INTRODUCCIÓN
La identificación de patologías que afectan la productividad en animales de producción, en la mayoría de los casos, se realiza mediante la historia y la observación de signos clínicos, lo cual en algunas ocasiones genera diagnósticos errados. Los exámenes de laboratorio, entre ellos los hematológicos, contribuyen a un mejor diagnóstico de enfermedades infecciosas y parasitarias, constituyendo un «primer paso» diagnóstico, tanto en medicina humana como animal (Medway et al., 1986; Williams et al., 2016).
Los estudios de componentes sanguíneos, además de mostrar el estado de salud del paciente, pueden usarse como herramientas de monitoreo de los cambios fisiológicos que ocurren en los animales (Bezerra et al., 2008). Factores fisiológicos como la gestación, lactancia, edad y sexo han sido mencionados en distintas especies animales como causantes de variaciones en los valores hematológicos normales (Novozhilov et al., 2012; Guzmán y Callacná, 2013; He et al., 2017; Herrera et al., 2017; Argente et al., 2019). La evaluación de los parámetros hematológicos permite conocer la capacidad de las especies y grupos raciales para adaptarse a diferentes entornos (Delfino et al., 2012; Ayvar, 2018).
La producción de cuyes no es ajena a la presentación de patologías que afectan la productividad, generando pérdidas económicas en los productores. Para poder realizar un diagnóstico rápido y seguro, es necesario contar con información referencial de los valores hematológicos. En este sentido, Genzer et al. (2019) indican que la edad y el sexo del animal afectan los valores de glóbulos rojos, hemoglobina y hematocrito; Tapia (2019) y Vidalón (2014) sugieren considerar la altitud y situación geográfica para obtener valores de referencia reales para cada zona, en tanto que Ayvar (2018) indica que la suplementación de probióticos en la dieta incide en los parámetros hematológicos y bioquímicos nutricionales, siendo todos estos trabajos realizados en cuyes.
Los cuyes nativos presentan índices pro- ductivos y reproductivos inferiores con relación a las razas mejoradas (Mendoza, 2012), pero por otro lado, tienen ciertas ventajas (resistencia a enfermedades, rusticidad, versatilidad para el consumo de diversos tipos de alimentos), debido al proceso de adaptación a los diferentes pisos ecológicos (INIA, 2009).
Existe poca información sobre los parámetros hematológicos de cuyes de acuerdo con la edad y estado fisiológico en condiciones de altura, pues la mayoría de las publicaciones están relacionadas con otros pisos altitudinales. En tal sentido, el objetivo del presente estudio fue determinar los valores hematológicos en condiciones de altura de cuyes nativos (Cavia porcellus) por edad, sexo y estado fisiológico.
MATERIALES Y MÉTODOS
Lugar de Estudio y Animales
El estudio se realizó en la provincia de Huamanga, departamento de Ayacucho, Perú, zona que se encuentra a una altitud de 2735 msnm. Se emplearon cuyes nativos del banco de germoplasma de la Estación Experimental Agraria Canaán, Ayacucho. Los cuyes se encontraban sometidos a un sistema de crianza intensiva, alojados en pozas de 1.50 m de largo x 1 m de ancho y 0.50 m de alto. La alimentación fue a base de alfalfa suministrada ad libitum y el agua era ofrecida en pocillos de arcilla.
Los cuyes se encontraban en aparente buen estado de salud. Se seleccionaron 20 cuyes de recría de tres meses de edad aproximadamente (10 machos - 10 hembras), 20 cuyes destetados de aproximadamente 1 mes de edad (10 machos - 10 hembras) y nueve cuyes preñadas
Muestras de Sangre
La obtención de las muestras se realizó a primeras horas del día, previo a la alimentación de los animales. Las muestras fueron obtenidas mediante punción de la vena cefálica en tubos vacutainer con anticoagulante EDTA y agujas N°. 21. Se extrajo 1 ml de sangre por cuy. Las muestras fueron llevadas al laboratorio en un cooler con gel refrigerante.
En el laboratorio se procedió a realizar los siguientes análisis:
Hematocrito: Se realizó el llenado de tubos capilares con heparina, los que fueron centrifugados a 10 000 g durante 10 minutos. La lectura se hizo con ayuda de la tabla de microhematocrito, cuya escala varía de 0 a 100.
Hemoglobina: Se dividió el valor del hematocrito por el factor 3 (Forrellat et al., 2010) para obtener la concentración de hemoglobina.
Recuento total de glóbulos rojos: Se realizó una dilución de 1:200 con el reactivo Hayem en tubos de ensayo (1990 µl del reactivo y 10 µl de sangre), se homogenizó la muestra y se incubó durante 5 minutos. La muestra obtenida fue colocada en la cámara de Neubauer para realizar la lectura de los cuadrantes de la cámara bajo el microscopio. El resultado obtenido fue multiplicado por 10 000 (Washington y Hoosier, 2012).
