Introducción

El camarón Cryphiops (Cryphiops) caementarius habita los ríos desde la costa norte de Perú hasta la costa central de Chile (^{Moscoso 2012}). La extracción comercial se realiza principalmente en los ríos de Arequipa (^{Wasiw & Yépez 2015}) alcanzando 1122 t en el 2019 (PRODUCE 2020). Esta especie es de consumo directo y por ello existe interés por su cultivo comercial.

En un cultivo comercial de camarones el alimento constituye hasta el 60% del costo operativo en la producción (^{Sarman et al. 2018}); por ello, la evaluación de la digestibilidad de los nutrientes es el primer paso para determinar la eficacia de los ingrediente utilizados en la formulación de dietas (^{Ayisi et al. 2017}). Los estudios nutricionales realizados en C. (C.) caementarius están referidos al empleo de levadura (^{Cabrera et al. 2019}), lecitina (^{Acosta et al. 2018}), ensilado de molusco (^{Terrones & Reyes 2018}), sal común (^{Ramírez et al. 2018}), zeolita (^{Senmache & Reyes 2020}) y ensilado de maíz (^{Gallardo-Carril & Reyes-Avalos 2020}), todas ellos como ingredientes empleados en dietas para el crecimiento de ejemplares adultos.

Los carbohidratos en la dieta de crustáceos marinos y de agua dulce tienen un efecto ahorrador de proteína, es uno de los principales componentes energéticos y de menor costo que las proteínas y lípidos; sin embargo, la ingesta excesiva ocasiona crecimiento lento, baja la inmunidad y eleva la mortalidad (^{Ayisi et al. 2017}, ^{Wang et al. 2016}, ^{Kong et al. 2019}). Los ingredientes con alto contenido de almidón (87%) tienden a ser mejor digeridos por Litopenaeus vannamei que los que contienen altas cantidades de fibra (^{Yang et al. 2009}) y la digestibilidad aparente de la proteína es influenciada por el almidón y celulosa en la dieta; aunque, el aumento de los niveles de celulosa en la dieta provoca bajo requerimiento de proteína, sin afectar las funciones vitales ni el crecimiento (^{Velurtas et al. 2011}).

El maíz contiene 76% de carbohidratos y 7% de proteína (^{Gwirtz y Garcia-Casal 2014}). El uso de ensilado de maíz como insumo en la dieta de postlarvas de Macrobrachium rosenbergii mejora el crecimiento en peso y mantiene alta supervivencia debida, tanto al aumento de proteína, como a la alta digestibilidad y palatabilidad de las dietas, lo cual proporciona al organismo suficiente energía y nutrientes (^{Coelho-Emerenciano & Massamitu-Furuya 2006}). El ensilado mejora el proceso digestivo, la asimilación y el crecimiento como lo observado en postlarvas de M. inca (^{Dávila et al. 2013}), Cherax cainii (^{Foysal et al. 2020}), entre otros. Además, las bacterias acido lácticas que contienen los ensilados fermentan la melaza (^{Vidra et al. 2017}) y producen sustancias antimicrobianas que reducen la presencia de bacterias patógenas (^{Vieco-Saiz et al. 2019}) con lo que mejora la salud de los animales.

El ensilado biológico de maíz en la dieta de camarones adultos de C. (C.) caementarius constituye una fuente de energía que ahorra proteína y maximiza el crecimiento (^{Gallardo-Carril & Reyes-Avalos 2020}). Sin embargo, no se conoce si estos son debido a la digestibilidad del ensilado de maíz o a factores nutricionales de otros insumos. Se ha observado que los juveniles C. (C.) caementarius poseen alta digestibilidad aparente de la proteína usando ensilado de residuos de moluscos, y menor digestibilidad con los residuos de aves (^{Rubio 2010}), mas no se conoce la digestibilidad de carbohidratos.

