INTRODUCCIÓN

La citricultura es una actividad agrícola y económica, que reviste de mucha importancia en varios países del mundo. En el año 2019 la producción de limas, limones y naranjas alcanzó las 5.286.746 de ha cosechadas con una producción de 98.749.234 millones de toneladas (FAOSTAT, 2021), siendo los principales países productores, China, Brasil, Estados Unidos, México y España (^{Rodríguez & Mendoza, 2014}).

En Ecuador, también constituye una actividad de relevancia, siendo los cítricos cultivados comercial-mente en 6 de las 24 provincias, tanto en la región costera del Pacífico como en la sierra del país (^{Cañarte-Bermúdez & Navarrete-Cedeño 2019}). La superficie sembrada está estimada en 20.238 ha con una producción anual de 17.522 toneladas (FAOSTAT, 2021), Los cítricos son afectados por problemas fitosanitarios tanto endémicos (^{Valarezo et al., 2011}) como exóticos (^{Cornejo & Chica, 2014}) que inciden a lo largo de su ciclo fenológico y al no ser tratados adecuadamente pueden provocar disminución de la calidad de los frutos. Entre éstos, el psílido asiático de los cítricos, Diaphorina citri Kuwayama., 1908 (Hemiptera: Liviidae) representa el problema más destructivo debido a la transmisión de las bacterias, Candidatus Liberibacter spp., las cuales causan la enfermedad conocida como Huanlongbing (^{Gottwald, 2010}).

Las bacterias referidas se alojan en el floema, provocando obstrucciones y limitando así la función de conducción de savia (^{Bové 2006}). Aunque la enfermedad aún no ha sido reportada en el país, este insecto fue detectado por primera vez en la provincia de Guayas en el año 2013 (^{Cornejo & Chica, 2014}), y posteriormente se dispersó a las provincias de Santa Elena (^{Chávez et al., 2019}), Manabí (^{Navarrete et al., 2016}), Carchi, Imbabura, Cotopaxi, Los Ríos, El Oro, Loja y Santo Domingo de los Tsáchilas (^{Cuadros et al., 2020}; ^{Erráez et al., 2020}). Por lo tanto, constituye la amenaza potencial más relevante para la citricultura ecuatoriana (^{Chirinos et al., 2021}).

Desde la detección del insecto, en Ecuador se han realizado estudios que abordan diferentes aspectos relacionados con este problema fitosanitario (^{Chávez et al., 2017}; ^{Portalanza et al., 2017}; ^{Erráez et al., 2020}). Dada la importancia que tienen los cítricos para el país y la detección del vector hace cerca de una década, es necesario definir la distribución geográfica del insecto y su biología con la finalidad de contar con información que podría eventualmente utilizarse para orientar estrategias de manejo integrado del insecto vector y de la enfermedad en caso de su probable llegada a territorio ecuatoriano.

El objetivo de esta investigación fue analizar la situación actual, así como, las perspectivas de manejo de este importante problema.

ASPECTOS GENERALES DEL HUANGLONGBING

El Huanglongbing, es una enfermedad además conocida como enverdecimiento de los cítricos, dragón amarillo, Greening o Ex-Greening causada por las bacterias Candidatus Liberibacter spp., que origina la pérdida de vigor, muerte de ramas y posteriormente, la muerte de las plantas. Los árboles infectados producen frutos amargos y deformes. El Huanglongbing ha destruido la producción de cítricos en diferentes países, como en Brasil, México y Estados Unidos, causando grandes pérdidas económicas debido a la disminución del rendimiento, pérdida de la calidad de la fruta, muerte de plantas, eliminación de los huertos, control de vectores y reconversión del sistema de producción de plantas en los viveros (SAG, 2019).