Recuento total de glóbulos blancos: Se realizó una dilución de 1:20 con el reactivo de Turk en tubos de ensayo (380 µl del reactivo y 20 µl de sangre), se homogenizó la muestra y se incubó durante 5 minutos. La muestra obtenida fue colocada en la cámara de Neubauer para su lectura. El resultado obtenido fue multiplicado por 50.
Recuento diferencial de glóbulos blancos: Se realizó el frotis sanguíneo en una lámina portaobjeto. El frotis se dejó secar a temperatura ambiente. Se realizó la tinción con Wright, dejándolo en reposo durante 5 minutos. Se realizó el conteo de 100 células y el resultado fue expresado en porcentaje.
Índices eritrocitarios: Los índices eritrocitarios volumen corpuscular medio (VCM), hemoglobina corpuscular media (HCM) y concentración de hemoglobina corpuscular medio (CHCM) fueron calculados utilizando las fórmulas descritas por Washington y Hoosier (2012).
Análisis Estadístico
Se utilizaron los promedios como medidas de tendencias central y las desviaciones estándar como medidas de dispersión para el análisis de los datos encontrados. Para evaluar las diferencias en los valores hematológicos por sexo y grupo etario se realizó el análisis de varianza y la comparación de medias mediante la prueba Tukey (p<0.05).
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Los parámetros hematológicos de cuyes nativos de la etapa de recría (machos y hembras) se presentan en el Cuadro 1. Ayvar (2018) reportó un recuento de glóbulos rojos de 5.75±0.31 x 106/µl y un hematocrito de 46.67±3.0% en cuyes machos, resultados similares a los del presente estudio. Asimismo, Williams et al. (2016) reportaron valores de 48.7±0.33 de hematocrito y recuento de glóbulos rojos de 5.69±0.039 x 106/µl, resultados cercanos a los del presente estudio.
DS: Desviación estándar; VCM: Volumen corpuscular medio; HCM: Hemoglobina corpuscular media;
CHCM: Concentración de hemoglobina corpuscular medio
a,b Superíndices diferentes indican que diferencias estadísticas (prueba de Tukey, P<0.05)
Vidalón (2014) obtuvo valores del recuento de glóbulos rojos en cuyes machos (2.5 meses) de 6.08±0.32 x 106/µl para la línea cárnica y de 6.09±0.38 x 106/µl para la línea precoz, y un hematocrito de 56.7±2.64%) para la línea cárnica y de 53.5±2.98% para la línea precoz, valores superiores a los de este estudio, posiblemente debido a que dicho trabajo se realizó a una altitud de 3350 msnm, lo que generó un aumento considerable de producción de eritrocitos para captar mayor cantidad de oxígeno. En este sentido, Tapia (2019) y Matute (2019) indican que una mayor altitud produce una eritrocitosis absoluta secundaria ante una mayor demanda de oxígeno.
En la etapa de recría se observó un mayor recuento de glóbulos rojos, y valores de hematocrito y hemoglobina en machos en comparación a las hembras (p<0.05; Cuadro 1), más no así en los cuyes destetados (Cuadro 2). Según Genzer et al. (2019), los cuyes machos alcanzaron mayores valores de glóbulos rojos, hematocrito, hemoglobina, recuento de glóbulos blancos y monocitos. Asimismo, Kitagaki et al. (2005) reportaron un mayor recuento de glóbulos rojos y blancos en machos que en hembras.
DS: Desviación estándar; VCM: Volumen corpuscular medio; HCM: Hemoglobina corpuscular media;
CHCM: Concentración de hemoglobina corpuscular medio
a,b Superíndices diferentes indican que diferencias estadísticas (prueba de Tukey, P<0.05)
Ayvar (2018) reportó 10.65 ±4.71 x103/µl de glóbulos blancos, mientras que Vidalón (2014) obtuvo un recuento de 9.6±2.53 x103/µl, valores que fueron superiores a los encontrados en el presente estudio. Personett et al. (2019) también reportaron recuentos totales de glóbulos blancos superiores (12.79±0.74 x103/µl), posiblemente debido al uso de 5% de isoflurano para inmovilizar a los animales y obtener la muestra. Hoyos et al. (2001), al evaluar diversas concentraciones de isoflurano, evidenció incremento en el recuento de glóbulos blancos, además otros cambios en la serie roja. De otra parte, Williams et al. (2016) reportaron valores de 5.89 ± 0.17 x103/µl glóbulos blancos, los cuales son similares a los del presente estudio.