Cryphiops (C.) caementarius es omnívoro y utiliza diversos alimentos, como los restos de vegetales y de animales (^{Bahamonde & Vila 1971}), y que varían según el hábitat. Los camarones de los ríos Pativilca y Majes-Camaná, se alimentan de detritus, microalgas y restos vegetales; además, también de larvas de insectos, restos de invertebrados (insectos adultos, moluscos y camarón), semillas y esporas, entre otros (^{Viacava et al. 1978}). Sin embargo, tanto postlarvas como adultos de C. (C.) caementarius aceptan alimento balanceado constituido por insumos de origen animal como harina de pescado, así como de origen vegetal como harinas de soya, de trigo, de maíz, entre otros (^{Reyes-Avalos 2016}, ^{Terrones & Reyes 2018}). Los estudios de digestibilidad de ingredientes alimenticios son necesarios para desarrollar la formulación de alimentos balanceados para el camarón con ingredientes amigables con el medio ambiente (^{Terrazas et al. 2010}). Por consiguiente, el objetivo fue determinar la digestibilidad aparente de la materia seca, proteína y carbohidratos de la dieta suplementada con ensilado biológico de harina de maíz en C. (C.) caementarius.

Material y métodos

Los camarones. Los camarones fueron capturados del río Pativilca (10°39’48’’ S, 77°39’20’’ W) (Lima, Perú) y transportados durante 4 h en el sistema diseñado previamente para evitar canibalismo (^{Reyes-Avalos 2016}). El reconocimiento de la especie fue realizado con clave taxonómica (^{Méndez 1981}) y según clasificación reciente (^{De Grave & Fransen 2011}) corresponde a Cryphiops (Cryphiops) caementarius. El sexo del camarón macho adulto fue verificado por la presencia de un poro genital en cada coxa del quinto par de periópodos (Reyes et al. 2017). Luego, se aclimataron por cinco días y fueron alimentados con la dieta sin ensilado (28% proteína cruda).

Ensilado de maíz. El grano entero seco de maíz amarillo (Zea mays) fue ensilado según el procedimiento de ^{Gallardo-Carril y Reyes-Avalos (2020}). El maíz de grano entero se adquirió del mercado de abastos El Progreso (Chimbote, Perú). La melaza de caña de azúcar de 76 °Brix procedió de la Empresa Agroindustria San Jacinto S.A.C. (Nepeña, Ancash, Perú). Las bacterias lácticas fueron aquellas que se comercializan liofilizadas Lyofast Y 456 B-1UC (Lactobacillus delbrueckii y Streptococcus thermophilus).

Dietas. La dieta sin ensilado (control) fue la formulada por ^{Reyes-Avalos (2016}) pero se tuvo en cuenta las mejoras realizadas en investigaciones posteriores (^{Ramírez et al. 2018}, ^{Acosta et al. 2018}, ^{Senmache & Reyes 2020}), además fue suplementada con 3% de Saccharomyces cerevisiae comercial (^{Cornejo et al. 2015}). En la dieta con ensilado (experimental) se reemplazó el 75% de la harina de maíz por el ensilado biológico de harina de maíz (Tabla 1), de acuerdo con ^{Gallardo-Carril y Reyes-Avalos (2020}). En ambas dietas, se utilizó óxido crómico (Cr₂O₃) como marcador inerte para el cálculo de la digestibilidad. Los pellets (2.7 mm de diámetro x 3.5 mm de largo) se obtuvieron en prensa casera, luego fueron secados (40 °C por 24 h) y almacenados en bolsas de plástico con cierre hermético.

Mantenimiento y alimentación. Después del periodo de aclimatación, los camarones fueron trasladados a un sistema de mantenimiento individual (^{Reyes-Avalos 2016}) que consistió en seis acuarios de vidrio (60 x 31 x 35 cm, 0.186 m² y 55 L) cada uno con cuatro recipientes de plástico transparente (19 cm de diámetro y 284 cm²) que se dispusieron en dos grupos de dos niveles (Figura 1A). Los acuarios tuvieron aireación constante (1.5 L min^-1) mediante dos difusores para circulación y oxigenación del agua. En cada recipiente se sembró un camarón, lo que permitió mantener 12 individuos con la dieta con ensilado y 12 con la dieta sin ensilado. El tamaño (4.50 a 7.20 cm de longitud total) de los camarones fue medido con vernier (± 0.01 mm). Los camarones tuvieron apéndices cefalotorácicos completos y fueron seleccionados al azar de un lote de 50 ejemplares. La distribución de los camarones por tamaños fue similar entre tratamientos (p>0.05). En estas condiciones los camarones fueron alimentados con las dietas (con y sin ensilado) dos veces por día (40% a las 08:00 h y 60% a las 18:00 h) con el 6% del peso húmedo y durante 20 días antes de iniciar con la recolección de las heces. El comportamiento alimentario de los camarones fue observado a través de los recipientes de plástico transparente.