A principios del siglo pasado y hasta el año 2002, la enfermedad estaba restringida al sudeste asiático, la India y África. Ese año se informó por primera vez, para América afectando cítricos en Sao Paulo, Brasil y posteriormente en la Florida, Estados Unidos (^{González et al., 2007}). Posteriormente se detectó en Cuba, República Dominicana, México, Belice y Colombia (^{Olvera-Vargas et al., 2020}) y en Venezuela (^{Marys et al., 2020}). Las bacterias causantes del Huanglongbing ingresan a nuevos territorios mediante material infectado (yemas, ramillas o plantas enfermas) y su avance a corta distancia, entre plantas, es a través de insectos vectores infectados. El nombre Liberibacter es una palabra compuesta, proveniente de dos vocablos del latín liber (corteza) y bacter (bacteria) lo que está asociado a que la bacteria se aloja en el floema. Se reconocen tres especies de α-protobacterias causantes de esta enfermedad: Candidatus Liberibacter asiaticus, Candidatus Liberibacter americanus y Candidatus Liberibacter africanus (^{Bové, 2006}; ^{Santivañez et al., 2013}). En América es predominante Ca. L. asiaticus, aunque en Brasil está presente Ca. L. americanus (Olvera-Vargas et al., 2020).

El principal vector de las dos primeras especies es el psílido asiático, D. citri mientras que el psílido africano, Trioza erytreae, Del Guercio (Hemiptera: Triozidae), transmite la última mencionada y está circunscrita al continente africano (^{Bové, 2006}). Estas bacterias después de después de ser introducidas por el vector en la planta hospedera, al moverse a través del sistema vascular, la invaden, causando su muerte después de dos a tres años a partir de la infección (Bové, 2006).

El Huanglongbing provoca un impacto negativo en los citricultores y en toda la cadena de valor. El porcentaje de pérdidas causadas por esta enfermedad varían desde, desde 20-30% hasta un 100% (^{Bové, 2006}). Es fundamental un adecuado manejo fitosanitario de las plantaciones de cítricos para evitar su contaminación (Bové, 2006).

^{Holguín et al. (2012}) indican que, para demostrar los alcances de la enfermedad, se puede señalar lo ocurrido en la provincia de Guandong, China. Allí, se erradicaron 960.000 plantas de mandarinas y limones, lo que disminuyó la producción regional de 450.000 mil a solo 5.000 toneladas. En Filipinas, siete millones de árboles de cítricos fueron severamente afectados por esta enfermedad, lo que redujo la superficie sembrada en más de 60%. Adicionalmente, en el estado de Florida, Estados Unidos, las pérdidas resultaron cuantiosas, en aproximadamente 9.3 mil millones de dólares, y en Indonesia y Arabia Saudita las plantaciones fueron abandonadas o desaparecieron por completo.

En Taiwán se reportó que ocurrieron pérdidas extraordinarias desde la década de los cincuenta (^{Chen, 1998}). En Suráfrica se han informado pérdidas de cosecha que alcanzaron el 100%, mientras que, en otras zonas de África y Asia, la severidad de la enfermedad redujo significativa-mente de las áreas sembradas de los cítricos (^{Coelho, 2002}; ^{Hung et al., 2004}). Hace dos décadas se señaló que en China desde que la enfermedad fue descrita por primera vez a finales del siglo XIX, ha ocurrido la destrucción de aproximadamente 100 millones de árboles (^{Rae et al., 1997}).

Esto representa una síntesis de la importancia de la enfermedad en algunas partes el mundo. Basado en los daños causados, es necesario prepararse para su eventual llegada a Ecuador, reiterando que uno de los vectores, D. citri, se detectó en el país desde el año 2013 (^{Cornejo & Chica, 2014}), y en consecuencia es necesario señalar el alcance de su dispersión, así como otros aspectos relacionados con la biología y ecología para el país.

Figura 1. Distribución geográfica de Diaphorina citri Kuwayama en Ecuador. El punto rojo indica las provincias en las cuales ha sido reportada la especie. 

BIOGEOGRAFIA DE Diaphorina citri EN ECUADOR

Distribución en Ecuador. La Figura 1 muestra las provincias de Ecuador donde ha sido mencionada la presencia del insecto. Desde su detección en el año 2013 y hasta la fecha ha sido observada en provincias de la costa y de la región sierra tanto en plantas ornamentales, como en cítricos de traspatio y comerciales. En la costa está presente en todas las provincias con excepción de Esmeraldas (80% de la región) y en la sierra se reportó en 5 de las 11 provincias (45,5%). Esto podría estar relacionado con la mayor área sembrada de estos cultivos, en la región costa (MAG, 2020).

