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INTRODUCCIÓN
Las pérdidas de la gestación por mortalidad embrionaria es uno de los factores de mayor impacto económico en los sistemas de producción de bovinos de leche y de carne (Santos et al., 2004). Esta problemática varía entre rebaños. Pudiendo ser tan baja como 3.2% (Silke et al., 2002) y llegar hasta 42.7% (Cartmill et al., 2001). Un trabajo de metaanálisis determinó que entre 50 y 44% de la mortalidad embrionaria presentada en bovinos se encuentra en razas Bos indicus y la diferencia en razas Bos taurus (Reese et al., 2020).
Durante la gestación temprana, el embrión y el medio ambiente uterino establecen una interacción a través del mecanismo de reconocimiento materno de la gestación mediado por la síntesis del interferón-tau (IFN), proteína trofoblástica que tiene como función inhibir la luteolisis que es inducida por la secreción pulsátil de la PGF2a (Demmers et al., 2001). No obstante, si se presenta una baja secreción de progesterona, las células trofoblásticas no tendrán la capacidad de producir eficientemente el IFN-T conllevando de esta manera, a la síntesis de la PGF2α (Mann y Lamming, 2001). Varias estrategias antiluteoliticas han sido desarrolladas a fin de preservar el desarrollo embrionario temprano, siendo una de estas estrategias relacionada con la disminución de la respuesta luteolítica para proteger la sobrevivencia del embrión (Binelli et al., 2001).
Basado en esta hipótesis, algunos estudios han utilizado los antiinflamatorios no esteroideos como potentes inhibidores de la actividad de la enzima ciclooxigenasa 2 (COX-2), enzima que tiene la función de catalizar y de transformar a los precursores primarios de las prostaglandinas (PGHS-1 y PGHS-2) en PGF2α (Radi y Khan, 2006). La síntesis de la PGF2α es regulada por un complejo intracelular endometrial y tiene la función de desencadenar la regresión del cuerpo lúteo (CL) e inicio de un nuevo ciclo estral (Odensvik et al., 1989). La administración de antiinflamatorios previo a la transferencia de los embriones permite proteger la funcionalidad del CL, además de proporcionar mejor viabilidad embrionaria, lo que conlleva al bloqueo de la liberación precoz de la PGF2a después de la transferencia embrionaria (Guzeloglu et al., 2007). Por esta razón, el objetivo del presente estudio fue evaluar el efecto del ibuprofeno en el establecimiento de la gestación de embriones bovinos producidos in vitro.
MATERIALES Y MÉTODOS
En la ejecución del estudio se dio cumplimiento a los aspectos mencionados el Art. 87 del Estatuto Nacional de Protección de los Animales (Resolución 008430 de 4 de octubre de 1993) (Garcés y Giraldo, 2012).
Animales
Fueron utilizadas 85 novillas (Bos taurus x B. indicus) como receptoras de embriones, con edad y peso promedio de 24 meses y 350 kg, respectivamente. Condición corporal de 4.0 (escala de 0-5 puntos) y tracto reproductivo normal a nivel estructural y funcional. El estudio fue desarrollado bajo condiciones tropicales, con pasturas a base de Brachiaria decumbens Stapf y Brachiaria brizantha (Hochst. ex A. Rich.) Stapf (Poaceae), con suplementación mineral, agua ad libitum y sin suplementación balanceada.
Manejo Experimental
Se aplicó a las novillas un implante intravaginal de progesterona (P4) de 1 g (Sincrogest®, Ouro Fino, Brasil) por 8 días, más la aplicación de 2 mg de benzoato de estradiol (Sincrodiol®, Ouro Fino, Brasil). A la remoción del dispositivo de P4 se aplicaron 500 µg de cloprostenol sódico (Sincrocio®, Ouro Fino, Brasil), 300 UI de gonadotrofina coriónica equina (Sincro eCG®, Ouro Fino, Brasil), más la administración de 1 mg de cipionato de estradiol (SincroCP® Ouro Fino, Brasil).
Nueve días después de la remoción del dispositivo de P4, se realizó la transferencia de embriones en tiempo fijo. Para esto, se hizo una ecografía transrectal (Mindray, DP 2200 VET, China) en las novillas para verificar la respuesta al protocolo hormonal con la presencia de CL. Fueron consideradas como receptoras de embriones aquellas con CL >15 mm de diámetro. Los embriones utilizados fueron a fresco y de origen in vitro en fase blastocisto y blastocisto expandido. Para la transferencia de los embriones, se aplicó anestesia epidural baja a las receptoras (Roxicaina® 2%, Ropsohn, Colombia), además de una limpieza del recto e higienización de los genitales externos con agua y alcohol al 70%. Los embriones fueron transferidos en el cuerno uterino ipsilateral al ovario con cuerpo lúteo. El diagnóstico de la gestación se hizo 60 días después de la transferencia de embriones, mediante ecografía transrectal utilizando un transductor linear de 5.0/7.5 MHz.
