Introducción

Los ciclos biológicos de los Eumaeini neotropicales (Lycaenidae: Theclinae) han sido poco estudiados. Se conoce los estadios inmaduros de solo 25% de las aproximadamente 1000 especies descritas (porcentaje estimado a partir de datos publicados e inéditos). Tal porcentaje es aún menor para las especies andinas (estimado <1%). Penaincisalia K. Johnson, 1990 y Micandra Staudinger, 1888 incluyen respectivamente 24 y 9 especies descritas (^{Robbins 2004}); pero, solo se han criado dos del primero y una del segundo en la literatura (^{Beccaloni et al. 2008}). Son géneros exclusivamente andinos escasamente conocidos en términos de su biología.

En este artículo presentamos por primera vez observaciones de campo sobre los hábitos y la biología de dos especies, Penaincisalia purpurea (K. Johnson, 1992) y Micandra dignota (Draudt, 1919). Éstas incluyen descripciones de la última fase larval y la pupa de una de los dos, y del comportamiento larval e identificación de la planta alimenticia para ambas. Se menciona también el hallazgo de una crisálida de una especie de Nymphalidae cuya planta hospedera aún era desconocida.

Las orugas de Lycaenidae fueron halladas utilizando la técnica de golpeo, en el valle del río Cosñipata (Perú, Cuzco, kilómetros 32 - 33 de la carretera al Manú, (13°10.986'S, 71°35.786'W, 3240 m) durante la temporada seca (julio-agosto de 2021). La vegetación dominante en este lugar es el bosque montano nublado de porte relativamente bajo, con parches de vegetación herbácea (pajonal altoandino o puna). Las condiciones climáticas son arduas, por ejemplo, en la Estación Biológica Wayquecha situada 300 m más abajo, la temperatura media anual es de 15°C, pero puede descender por debajo de 0°C (gran oscilación térmica durante un solo día), humedad ambiental elevada, con precipitación pluvial anual de 1000 - 1300 mm y humedad relativa nocturna cercana al 100% (^{Ignatov et al. 2011}).

Por razones técnicas relacionadas con el viaje, la crianza completa no fue exitosa y las especies fueron identificadas posteriormente por comparación de sus códigos de barra de ADN con los de especímenes adultos del mismo valle que habían sido recolectados anteriormente.

Material y métodos

La técnica del golpeo es una forma de recolectar insectos fitófagos que ha sido utilizada por los entomólogos durante mucho tiempo (^{Riley 1892}). Esta técnica consiste en golpear las ramas y hojas de los árboles y arbustos para hacer caer los insectos que se encuentran ahí sobre un soporte (paraguas entomológico) colocado bajo la planta. Se utiliza una vara para golpear las plantas y un lienzo blanco de recepción sostenido por dos varillas dispuestas en X (Fig. 2C).

Después de ser halladas, las larvas se dejaron inicialmente en el soporte vegetal, rodeado por una manga de gasa (bolsa de la red entomológica, Fig. 1A) pues no podíamos llevarlas durante nuestro viaje más abajo, hasta Pilcopata a 530 m de altitud. Las larvas fueron recuperadas 10 días después. Sin embargo, apenas habían cambiado de aspecto cuando regresamos debido a las difíciles condiciones meteorológicas en las montañas (niebla, poco sol durante el día, bajas temperaturas). Las larvas fueron transportadas a la ciudad de Cuzco donde la crianza continuó en una jaula portátil con las ramas sumergidas en agua.

Figura 1 Valle del río Cosñipata, a 3240 m de altitud. A. Crianza de orugas de Lycaenidae en una manga de gasa directamente sobre una rama de Weinmannia crassifolia y atrás, vegetación típica de la zona de transición entre el bosque montano nublado y el pajonal altoandino. B. Muestra herborizada realizada in situ para la identificación futura de la planta. C, D. Crisálida de Perisama diotima en vista lateral (izquierda) y dorsal (fotografías C, D de Stéphane Brûlé). 

A nuestro regreso el día del hallazgo de las orugas, el género de las plantas, Weinmannia L., 1759 fue identificado por el personal que trabaja en la Estación Biológica Wayquecha, pues se utilizan en la farmacopea tradicional. Habíamos recogido otras hojas de Weinmannia de diferentes árboles cercanos para alimentar a las orugas, pero los biólogos de la Estación nos indicaron que correspondían al menos a tres especies diferentes. Gracias a la preparación de una muestra herborizada (Fig. 1B), la identificación de la especie en la que originalmente encontramos las orugas se hizo posteriormente.

