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Revista del Cuerpo Médico Hospital Nacional Almanzor Aguinaga Asenjo

Print version ISSN 2225-5109On-line version ISSN 2227-4731

Rev. Cuerpo Med. HNAAA vol.14 no.4 Chiclayo Oct./Dec. 2021  Epub Dec 29, 2021

http://dx.doi.org/10.35434/rcmhnaaa.2021.144.1472 

Contribución Especial

Contaminación microbiológica y factores asociados en la leche materna del banco de leche humana de un Hospital en Perú

Microbiological contamination and associated factors in breast milk from the human milk bank of a Hospital in Peru

Jaime Rosales-Rimache1  , Magíster en Salud Ocupacional
http://orcid.org/0000-0002-1665-2332

Jonathan Valenzuela-Albújar2  , Licenciado en Tecnología Médica
http://orcid.org/0000-0001-9896-2539

1 Instituto Nacional de Salud, Lima, Perú

2 Hospital San Bartolomé, Lima, Perú

RESUMEN

Objetivo

Estimar la contaminación microbiológica e identificar sus factores asociados en leche materna dentro del BLH de un Hospital en Perú.

El estudio

Diseño transversal, donde se realizó evaluación física, química y microbiológica a muestras de leche materna.

Hallazgos

Evaluamos 187 muestras de leche donadas por madres La acidez Dornic y crematocrito promedio fue de 5.2±1.6 y 2.7±0.9%, y la contaminación microbiológica representó el 3.7% del total de muestras evaluadas, aislándose Acynetobacter iwoffi, Moraxela lacunata, Pseudomona aeruginosa y Staphylococcus coagulasa negativa. Se evidenció que el pH de la leche fue la única variable asociada a contaminación microbiológica (OR: 3.7 IC95: 1.5-8.8).

Conclusión

El incremento de pH es un factor asociado a contaminación microbiológica en muestras de leche donadas en el BLH de un Hospital en Perú, por lo que es recomendable reevaluar los criterios de aceptabilidad del rango de pH de la leche materna donada.

Palabras Clave: Leche materna; Microorganismo; Banco de leche humana; Perú

ASBTRACT

Objetive:

Estimate microbiological contamination and identify its associated factors in breast milk within the BLH of a Hospital in Peru.

The study:

Cross-sectional design, where a physical, chemical and microbiological evaluation was carried out on samples of breast milk.

Findings:

We evaluated 187 milk samples donated by mothers. The average Dornic acidity and crematocrit were 5.2 ± 1.6 and 2.7 ± 0.9%, and the microbiological contamination represented 3.7% of the total samples evaluated, isolating Acynetobacter iwoffi, Moraxela lacunata, Pseudomona aeruginosa and Staphylococcus negative coagulase. It was evidenced that the pH of the milk was the only variable associated with microbiological contamination (OR: 3.7 IC95: 1.5-8.8).

Conclusion:

The increase in pH is a factor associated with microbiological contamination in donated milk samples at the BLH of a Hospital in Peru, so it is advisable to re-evaluate the acceptability criteria of the pH range of donated breast milk.

Keywords: Breast milk; Microorganism; Human Milk Bank; Peru

INTRODUCCIÓN

Cada año nacen más de 20 millones de lactantes con un peso inferior a 2500 g, más del 96% en países en desarrollo. Estos lactantes de bajo peso al nacer están expuestos a un mayor riesgo de morbimortalidad neonatal1. En general, el uso de la leche materna obtenida en los bancos de leche humana (BLH) forma parte de las intervenciones dirigidas a mejorar la alimentación de los lactantes con bajo peso al nacer tienden a mejorar su salud y bienestar inmediatos y a largo plazo, y repercuten considerablemente sobre los niveles de mortalidad neonatal e infantil en la población2. Así mismo, los BLH son responsables por desarrollar e implementar acciones de promoción, protección y apoyo a la lactancia materna, como también de la recolección de la leche materna de las donantes, de su procesamiento (pasteurización), control de calidad y distribución para la alimentación en especial de los bebés prematuros que nacen en los hospitales dedicados a la atención materno infantil3.