Colección de heces del camarón. El sistema de colección de heces del camarón (Fig. 1B) consistió en dos acuarios (60 x 31 x 35 cm), dentro de cada uno se introdujo una caja de plástico sin tapa (54 x 30 x 24 cm) y sobre ella una caja de plástico cribada (54 x 30 x 8 cm) con 12 divisiones (9 x 15 x 8 cm) que constituyó la zona donde se albergaron a los camarones. Sobre la caja cribada se colocó una lámina de poliestireno expandido (1/2” de espesor) para evitar el escape de los animales al momento de sumergirlo en el agua. La aireación del agua fue constante (1.5 L min^-1).

Figura 1 A) Sistema de mantenimiento individual de camarones Cryphiops (Cryphiops) caementarius. B) Sistema de colección de las heces de los camarones. 

En el sistema de mantenimiento, los camarones fueron alimentados de 08:00 a 09:00 h, luego fueron trasladados al sistema de colección de heces donde permanecieron hasta las 18:00 h y retornados al sistema de mantenimiento para ser alimentados nuevamente hasta las 19:00 h para luego ser colocados en el sistema de colección de heces hasta el día siguiente. Este ciclo de alimentación y colección de heces fue repetido durante 10 días continuos. Las hebras de heces de los camarones fueron colectadas antes de cada alimentación, mediante succión con sifón (5 mm Ø), filtradas con malla Nytal (100 µm) y secadas en estufa (60 °C por 24 h), luego pesadas en balanza analítica digital AG 221LX (± 0.001 g) y almacenadas en un frasco de vidrio recubierto con papel de aluminio para ser conservados a -17 °C por 24 h para análisis posterior.

Análisis físico-organoléptico y químico de dietas. El análisis químico de las dietas se realizó en el Laboratorio Certificado COLECBI que consistió en determinar proteína cruda según el método UNE-EN ISO 5983-2 Parte 2 dic.2006 con factor de 6.25; lípidos totales según UNE 64021-1970; fibra con NMX-F-090-1978, cenizas con UNE 64019-1971; y los carbohidratos se calcularon por diferencia: 100 - (% proteína + %grasas + % fibra + % ceniza). El contenido de humedad se determinó según (AOAC 1990). El pH del ensilado fue registrado con pH metro digital (± 0.01) según ^{Betancourt et al. (2014}). La hidroestabilidad de los pellets se determinó según ^{Zettl et al. (2019}). Las características organolépticas de aroma, color y sabor de las dietas se determinaron según ^{Gallardo-Carril y Reyes-Avalos (2020}).

Análisis químico de heces. La proteína cruda de las heces de camarón se determinó por el método Kjeldahl-nitrógeno y para el contenido del óxido crómico (Cr₂O₃) y de carbohidratos en heces se empleó el espectrofotómetro Jenway 6105 UV Vis® a 350 nm. Las heces de cada individuo por tratamiento, recolectadas durante 10 días, se juntaron para los análisis.

Estimación de la digestibilidad. El coeficiente de digestibilidad aparente (CDA) para la materia seca y los nutrientes (proteína y carbohidratos) de las dietas fue calculado con las fórmulas de ^{Tsai et al. (2019}):

CDA de la materia seca (%) = 100 - 100 x (%CrD/%CrH)

CDA del nutriente (%) = 100 - 100 x (%CrD/%CrH) x (%ND/ %NH)

Donde, CrD es el Cr₂O₃ en dieta, CrH es el Cr₂O₃ en heces, ND es el nutriente en dieta, NH es el nutriente en heces (ver Apéndice 1).

Calidad de agua. El agua del sistema de cultivo donde se mantuvieron a los camarones fue renovada (25%) tres veces por semana y se realizó limpieza de los restos de alimento y de los desechos sólidos de excreción. La calidad de agua se evaluó semanalmente y se registró oxígeno disuelto y temperatura con Oxímetro digital Sension8® (± 0.01 mg L^-1; ± 0.01°C) y pH con pH metro digital 110® (± 0.01 unidades). El amonio total (mg L^-1) y los nitritos (mg L^-1) se determinaron con Kit Sera aqua-test box (± 0.1 mg L^-1).