Se obtuvo un valor de 14.15±0.53 g/dl de hemoglobina en cuyes machos de recría. En este sentido, Ayvar (2018) reportó 15.59±0.88 g/dl de hemoglobina, Vidalón (2014) obtuvo 16.4±0.81 y 15.8±0.81 g/dl para cuyes de la líneas cárnica y precoz, respectivamente., en todos los casos resultados superiores a los del presente estudio, posiblemente debido a que los cuyes en dichos estudios se encontraban en mejor plano de alimentación (Medway et al., 1986). Asimismo, Personett et al. (2019) reportan 15.46±0.55 g/dl de hemoglobina en cuyes machos y hembras de bioterio.
En cuanto al sexo, los machos mostraron mayores niveles de hematocrito, hemoglobina y volumen corpuscular medio (VCM), resultado similar al estudio de Spittler et al. (2021), quienes estudiaron las diferencias asociadas con la edad y el sexo en los parámetros hematológicos de cuyes Dunkin Hartley; sin embargo, esta diferencia solo se observó en la etapa de recría.
Se observaron diferencias relacionadas con la edad (Cuadros 3 y 4) donde el recuento de glóbulos rojos, hematocrito y hemoglobina se incrementan acorde al desarrollo del animal. Estos resultados están de acuerdo con los obtenidos por otros autores; así, Zimmerman et al. (2019) reporta recuento de glóbulos rojos de 4.36-6.84 x 106/µl en machos adultos, 3.35-6.15 x 106/µl en hembras adultas y 4.06-6.02 x 106/µl en cuyes de 2-90 días y de hematocrito de 37-47, 40.9-49.9 y 33.8-48.8% para adultos machos y hembras y menores de 90 días, respectivamente. Genzer et al. (2019) indican, asimismo, que el recuento de glóbulos rojos, hemoglobina, hematocrito y el volumen medio de plaquetas aumenta con la edad. Asimismo, Spittler et al. (2021) señala que en comparación con animales jóvenes, los adultos tenían valores de mayores de hematocrito, recuento de glóbulos rojos y concentración de hemoglobina.
DS: Desviación estándar; VCM: Volumen corpuscular medio; HCM: Hemoglobina corpuscular media;
CHCM: Concentración de hemoglobina corpuscular medio
a,b Superíndices diferentes indican que diferencias estadísticas (prueba de Tukey, P<0.05)
DS: Desviación estándar; VCM: Volumen corpuscular medio; HCM: Hemoglobina corpuscular media;
CHCM: Concentración de hemoglobina corpuscular medio
a,b Superíndices diferentes indican que diferencias estadísticas (prueba de Tukey, P<0.05)
Los resultados en hembras, según edad y estado reproductivo, muestran que los valores de glóbulos rojos, hematocrito, hemoglobina fueron similares a aquellos de cuyes en etapa de recría y mayores a los observados en cuyes en etapa de destete (p<0.05; Cuadro 4). Couto (2010) reporta que el estado fisiológico altera los niveles de leucocitos, encontrando leucocitosis en animales preñados. Verastegui (2015), de otra parte, reportó un recuento de glóbulos rojos de 5.3 x 106/µl y de glóbulos blancos de 9.9 x 103/µl, así como valores de hematocrito de 40.6%y de hemoglobina de 13.6 g/dl en cuyes hembras gestantes.
En el recuento diferencial de glóbulos blancos, se encontró que las células con mayor proporción fueron los linfocitos (Cuadros 1-4), seguido de los neutrófilos, tal y como ha sido reportado por Zimmerman et al. (2015). Kitagaki et al. (2005) reportan 55.3±10.1% de linfocitos, 35.5±10.0% de neutrófilos, 2.8±2.2% de monocitos, 5.4±2.6% de eosinófilos y 0.6±0.8% de basófilos en cuyes machos; Vidalón (2014) obtuvo un recuento de linfocitos de 54.8±16.9% para la Línea Precoz y de 59.7±11.2% para la Línea Cárnica; Genzer et al. (2019) reporta en cuyes hembras 49± 11, 45.5±10.5, 3.5±1.2, 2.2±1.1 y 0.2±0.2% de linfocitos, neutrófilos, monocitos, eosinófilos y basófilos respectiva- mente y en machos de 50±9, 43±9, 4.5±1.7, 1.0±0.6 y 0.2±0.2% de linfocitos, neutrófilos, monocitos, eosinófilos y basófilos, respectivamente. Asimismo, Zimmerman et al. (2019) reporta valores de referencia en cuyes de 2-90 días de linfocitos (52.6-83.2), neutrófilos (14.8-42.6%), monocitos (0-3.7%), eosinófilos (0.1-3.6%) y basófilos (0-0.58%).
Finalmente, Takisawa et al. (2004), quienes establecieron valores medios de recuentos sanguíneos en cuyes, remarcan que en general, el recuento de glóbulos blancos y el porcentaje de linfocitos son más bajos que en otros roedores, pero que el porcentaje de granulocitos es más alto.