Los procesos para garantizar la obtención de una leche de calidad para el suministro a los recién nacidos que lo requieren, es fundamental; en ese sentido, el proceso de pasteurización de la leche materna humana inactiva contaminantes bacterianos y virales como especies de Bacillus4, virus de la inmunodeficiencia humana5 y citomegalovirus6. Sin embargo, a pesar de los controles implementados para vigilar el proceso antes y después de la pasteurización, se ha logrado aislar microorganismos que pueden generar contaminación y trastornos gastrointestinales en el recién nacido7. Estudios extranjeros han demostrado la presencia de estafilococos y bacilos gram negativos aislados a partir de leche materna, de la cual el factor más importante en el proceso de contaminación, es durante la colección, manipulación y obtención de la leche8. Aunque todas las donantes de leche son evaluadas para el descarte de enfermedades virales (hepatitis B y C, VIH, HTLV y citomegalovirus), el proceso de pasteurización inactiva los virus transmitidos en la leche humana. No obstante, no elimina toda contaminación microbiana; hay evidencia que bebés con bajo peso al nacer pueden presentar infección intestinal debido a Bacillus cereus, y eso puede deberse a la contaminación de leche agrupada de donantes, y que la carga bacteriana no fue detectada debido a la baja sensibilidad de los cultivos microbiológicos9.

Por lo expuesto, esta investigación tuvo por objetivo estimar la contaminación por microorganismos en leche materna e identificar sus factores asociados después del proceso de pasteurización dentro del BLH de un Hospital en Perú durante el año 2018, a fin de establecer medidas que disminuyan la tasa de rechazo de leche materna por contaminación microbiológica.

MATERIALES Y MÉTODOS

Área de estudio y población

Estudio de corte transversal que se realizó en el Hospital San Bartolomé (HODOMANI) de la ciudad de Lima, capital del Perú. Este hospital es una institución de referencia a nivel nacional que brinda atención especializada en salud sexual y reproductiva de la mujer y atención integral al feto, lactante, niño y adolescente. Además, es el primer hospital en Perú en contar con un BLH. La población estuvo representada por todas las muestras de leche materna humana que fueron colectadas de madres en periodo de lactancia en las instalaciones del BLH del Hospital San Bartolomé durante el mes de agosto del año 2018. Se incluyeron muestras de leche procedentes de madres donantes y en periodo de lactancia. Se excluyeron muestras de leche con pH mayor a 8.0, o por presencia de color anormal (rojizo, verdoso, sanguinolento), de acuerdo al procedimiento para la evaluación de leche materna pasteurizada en el banco de leche del HODOMANI.

Tamaño de muestra

Se empleó un muestreo no probabilístico y de selección por conveniencia. Se evaluaron 187 muestras de leche materna elegibles, cuya cantidad permitió obtener una potencia de 92.1% en un modelo de regresión logística, asumiendo una proporción de evento (cultivo positivo: presencia de contaminación microbiológica) de 12%, y un odds ratio de 4.0 ajustado a un R2 de 0.7, con un nivel de significancia de 0.05. Realizamos el cálculo de potencia con el software PASS (power analysis and simple size) versión 11.

Técnicas e instrumentos

Cultivo microbiológico: Se emplearon 4 alícuotas de 1 mL cada una, extrayendo con pipeta de forma independiente, en tubos con 10 mL de caldo verde brillante (BGBL) a 5% p/v, con tubos Durham en su interior. Tras la inoculación e incubación a 36±1°C, la presencia de gas en el interior del tubo Durham caracterizó un resultado positivo. El tubo positivo a su vez, fue repicado, con un asa de siembra, para tubos conteniendo BGBL en concentración de 40 g/L. Tras la incubación de estos tubos, la presencia de gas confirmó la existencia de microorganismos del grupo coliforme, tornando el producto impropio para consumo. La identificación bioquímica del microorganismo fue en medios de cultivo diferenciales como TSI, Citrato de Simmons, LIA, SIM, reacción oxidasa, catalasa y prueba de indol. Los procedimientos se llevaron a cabo en el laboratorio de microbiología del banco de leche del HODOMANI.