Análisis de datos. La distribución normal de los datos se analizó con la prueba de Shapiro-Wilk. Se utilizó la prueba de t de Student (p<0.05) para el análisis de las diferencias entre las medias de la hidroestabilidad de los pellets, de la producción de heces y de los CDA de las dietas, así como de los parámetros de calidad del agua. El procesamiento estadístico de los datos se realizó con el programa estadístico SPSS versión 25 para Windows.

Resultados

Composición de las dietas. La dieta con ensilado, en comparación con la dieta sin ensilado (Tabla 2), tuvo similar contenido de proteína y de energía bruta, pero los lípidos totales, las cenizas y la fibra disminuyeron. En cambio, los carbohidratos y la proporción de carbohidratos/lípidos incrementaron. La hidroestabilidad de los pellets de la dieta con ensilado fue mayor (p<0.05) que aquellas sin ensilado. Además, las características organolépticas fueron similares entre dietas, excepto el sabor, pero los camarones aceptaron las dietas.

Producción de heces del camarón. Las hebras de heces húmedas del camarón (2 a 5 cm de longitud) permanecieron entre 9 a 13 h en el fondo de los acuarios de recolección de heces y no hubo disgregación ni contaminación. La producción de heces (deshidratadas) de camarón obtenidas durante el periodo experimental fue de 12.83 y 13.25 mg día^-1 camarón^-1 en aquellos alimentados con la dieta con y sin ensilado, respectivamente, pero fueron similares (p>0.05) entre tratamientos. Además, con el sistema de recolección de heces, solo se necesitó de 10 días para obtener la cantidad necesaria de muestras deshidratadas (≥1.5 g) para los análisis respectivos.

Digestibilidad aparente. El CDA de proteína y carbohidratos de la dieta con ensilado fue mayor (p<0.05) que la dieta sin ensilado, lo mismo sucedió con el CDA de la materia seca. Además, el CDA de los carbohidratos fue mayor que el de proteína en ambas dietas (Tabla 3).

Comportamiento alimentario. Los camarones de ambos tratamientos fueron atraídos por los gránulos de alimento colocados en el recipiente de cultivo individual. Ellos sujetaban cada granulo con el primer par de periópodos y con ayuda de los apéndices bucales lo rasgaron lentamente con las mandíbulas, produciendo el desprendimiento de partículas de alimento, pero esto no fue cuantificado para evitar estresar a los camarones. Después de consumir un gránulo de alimento, el camarón buscaba otro y realizaba el proceso descrito anteriormente. Los gránulos y partículas de alimento sobrantes fueron dispersados por el movimiento del camarón y en algunos casos no fueron consumidos. No se evaluó el estado de muda de los camarones para no alterar su comportamiento alimenticio.

Calidad del agua. La calidad del agua de mantenimiento de los camarones en el sistema de cultivo no presentó diferencias significativas (p>0.05) entre tratamientos. La temperatura varió entre 24.5 a 25.7 °C, el oxígeno disuelto fue de 6.2 mg L^-1, el pH de 8.2, y el amonio y los nitritos fueron de 0.03 mg L^-1.

Discusión

Nuestros resultados demuestran que ensilar harina de maíz y utilizarlo como ingrediente en la dieta, ocasiona que la proteína, los carbohidratos y la materia seca sean más asimilables por C. (C.) caementarius. Esto significaría que las bacterias ácido-lácticas del ensilado contribuyeron con incrementar la asimilación de los nutrientes dentro del intestino del camarón. De acuerdo con ^{Jumars (2000}), la fermentación microbiana en el intestino posterior actúa para recuperar una serie de componentes que de otro modo se perderían para el animal como el material hidrolizado, pero no absorbido; el uso del nitrógeno en las células absortivas ablacionadas o de enzimas digestivas endógenas; así como los carbohidratos que se utiliza en la lubricación de la mucosa digestiva; y otras sustancias químicas impermeables a las enzimas del animal pero susceptibles al ataque bacteriano.