Las orugas y la crisálida (Fig. 2) fueron fotografiadas con una cámara Canon EOS 650 D con un lente macro Sigma 105, los adultos (Fig. 3) con una cámara Nikon Coolpix 5000.

Para facilitar la identificación de las especies, la extracción de ADN se efectuó con la plataforma de “Barcode of Life Data Systems” (BOLD), Canadá. La comparación de los códigos de barras de ADN con el material ya secuenciado (proyecto NLYCA, Neotropical Lycaenidae, aún no publicado) fue realizada con los instrumentos de construcción del árbol de distancia mínima de la plataforma BOLD (“Neighbor Joining tree”).

Resultados

Dos larvas de Penaincisalia purpurea (K. Johnson, 1992), una de Micandra dignota (Draudt, 1919) y una pupa de Perisama diotima (Hewitson, 1852) fueron encontradas en agosto de 2021 sobre Weinmannia crassifolia Ruiz & Pav., 1802 (Cunoniaceae) usando primero la técnica de golpeo y luego una cuidadosa búsqueda sobre el arbusto (lo que permitió el descubrimiento de la crisálida). Una de las orugas de P. purpurea fue preservada en etanol para análisis de ADN y la otra murió en Cuzco. La oruga de M. dignota llegó a transformarse en crisálida, pero el adulto no emergió. No se observó mirmecofilia en los dos licénidos y no mostraron parasitoides. De la crisálida de P. diotima emergió un adulto.

Figura 2 Valle del río Cosñipata a 3240 m. A, B. Segundo estadio y último estadio larval de Penaincisalia purpurea en vista dorsal. C. Eddy Poirier utilizando la técnica de golpeo sobre las ramas de Weinmannia sp. para buscar orugas. D, E. Último estadio larval de Micandra dignota en vista lateral (arriba) y dorsal, comiendo hojas de Weinmannia crassifolia. F. Crisálida muerta de M. dignota en vista lateral (fotografías de Stéphane Brûlé excepto 1C). 

Aunque los arbustos de W. crassifolia estaban en floración en este período y las larvas de muchas especies de Lycaenidae son conocidas por ser antófagas, las dos especies se han observado consumiendo solo hojas.

La larva de P. purpurea, de forma aplanada, es verde y cubierta de pequeños puntos blancos de forma y tamaño regulares (diferentes estadios en Fig. 2A, B). Presenta dos líneas blancas poco contrastantes, una dorsal y otra transversal, más ancha, antes del primer segmento abdominal. Los estigmas marrones son bien marcados y las cerdas blancas laterales largas. Las líneas blancas y las sedas laterales de la oruga recuerdan las venas ligeramente pubescentes del reverso de las hojas de W. crassifolia. Así, la oruga es difícilmente detectable por confundirse visualmente con la parte inferior de la hoja donde se encuentra (homocromía).

La larva de M. dignota (Fig. 2D, E) es rojiza, salpicada de pequeños puntos blancos de forma y tamaño irregulares. Presenta una línea dorsal negra ancha y cerdas muy reducidas. A diferencia de la primera, se mantiene en la parte superior de las hojas y es muy conspicua por su color rojo sobre las hojas verdes (aposematismo ?). La pupa (Fig. 2F) es marrón con escasos mechones de pelos rojizos sobre el dorso del tórax y a ambos lados de la línea dorsal y los flancos del abdomen.

De la pupa de M. dignota no emergió un adulto pero su ADN (ID de muestra : CF-LYC-1654) es idéntico al de varios ejemplares de M. dignota del mismo valle ya secuenciados (CF-LYC-757, CF-LYC-875, CF-LYC-909). Del mismo modo, la oruga de P. purpurea fue identificada comparando su ADN (CF-LYC-1653) con un macho de P. purpurea (CF-LYC-905) del mismo lugar. Se ilustran los machos de ambas especies (Fig. 3).

Las únicas otras species cuya crianza ha sido reportada en la literatura en estos dos géneros son Penaincisalia aurulenta K. Johnson, 1990 sobre Vaccinium sp. (Ericaceae) en Perú (^{Beccaloni et al. 2008}), P. loxurina (C. Felder & R. Felder, 1865) y Micandra sylvana (Jörgensen, 1934) sobre Eupatorium bupleurifolium (Compositae) en Argentina (^{Hayward 1943}, 1960, 1969).