Variables

La contaminación microbiológica fue identificada como un recuento mayor a 10000 UFC/mL y se realizaron pruebas bioquímicas para la identificación del microorganismo, con reporte de género y especie. En cuanto a la leche materna donada, se registró el tipo de leche y se clasificó como calostro (hasta el 7° día), transicional (entre el 8° y 15° día) o madura (mayor al 15° día), según fecha del parto. También se reportó el color siendo aceptable blanquecino, amarillo, verdoso o azulado. Así mismo, se estimó el valor de pH siendo el rango aceptable entre 1 y 9, y el crematocrito, definido como el porcentaje de la crema por un factor de conversión para obtener el tenor de grasa y contenido energético total., expresado en % y Kcal/L, respectivamente. Las donantes de leche fueron clasificadas como primerizas o múltiples, y según el lugar de la colección, en el HODOMANI o domicilio. También se registró la edad de la donante y el tiempo que lleva dando de lactar. Las extracciones de las muestras de leche no excedieron los 30 minutos y fueron inmediatamente congeladas a -3°C y con un tiempo de vida máximo de 15 días previo a la pasteurización. Este procedimiento fue el mismo en los muestreos domiciliarios y en HODOMANI.

Análisis estadístico

Presentamos la data de forma descriptiva, en frecuencias o promedios y desviación estándar, según su escala de medición correspondiente. Comparamos la contaminación microbiológica según variables independientes en análisis bivariado empleando la prueba chi cuadrado, siendo significativo un p-valor menor a 0.05. Identificamos los factores asociados a contaminación microbiológica mediante el Odds Ratio (OR) calculado en un modelo de regresión logística. También, reportamos el intervalo de confianza al 95% y p-valor. Consideramos como asociación significativa un p-valor menor a 0.05. Utilizamos el software STATA corporation versión 15 para los cálculos estadísticos.

Consideraciones éticas

La investigación fue aprobada por la Dirección General del HODOMANI. Obtuvimos el consentimiento informado de las madres donadoras, explicándoles sobre los riesgos y beneficios de la investigación. Se utilizó la data estrictamente para dar cumplimiento a los objetivos planteados en la investigación, y mantuvimos el anonimato de los registros, no accediendo a los datos personales de cada madre participante.

RESULTADOS

Evaluamos 187 muestras de leche que fueron donadas voluntariamente por madres atendidas en el Lactario del HODOMANI. La edad de las donantes osciló entre 15 y 39 años; con tiempos de lactancia desde 3 hasta 7 meses después del parto. Cerca de un tercio de las madres fueron donantes únicas, y el tipo de leche de mayor frecuencia fue la madura. En cuanto al crematocrito, obtuvimos una media de 2.7% (mín.: 1.53% y máx.: 4.63%), y expresado en kilo calorías un valor de 59.6 (mín.: 47.8 y máx.: 78.1). El pH promedio de la leche donada fue de 5.2 (mín.: 1.19 y máx.: 8.2). Ver tabla 1

Tabla 1 Características descriptivas de las donantes de leche 

Variable N %
Procedencia
HODOMANI 115 61.50
Domicilio 72 38.50
Edad 25.7 ± 6.1*
Tiempo de lactancia 2.2 ± 1.3*
Tipo de donante
Primeriza 64 34.22
Múltiple 123 65.78
Tipo de leche
Calostro 34 18.18
Transicional 6 3.21
Madura 147 78.61
Color de la leche
Blanquecina 154 82.35
Amarilla 33 17.65
Acidez 5.2 ± 1.6*
Crematocrito (%) 2.7 ± 0.9*
Crematocrito (Kcal) 59.6 ± 8.7*
Contaminación microbiológica
No 180 96.26
Si 7 3.74

*Media ± desviación estándar

Aislamos 4 microorganismos de especies diferentes en la leche donada que pasó por el proceso de pasteurización. Ver tabla 2

Tabla 2 Microorganismos aislados de la leche donada 

Microorganismo aislado N %
Negativo 180 96.26
Acynetobacter iwoffi 2 1.07
Moraxela lacunata 2 1.07
Pseudomona aeruginosa 1 0.53
Staphylococcus coagulasa negativa 2 1.07

Tabla 3 Variables independientemente asociadas a contaminación microbiológica de leche materna donada 