Además, se ha encontrado en C. cainii que el uso de subproductos avícolas fermentados con L. casei y S. cerevisiae incrementan el número de microvellosidades por pliegue intestinal, los que son responsables de la absorción y utilización de nutrientes (^{Siddik et al. 2020}), de igual manera sucede con la adición de L. acidophilus y L. plantarum en la dieta C. cainii (^{Foysal et al. 2020}). De acuerdo con lo anterior, en nuestra investigación es probable que las bacterias ácido-lácticas del ensilado de maíz, y la presencia de S. cerevisiae de la dieta hayan contribuido con el incremento de las microvellosidades intestinales de C. (C.) caementarius, y por consiguiente con la superficie de absorción de nutrientes, como ha sido sugerido en C. cainii (^{Saputra et al. 2019}). Además, las bacterias del ensilado de maíz y de la levadura de la dieta también podrían haber actuado en la asimilación de los nutrientes, pues el intestino del camarón es recto y corto, y aunque el tiempo de evacuación gástrica no se conoce en la especie, es probable que sea similar al de otros crustáceos. En C. quadricarinatus el tiempo de evacuación gástrica es de 30 min (^{Loya-Javellana et al. 1995}), en M. borellii es de 1 a 6 h que depende el tipo de alimento (^{Carvalho et al. 2011}). Es conveniente estudiar el tiempo de evacuación gástrica de C. (C.) caementarius en diferentes estados ontogenéticos, y establecer la frecuencia y cantidad de alimento a emplear en un sistema de cultivo.

El mantenimiento del contenido de proteína en las dietas con y sin ensilado (29.04 y 28.60%, respectivamente) indica que la proteólisis de la cubierta de los gránulos de almidón fue muy reducida durante la mezcla con el ensilado, como han sugerido previamente ^{Gallardo-Carril y Reyes-Avalos (2020}) y porque el maíz contiene bajo contenido de proteína (7%) (^{Gwirtz & Garcia-Casal 2014}). Además, las bacterias ácido-lácticas que son los principales determinantes de la degradación de la matriz proteica alrededor de los gránulos de almidón (^{Junges et al. 2017}) no podrían ocasionar una variación importante del contenido de proteína, ni contribuir con la proteólisis de los otros insumos de la dieta, pues se conoce que los Lactobacillus ocasionan reducida proteólisis durante el ensilado de maíz (^{Santos et al. 2013}).

En L. vannamei, el CDA de la proteína (~84%) no cambia con el incremento del almidón de maíz (10 a 35%) en la dieta debido al balance adecuado de proteína, lípidos y carbohidratos, con el que provocan una utilización preferente de proteína (^{Guo et al. 2006}). En M. idae el CDA para la proteína del maíz es de 77.3% (^{Sundaravadivel & Sethuramalingam 2017}). En C. (C.) caementarius el CDA para la proteína incrementó (p<0.05) de 78.20% con la dieta sin ensilado hasta 80.01% con la dieta con ensilado. Esto sugiere que las bacterias ácido-lácticas del ensilado contribuyeron con mantener condiciones adecuadas dentro del intestino del camarón, lo que debe haber permitido incrementar la asimilación de la proteína de la dieta experimental. En C. cainii, la suplementación de L. acidophilus y L. plantarum en la dieta promueven significativamente la salud del intestino y hepatopáncreas, y produce un aumento de bacterias beneficiosas para la digestión, absorción y utilización de nutrientes con el cual se mejora la salud y el estado inmunológico (^{Foysal et al. 2020}). De igual manera sucede con la soya fermentada con B. subtilis que incrementa la diversidad bacteriana, la riqueza de especies, la uniformidad en el intestino y disminuyen los patógenos potencialmente dañinos como Vibrio y Flavobacterium en el intestino de L. vannamei (^{Cheng et al. 2019}).