Grupos Experimentales
Las receptoras fueron localizadas en dos tratamientos: grupo control (no tratado) y grupo tratado con ibuprofeno, con aplicación IM del antiinflamatorio no esteroideo ibuprofeno a dosis terapéutica de 5 mg/kg, una hora antes de la transferencia de los embriones. Este tiempo fue considerado como adecuado para la absorción y la estabilización de los niveles sanguíneos requeridos.
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Las tasas de gestación para el grupo control y para el grupo ibuprofeno fueron de 47.5% (19/40) y 35.5% (16/45), respectivamente (Figura 1), sin diferencias significativas entre grupos.
En bovinos, la mortalidad embrionaria es considerada una de las mayores problemáticas que enfrenta la industria ganadera. El mecanismo inicial de la gestación que se inicia con la fertilización alcanza aproximadamente el 90% en razas B. taurus de carne (Reese et al., 2020) con niveles entre 55.3 y 87.8% en vacas lactantes y entre 59 y 98% en vacas no lactantes (Santos et al., 2004), habiendo una diversidad de factores relacionados con fallas en la gestación en los primeros siete días de la concepción (Reese et al., 2020).
Figura 1 Efecto de la administración de ibuprofeno en el porcentaje de novillas (Bos taurus x Bos indicus) gestantes por la transferencia de embriones producidos in vitro
El ibuprofeno, como potente antiinflamatorio no esteroideo, tiene como función inhibir la síntesis de las prostaglandinas (Breuhaus et al., 1999), además de ser considerado un promotor angiogénico (Menzel et al., 1999) y un modificador de la síntesis de las citocinas y otras moléculas importantes para la función endometrial (Elli et al., 2001).
En estudios que utilizaron el ibuprofeno como promotor de la eficiencia reproductiva se observó que su administración una hora antes a la transferencia de los embriones tuvo un impacto altamente positivo en las tasas de gestación de embriones in vivo y criopreservados, respecto al grupo no tratado (82 vs 56%, respectivamente, p<0.05) (Elli et al., 2001). No obstante, estos resultados difieren de los hallados en el presente estudio donde no hubo diferencias significativas entre grupos; sin embargo, el presente grupo de autores (Narváez et al., 2010) reportaron una diferencia de 27.3% con el uso de ibuprofeno en las tasas de gestación de novillas de la raza Nelore transferidas con embriones congelados de origen in vivo.
Es importante resaltar que la transferencia de embriones de origen in vitro son generalmente de grado 1 (excelentes) y pueden llegar a ser estructuras no dependientes de los antiinflamatorios para llevar a cabo un adecuado mecanismo de la implantación y del mantenimiento de la gestación. Por otro lado, a veces se utiliza embriones grado 2 de calidad, siendo estos embriones considerados con menor potencial de desarrollo, lo que puede llegar a justificar el uso de los antiinflamatorios con la finalidad de evitar los efectos deletéreos de la PGF2a si es liberada anticipadamente. Según, Scenna et al. (2005) la PGF2a, al entrar en contacto con el embrión, retarda o bloquea el desarrollo embrionario, disminuyendo la habilidad de transición de estructura pre-compacta a compacta (16 para 32 células), afectando de forma significativa las tasas de implantación y de gestación.
Erdem y Guzeloglu (2010) identificaron que la administración de meloxicam por vía subcutánea 15 días después de la inseminación artificial, inhibe la actividad del precursor de las prostaglandinas (PGHS-2), afectando de manera significativa el mecanismo de pre-implantación y subsecuentemente las tasas de gestación. Un estudio similar reportó que la aplicación de flunixin meglumine y carprofeno después de la inseminación artificial no incrementa las tasas de preñez en bovinos (von Krueger y Heuwieser, 2010). Recientemente, Kasimanickam et al. (2018) evaluaron el efecto del flunixin meglumine en receptoras de embriones de temperamento fuerte, indicando que estas hembras presentan altos niveles circulantes de isoprostano 8-epi PGF y de la sustancia P, sustancias que tienen la capacidad de incrementar la producción de especies reactivas de oxígeno, siendo estas a su vez consideradas desfavorables para el medio ambiente uterino y con impacto negativo sobre las tasas de gestación.