Figura 3 Lycaenidae (machos) en el valle del río Cosñipata en vista dorsal (izquierda) y ventral. A. Micandra dignota (Draudt, 1919). B. Penaincisalia purpurea (K. Johnson, 1992). Escala 1 cm. 

En el museo de Historia Natural de la Smithsonian Institution (USNM), un macho y una hembra de Micandra platyptera (C. Felder & R. Felder, 1865) se criaron sobre plántulas de Inga (Leguminosae), de Costa Rica, Puntarenas, Las Cruces, 1200 m, leg. ^{DeVries. Las larvas son mirmecófilas (DeVries 1991}) y producen sonidos (llamadas en relación con las hormigas). Micandra aegides (C. Felder & R. Felder, 1865) fue criada sobre Gunnera brephogea Linden & André (Gunneraceae), de Ecuador, Napo, Yanayacu Biological Station, Yanayacu Forest, 5 km W Cosanga, 2163 m (USNM, voucher no. 14939). Por último, una hembra de Micandra dignota (Draudt, 1919) fue criada sobre Psammisia sp. (Ericaceae), de Ecuador, Napo, Yanayacu Biological Station, Macucoloma trail (Tulane University ? voucher no. 3900).

Los datos de la literatura o del USNM no sugieren una familia específica de plantas hospederas para los géneros Penaincisalia y Micandra.

Penaincisalia purpurea y M. dignota ya han sido reportadas de Cosñipata (^{Lamas et al. 2021}). En dicha publicación, los autores precisan que la primera vuela entre 2950-3550 m y es la segunda especie de Penaincisalia más frecuentemente encontrada en el valle. Micandra dignota también es la segunda especie más observada de Micandra, ocurriendo entre 1970-2950 m.

De la crisálida hallada en W. crassifolia después de una búsqueda cuidadosa, y que estaba suspendida por el cremáster bajo una hoja, emergió una hembra de Perisama diotima (Hewitson, 1852). La hembra se ilustra en la Fig. 1H de ^{Zubek et al. (2017}). Los estadios inmaduros y la biología de esta especie eran desconocidos. No tenemos la certeza que la planta hospedera de la oruga sea Weinmannia porque las larvas a veces se convierten en crisálidas lejos de la planta en la que se han desarrollado, pero hay fuertes presunciones debido a la configuración del sitio (árbol aislado, sin continuidad con otros vegetales, con el suelo circundante cubierto de piedras empujadas por excavadoras que ensanchan la carretera, Fig. 1A). Perisama diotima se distribuye en el sur de Perú y en Bolivia.

Las otras especies asociadas a Weinmannia (^{Beccaloni et al. 2008}) son dos Nymphalidae: Perisama barnesi Schaus, 1913 y P. vaninka (Hewitson, [1855]), y dos Hesperiidae: Venada advena (Mabille, 1889) y Apyrrothrix (Aesculapyge) aesculapus (Staudinger, 1876).

Comentarios

Los bosques montanos nublados son de clima frío con una gran oscilación térmica y elevada humedad. Por tales razones, es difícil realizar una crianza fuera de la zona, manteniendo las condiciones reales (por ejemplo, en la ciudad de Cuzco). Las primeras observaciones sugieren una prolongación del período de los estadios inmaduros en comparación con los ambientes de menor altitud donde la duración media es de 15 días (^{Faynel & González-Mercado 2019}). Así, según datos de USNM sobre M. aegides, de una larva recolectada el 30 de mayo de 2006 a una altitud superior a 2100 m, un adulto emergió el 19 de julio de 2006 (50 días más tarde).

Los individuos de Weinmannia son frecuentes a ambos lados de la carretera de Acjanaco a la Estación Biológica de Wayquecha, lo que representa a la vez una ventaja (para encontrar orugas en el futuro) y una desventaja (demasiada dispersión).

Weinmannia machupicchuensis^{Arroyo, 2021} y W. oxapampana Arroyo, 2021 son dos especies amenazadas de Cunoniaceae recientemente descritas y endémicas de los bosques montanos de los Andes peruanos (Arroyo 2021). Es posible que algunas especies de Lycaenidae solo estén asociadas a estas plantas.

Es el primer uso de la técnica de golpeo desde el inicio de nuestras investigaciones en el valle en 2014 y ha demostrado ser exitoso. El mismo método se utilizará más ampliamente en el futuro.