En el camarón C. (C.) caementarius, el CDA de los carbohidratos de la dieta con ensilado (95.69%) fue mayor (p<0.05) que la dieta sin ensilado (93.48%), lo que indica que la hidrólisis del maíz durante el proceso del ensilado contribuyó con incrementar la digestibilidad de los carbohidratos. En Jasus edwardsii, la hidrólisis del maíz, es decir la gelatinización y la formación de dextrina, tienen un efecto positivo sobre la digestibilidad del almidón (^{Simon 2009}). Además, como el CDA de los carbohidratos de la dieta con ensilado fue mayor que el CDA de la proteína, significa que C. (C.) caementarius digiere con mayor eficiencia los carbohidratos de la dieta principalmente cuando se emplea como ensilado, probablemente porque la degradación de la matriz proteica de los gránulos de maíz mejora la digestibilidad del almidón como ha sido sugerido (^{Junges et al. 2017}). Aunque, en C. (C.) caementarius el CDA de los carbohidratos de la dieta sin ensilado fue mayor que en M. idea, cuyo CDA para carbohidratos del maíz fue de 76.9% (^{Sundaravadivel & Sethuramalingam 2017}), es evidencia de que C. (C.) caementarius utiliza con mayor eficiencia el almidón de maíz y también explicaría los resultados del mayor desempeño productivo del camarón cuando se alimenta con dietas con ensilado biológico de harina de maíz (^{Gallardo-Carril & Reyes-Avalos 2020}).

La CDA de la materia seca representa una buena estimación del grado en que un ingrediente es digerido y absorbido por el tracto digestivo (^{Siccardi III et al. 2006}). En C. (C.) caementarius el CDA de la materia seca de la dieta con ensilado de maíz (76.19%) fue mayor (p<0.05) que la dieta sin ensilado (74.36%), pero la disminución de la fibra y cenizas en la dieta con ensilado sugiere la acción de las bacterias del ensilado hacen altamente digeribles a los nutrientes de la dieta, como sucede en C. cainii (^{Foysal et al. 2020}). La disminución abrupta de fibra en la dieta con ensilado debe haber contribuido con el ligero incremento de la proteína en dicha dieta como ha sido sugerido por ^{Terrazas et al. (2010}) quienes consideran que la reducción del contenido de fibra cruda resulta en una mayor concentración de proteína en la dieta. Por el contrario, el incremento de la fibra dietética reduce la interacción entre las enzimas y los sustratos, reduciendo las tasas de absorción (^{Velurtas et al. 2011}). En L. vannamei, la CDA de materia seca aumenta de 49 a 69% con el aumento en el contenido de almidón de maíz en la dieta y con la correspondiente disminución en el contenido de fibra dietética (^{Guo et al. 2006}).

Las características organolépticas de las dietas fueron similares, excepto que la dieta con ensilado no tuvo sabor a pescado. Sin embargo, ambas dietas ocasionaron una respuesta alimentaria positiva en C. (C.) caementarius, lo que significa que el ensilado de maíz no afectó la aceptación de la dieta. La atractabilidad de una dieta se relaciona con el olor y el sabor que provienen principalmente de los insumos de origen marino como la harina de pescado, debido a su composición química (^{Suresh et al. 2011}), esto ocasiona que los animales lo detecten rápidamente y lo consuman con avidez. Sin embargo, es probable que ciertos productos secundarios que podrían producirse durante el proceso del ensilado de maíz contribuyeron con mantener la atractabilidad de la dieta. Recientemente se ha informado que la impregnación de los pellets de una dieta con jugo de caña de azúcar estimula la alimentación en Scylla tranquebarica, lo cual está asociada al consumo de detritus por el animal (^{Liew et al. 2020}). De acuerdo con esta investigación, es probable que el ensilado biológico de la harina de maíz en la dieta tenga características químicas similares a los detritus o que se produzcan otros componentes químicos que no ocasionaron pérdida de su atractabilidad, pues el camarón C. (C.) caementarius es omnívoro y por ello incluyen en su dieta a los detritus (^{Viacava et al. 1978}).

Por otro lado, los gránulos de alimento no fueron consumidos en su totalidad debido al comportamiento alimentario de C. (C.) caementarius que, aunque esto no fue cuantificado, es necesario conocer las pérdidas que se producen durante el proceso de disgregación del alimento por parte del camarón, que podría afectar la medición de la digestibilidad de las dietas y de la conversión alimenticia. Similar comportamiento alimentario tiene M. rosenbergii, donde los apéndices permiten al animal acercar la comida a la boca y con las mandíbulas lo fragmentan en trozos más pequeños y ocasionan pérdidas (^{Sarman et al. 2018}). Sin embargo, este comportamiento alimentario del camarón parece no haber afectado los resultados de la investigación por los datos obtenidos; además, los camarones adultos alimentados con las dietas con y sin ensilado produjeron heces en similares proporciones (12.83 y 13.25 mg^-1 día^-1 camarón^-1, respectivamente), aunque menor cantidad de heces se obtuvo con la dieta con ensilado, lo que sugiere mayor asimilación de nutrientes. Los juveniles de C. (C.) caementarius producen mayor cantidad de heces cuando se alimentan con ensilado de residuos de molusco y de vísceras de aves (18.6 y 21.6 mg^-1 día^-1 camarón^-1, respectivamente) (^{Rubio 2010}). Es conveniente investigar la producción de heces de los camarones en función del tipo de alimento y del estado ontogenético.

