus sp beta hemolítico y Klebsiella sp con 34.4% (21/61), y Staphylococcus sp y Klebsiella sp con 13.1% (8/61).
La distribución de animales con abscesos y tipos de agentes bacterianos según la etapa productiva se presenta en la Figura 1. Por otro lado, la frecuencia de linfadenitis cervical en machos fue de 85.2% (52/61).
Se observó para Streptococcus sp beta-hemolítico una mayor frecuencia de sensibilidad intermedia para enrofloxacina y trimetoprim-sulfametoxazol (55.4 y 57.1%, respectivamente) en comparación a otros antibióticos, en tanto se observó una alta sensibilidad (>90%) para gentamicina, ciprofloxacina, oxitetraciclina y fosfomicina (Cuadro 1).
Para Staphylococcus sp y Klebsiella sp se presentó una frecuencia de sensibilidad mayor al 65% para enrofloxacina, trimetoprim-sulfametoxazol, gentamicina, ciprofloxacina, oxitetraciclina y fosfomicina (Cuadro 2 y 3).
DISCUSIÓN
Streptococcus sp (beta-hemolítico) fue el agente con mayor frecuencia de aislamiento en los casos de linfadenitis cervical, seguido de Staphylococcus sp, similar a reportes en Ayacucho, Arequipa y Cusco (Concha, 2014; Flores, 2018; Mescco, 2019). Asimismo, se aisló Klebsiella sp, del cual no existen reportes previos en cuyes con linfadenitis.
Algunos de los agentes secundarios podrían ser oportunistas o parte de la microbiota en tejidos, que, producto de alguna abrasión o infección primaria facilita su multiplicación y diseminación (Skive et al., 2017). Otro de los factores a considerar es la escasa capacidad de desinfección y protocolos de bioseguridad empleados para los sistemas de crianza en pozas de cuyes (Morales, 2017), sumado a la exposición de heces por la alta densidad de animales que facilitaría la contaminación, infección y diseminación de agentes patógenos.
Staphylococcus spp pueden producir, además, neumonía y mastitis purulenta, así como conjuntivitis (Percy y Barthold, 2007; Brabb et al., 2012), siendo, por ejemplo, la especie S. aureus, un habitante común de la piel y cavidad orofaríngea de cuyes clínicamente sanos. Por otro lado, K. pneu- moniae es una bacteria entérica que también puede residir en la cavidad oral, pudiendo causar bronconeumonía necrotizante aguda, mastitis, necrosis en hígado y septicemias en cuyes (Brabb et al., 2012; Shomer et al., 2015).
Algunos autores mencionan que generalmente los casos de abscesos a nivel cervical se encuentran asociados a Strepto- bacillus moniliformis y a S .zooepidemicus (Percy y Barthold, 2007; Brabb et al., 2012), presentándose este último como microbiota comensal en la conjuntiva y cavidad nasal de cuyes (O’Rourke, 2004). A pesar de que en el presente estudio no se determinó a nivel de especie los aislados de Streptococcus sp, la casuística y características sugieren que se podría tratar de S. zooepidemicus, el cual es el agente primario reconocido ampliamente por causar linfadenitis en cuyes (Murphy et al., 1991; Fox et al., 2002; Percy y Barthold, 2007).
Cuadro 2 Perfil del antibiograma de aislados de Staphylococcus sp de abscesos cervicales en cuyes (n=28)
Cuadro 3 Perfil del antibiograma de aislados de Klebsiella sp de abscesos cervicales en cuyes (n=13)
Dentro del mecanismo de infección de zooepidemicus, se sabe que la mucosa oral intacta podría ser la vía de entrada di- recta, favorecida por la abrasión o lesión producto de mordeduras en piel o mediante aerosoles (Murphy et al., 1991; Percy y Barthold, 2007). Recientemente se ha sugerido que dicho agente tendría una fase intracelular, lo cual podría favorecer la sobrevivencia en el hospedero y explicaría en parte las infecciones recurrentes o persistentes (Skive et al., 2017). A pesar de que los ganglios linfáticos cervicales son un lugar común de infección bacteriana y, por tanto, de formación de abscesos, otros ganglios u órganos puedes verse comprometidos (Harkness y Wagner, 1995). S. zooepidemicus se ha asociado además con otras patologías como otitis, neumonía hemorrágica, peritonitis, nefritis crónica, metritis, abortos y dermatitis (Fraunfelter et al., 1971; Percy y Barthold, 2007; Brabb et al., 2012; Shomer et al., 2015). Asimismo, se conoce su potencial zoonótico, generalmente asociado al con- sumo de leche no pasteurizada o por contacto directo con cuyes criados como mascotas (Gruszynski et al., 2015; Shomer et al., 2015), por lo que se debería considerar la bioseguridad necesaria durante la manipulación de animales que presentan secreciones purulentas o abscesos.
La mayor frecuencia de aislamientos bacterianos en animales adultos podría estar acompañada de factores de estrés producto de peleas, dieta a base de forraje fibroso o mal picado y manejo sanitario, entre otros (Morales, 2017; Huamán et al., 2019). No obstante, en Arequipa, se reportó una mayor proporción de animales jóvenes clínicamente enfermos con linfadenitis en comparación con adultos (Concha, 2014), en tanto que en Ayacucho no se encontró diferencias por efecto de la edad (Flores, 2018). De otra par- te, si bien puede existir una mayor frecuencia de abscesos en machos que en hembras, otros autores reportan más casos en hembras (Concha, 2014; Mescco, 2019).
Referente a las pruebas de antibiograma, las bacterias aisladas resultaron susceptibles para la mayoría de los antibióticos evaluados, incluyendo la gentamicina que ha sido reportada susceptible en estudios similares (Mescco, 2019). Asimismo, se obtuvo una alta frecuencia de susceptibilidad intermedia (>50%) para enrofloxacina y trimetoprim- sulfametoxazol en aislados de Streptococcus sp, los cuales coincidentemente fueron los únicos antibióticos frente a este género que presentaron frecuencias bajas de resistencia. Esto debe tomarse en consideración para la vigilancia periódica, ya que la resistencia antimicrobiana podría aumentar si no se rea- liza un uso controlado y responsable de antibióticos en el tiempo.
CONCLUSIONES
La mayor frecuencia de linfadenitis cervical en los animales afectados fue re- gistrada en machos en la etapa adulta.
Streptococcus sp beta-hemolítico fue el agente infeccioso más aislado, seguido de Staphylococcus sp y Klebsiella sp en lesiones de linfadenitis cervical en cuyes.
Los aislados bacterianos mostraron alta susceptibilidad antimicrobiana in vitro para la mayoría de los antibióticos utilizados rutinariamente en sistemas de crianza de cuyes.
Streptococcus sp beta-hemolítico mostró bajos niveles de resistencia antimi- crobiana y más del 50% de susceptibilidad intermedia para enrofloxacina y trimetoprim-sulfametoxazol.