Variable Contaminación microbiológica p-valor
No Si
Procedencia 0.809*
HODOMANI 111 4
Domicilio 69 3
Edad 25.7±6.1 24.7±7.5 0.681**
Tiempo de lactancia 2.18±1.31 2.14±0.90 0.938**
Tipo de donante 0.624*
Primeriza 61 3
Múltiple 119 4
Tipo de leche 0.372*
Calostro 34 0
Transicional 6 0
Madura 140 7
Color de la leche 0.212*
Blanquecina 147 7
Amarilla 33 0
Acidez 5.1±1.5 7.0±0.89 0.001
Crematocrito (%) 2.75±0.88 2.67±0.88 0.807
Crematocrito (Kcal) 59.7±8.7 59.0±8.60 0.846

*Prueba Chi cuadrado de Pearson

**Prueba t-student a dos colas

El análisis bivariado evidenció que la única variable que presentó diferencias significativas según la presencia de contaminación microbiológica fue la acidez Dornic, cuyo pH sin contaminación fue de 5.1 (mín.: 1.19; máx.: 8.2); mientras que en las contaminadas fue de 7.0 (mín.: 5.7; máx.: 8.0). Ver tabla 3

Tabla 4 Identificación de factores de riesgo asociados a contaminación microbiológica de leche donada 

Variable Análisis bivariado Análisis multivariado*
OR IC95 p-valor OR IC95 p-valor
Procedencia
HODOMANI Referencia Referencia
Domicilio 1.10 0.51-2.36 0.810 0.47 0.04-5.82 0.554
Edad 0.97 0.86-1.10 0.680 1.18 0.87-1.59 0.290
Tiempo de lactancia 0.98 0.55-1.75 0.937 0.53 0.15-1.89 0.328
Tipo de donante
Primeriza Referencia Referencia
Múltiple 0.68 0.15-3.15 0.626 0.19 0.01-4.32 0.298
Tipo de leche
Calostro Referencia Referencia
Transicional --- --- --- --- --- ---
Madura 0.05 0.02-0.11 <0.001 --- --- ---
Color de la leche
Blanquecina Referencia Referencia
Amarilla 0.05 0.02-0.10 <0.001 --- --- ---
Acidez 0.006 0.003-0.009 <0.001 3.7 1.54-8.75 0.003
Crematocrito (%) 0.90 0.37-2.16 0.806 0.83 0.31-2.24 0.71

*Regresión logística binaria

El análisis multivariado mediante regresión logística nos permitió estimar el OR como medida para identificar si la variable se comporta como factor de riesgo o protección asociado a contaminación microbiológica. La acidez Dornic, fue una variable que estuvo asociada a contaminación microbiológica; y evidenciamos que, en cada incremento en una unidad del pH de la leche donada, la posibilidad de contaminarse microbiológicamente es de 3.7 veces, con un intervalo de confianza de 1.5 a 8.8 veces. Ver tabla 4.

DISCUSIÓN

La leche obtenida por donación voluntaria constituye uno de los procesos más importantes en la recuperación del estado nutricional de recién nacidos que no tienen la oportunidad de lactar de sus progenitoras; en ese sentido, el proceso que implica supervisar la calidad de las leches donadas es fundamental para garantizar la administración de un producto seguro, nutritivo y saludable para el recién nacido. Los bancos de leche humana (BLH) son los encargados de velar por el cumplimiento de las funciones descritas, que van desde la recolección de las muestras de leche, transporte y mantenimiento, análisis físico y químico, proceso de esterilización por pasteurización, análisis microbiológico y de crematocrito. Sin embargo, del total de leches evaluadas y pasteurizadas, existe un porcentaje que se desechan debido a la contaminación microbiológica presente en las mismas.

Nuestro estudio identificó los factores de riesgo que se asocian a la contaminación microbiológica de leche materna donada, dada la ausencia de investigaciones que hayan evaluado la identificación de factores de riesgo asociados a contaminación microbiológica en modelos probabilísticos con análisis multivariado. Solo se ha reportado trabajos de naturaleza descriptiva orientados a conocer el nivel de conocimientos y percepción de las donantes de leche respecto a aspectos de extracción y conservación de la leche donada10,11, así como la calidad en la gestión de procesos en los BLH12. En ese sentido, nuestra propuesta brinda información relevante que debe considerarse en el proceso de evaluación de calidad de la leche donada; aun cuando el proceso de esterilización por pasteurización de la leche presenta una alta eficacia en la reducción y/o eliminación de microorganismos.