La separación del sistema de alimentación de los camarones con el de colección de heces de los mismos camarones fue experimentado por primera vez, donde se evitó la contaminación de las heces con los restos de las dietas y con ello se mantuvo la calidad del agua en condiciones similares al del hábitat natural de la especie (^{Wasiw & Yépez 2015}). Además, este sistema permitió colectar muestras de heces de 12 camarones a la vez por cada periodo de alimentación sin mayor manipulación de los animales. Esto significa que dicho sistema de alimentación y colección fue versátil y eficiente para manejar camarones pequeños como C. (C.) caementarius. ^{Jones y De Silva (1997}), emplearon un sistema de cajas individuales para albergar, alimentar y colectar heces de C. destructor, pero el tener que invertir y lavar las cajas donde se albergó a cada camarón complicó el trabajo. ^{Irvin y Tabrett (2005}), emplearon un pequeño balón de látex que fue pegado en el poro anal de la langosta Panulirus ornatus, pero las hebras fecales se desintegraron dentro de dicho balón cuando los animales fueron manipulados lo que ocasionó pérdida de los nutrientes de las heces.

Además, en los estudios de digestibilidad, ^{Smith y Tabrett (2004}) recomendaron que las heces de P. monodon deben colectarse dentro de las 12 h siguientes a la alimentación. En la investigación, el tiempo transcurrido (9 a 13 h) entre una alimentación y otra antes de la colección de las heces de C. (C.) caementarius podría haber deteriorado los nutrientes por el proceso de lixiviación y alterar la digestibilidad; pero, no hubo disgregación de las hebras de heces en el fondo del recipiente colector, aunque es conveniente acortar el tiempo de colección de heces en futuras investigaciones. Sin embargo, la alta hidroestabilidad (93%) de los pellets de la dieta con ensilado de harina de maíz en relación con aquella sin ensilado (90%) y la alta digestibilidad de la materia seca y de los nutrientes, sugieren que el tiempo entre cada colección de heces del camarón en el sistema no ocasionó la degradación o pérdida de los nutrientes de las heces o esta fue mínima. Estos resultados, están de acuerdo con ^{Fagbenro y Jauncey (1995}) quienes determinaron que los gránulos de la dieta con ensilado de pescado fermentado poseen alta estabilidad física (88%), es eficaz para la retención de nutrientes y evita pérdidas de proteína por lixiviación. Asimismo, la melaza de caña que fue utilizada como sustrato durante el proceso de ensilado, es un excelente ligante que aumenta la resistencia de los pellets (^{Radwan & El Shal 2012}). Al mismo tiempo, el incremento de los carbohidratos en la dieta con ensilado también sugiere que contribuyeron con dar mayor estabilidad a los pellets, como ha sido referido previamente en la misma especie de camarón (^{Gallardo-Carril & Reyes-Avalos 2020}) y en Procambarus clarkii (^{Xiao et al. 2014}), debido al poder de hinchamiento, viscosidad y capacidad de gelatinización que poseen los gránulos de almidón (^{Cornejo-Ramírez et al. 2018}) y es probable que se mejoren con el proceso de ensilado.

Los resultados de la investigación evidencian que los ejemplares adultos de C. (C.) caementarius digieren con mayor eficiencia los carbohidratos del ensilado de maíz en vez de la proteína, pero es conveniente estudiar lo que sucede en otros estados ontogenéticos. En M. rosenbergii, tanto juveniles como adultos utilizan carbohidratos como fuente de energía cuya cantidad en la dieta depende de su capacidad digestiva (^{D’Abramo & New 2010}), en cambio, en M. amazonicum, los adultos tienen otros requerimientos nutricionales para crecimiento y como fuente de energía, que los estados juveniles (^{Augusto & Valenti 2016}).