Diversos autores han evidenciado que la pasteurización de la leche materna no siempre es efectiva de manera absoluta, por ejemplo, Naicker et al., encontraron aislamiento bacteriano en una de 100 muestras pasteurizadas13; Dewitte et al., encontró que el 0.5% de muestras de leche tuvieron positivas para S. aureus, motivo por el cual tuvo que descartarse 218 litros de leche14. Este último dato es importante, porque permite evidenciar que la contaminación genera grandes pérdidas de leche donada en los BLH, generando un problema crítico en al abastecimiento de leche para recién nacidos con necesidades especiales.

Nuestros hallazgos muestran que el 3.7% de la leche pasteurizada presentó contaminación con microorganismos bacterianos, de los cuales las 4 especies son consideradas patógenas para los seres humanos. Si bien es cierto, el porcentaje de contaminación microbiológica es mucho mayor que lo reportado en otros estudios, este factor depende mucho del algoritmo de cultivo empleado, ya que diversos programas de vigilancia microbiológica emplean medios de cultivo para bacterias mesófilas, pero no incluyen medios para organismos anaerobios, hongos, mohos, entre otros. Por ejemplo, Serafini et al., logró aislar Staphylococcus aureus se detectó en cinco (3,5%) muestras, Staphylococcus epidermidis en 15 (10,4%), Staphylococcus lugdenensis en dos (1,4%), Streptococcus spp. en cuatro (2.8%), levaduras y mohos en 37 (25.7%) y Enterobacteriaceae en nueve (6.3%)15; lo que demuestra una elevada contaminación microbiológica, pero que depende de la fineza y rigurosidad de los medios empleados. Como se aprecia, la frecuencia de contaminación obtenida en el estudio es similar a lo reportado en otras investigaciones.

Dentro de las limitaciones del estudio, podemos señalar que los microorganismos aislados fueron únicamente identificados a través de sus características fenotípicas (metabolismo por intermedio de pruebas bioquímicas en cultivo); sin embargo, no se pudo estudiar la identificación genética de los mismos, debido a limitaciones logísticas y no contar con un laboratorio de biología molecular. Esto hubiese servido para identificar subespecies de posibles patógenos, así como explicar el comportamiento de los perfiles de resistencia y sensibilidad antibiótica de los microorganismos aislados. Por otro lado, si bien no hubo un muestreo probabilístico que permita inferir los resultados, también es cierto que son pocos los bancos de leche humana en Perú, por lo que nuestros hallazgos contribuyen a la formulación de posteriores hipótesis que puedan ser abordadas con diseños de mayor consistencia.

De esta investigación, podemos afirmar que el pH de la leche materna juega un rol fundamental como factor de riesgo de contaminación microbiológica; y esto ha sido evidenciado en un estudio que evaluó el efecto de acidificación de la leche y su capacidad para disminuir la viabilidad celular y microbiana; sin embargo, alterando la calidad del contenido nutricional de la leche16. Por lo tanto, si bien es cierto que la alcalinización o incremento del pH de la leche materna puede jugar un factor que promueve la contaminación microbiológica, también hay que considerar que los esfuerzos para reducir este problema deben estar orientados a mejorar los procesos de esterilización, evaluando la eficacia de diversas alternativas de pasteurización, y finalmente seleccionado aquel que evite la contaminación microbiológica y sin reducir la calidad nutricional de la leche.

Finalmente, podemos señalar que el pH de la leche es un factor importante en la contaminación microbiológica. Por lo tanto, su medición debería ser realizada con procedimientos más sensibles y específicos que incluyan la cuantificación de la estimación de incertidumbre, y se debería reevaluar los límites permisibles para el rango de aceptabilidad en los valores de pH mediante el estudio de acidez Dornic, puesto que la alcalinidad podría ser un factor predeterminante en la contaminación microbiológica.

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FUENTE DE FINANCIAMIENTO: Ninguna

Recibido: 30 de Abril de 2021; Aprobado: 15 de Noviembre de 2021

CORRESPONDENCIA: Autor corresponsal: Jaime Rosales Rimache Dirección: Calle Las Amapolas 350, Lince Afiliación: Instituto Nacional de Salud Telefono: + 51 1 944457898 E-mail: jaime.rosales@upch.pe

CONFLICTOS DE INTERÉS: Ninguno

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