El psílido asiático D. citri se detectó en Ecuador en el año 2013, en plantas de mirto, Murraya paniculata L. y cítricos ornamentales, Citrus spp. en las zonas de Duran y Guayaquil, provincia del Guayas (^{Cornejo & Chica, 2014}). Después se dispersó a cítricos de la provincia de Santa Elena (^{Chávez et al., 2019}). Y a la provincia de Manabí colonizando primero plantas de M. paniculata (^{Navarrete et al., 2016}) y posteriormente cítricos (^{Cuadros et al. 2020}). También fue detectada en las provincias: Carchi, Imbabura, Cotopaxi, Los Ríos, El Oro, Loja y Santo Domingo de los Tsáchilas en plantas de traspatio (Cuadros et al., 2020; ^{Erraez et al., 2020}). Varios estudios discuten aspectos relacionados con distribución geográfica, biología, fluctuación poblacional, enemigos naturales, los cuales se detallan en las siguientes secciones de esta revisión.

Estudio de biología. Según ^{García et al. (2016}) el adulto de D. citri es un pequeño insecto de aproximadamente 2,2 - 2,3 mm de longitud, coloración marrón-claro. Cabeza marrón clara, patas marrón grisáceas, antenas con la extremidad de color negro con dos manchas pequeñas marrón claro sobre la mitad del segmento. Las alas son transparentes con manchas blancas y marrón claro, presentan una banda longitudinal ancha de color crema en el centro. Los ojos son marrón oscuro (García et al., 2016). Posee un aparato bucal chupador, que utiliza para extraer savia del floema de plantas sanas e infectadas, excreta una cera blanca y sólida que es sustrato para el desarrollo de hongos saprófitos, conllevando a la formación de fumagina (^{Tsai, 2008}; ^{Mead & Fasulo, 2010}).

Las siguientes características del ciclo biológico se resume de ^{García et al. (2016}): presenta tres fases de desarrollo: huevo, ninfa y adulto (Figura 2). Los huevos son ovoides, tienen una coloración amarilla recién puestos y posteriormente se tornan naranja, cuando están a punto de eclosionar miden 0,30 mm. Las ninfas pasan por cinco estadios, las de primer estadio (N1) tienen el cuerpo elongado de 0,24 - 0,31 mm de longitud, cuerpo amarillo-anaranjado, los ojos compuestos de color rojos, antenas pequeñas, sin la formación de tecas o esbozos alares. Las ninfas de segundo estadio (N2) tienen la misma coloración de cuerpo y ojos que las N1, tecas alares apenas desarrolladas, largo del cuerpo de 0,27 - 0,30 mm. Las de tercer estadio (N3) presentan tecas alares desarrolladas, las antenas se tornan negruzcas en la parte distal, largo del cuerpo de 0,71 - 0,75 mm. Las ninfas de cuarto (N4) estadio son de coloración amarillo oscuro, antenas de tres segmentos, con tecas alares muy desarrolladas que llegan a tocar la parte posterior del ojo, largo del cuerpo de 1,40 - 1,52 mm. Las ninfas de quinto (N5) estadio tienen el cuerpo oval, antenas negruzcas con excepción del escapo, las tecas alares bien desarrolladas que se extienden anteriormente hasta el margen frontal de los ojos o sobrepasando los ojos y posteriormente hasta el cuarto segmento abdominal largo del cuerpo 1,61-1,66 mm. Las fases de D. citri se muestran en la Figura 2.

Fig. 2. Fases del ciclo del biológico de Diaphorina citri. A: Adultos copulando. B: Hembra oviponiendo. C: Huevos, D: Ninfas, E: Adultos, F: excretas solidas sobre hojas. Fotos: Dorys T. Chirinos. 

Se han realizado dos estudios para estudiar el ciclo biológico de D. citri en condiciones de laboratorio sobre dos plantas hospederas, una ornamental, mirto, Murraya paniculata L. y limón sutil, Citrus aurantiifolia (Swingle) (Chirinos et al., 2018; ^{Urbina 2018}), cuyos resultados se muestran en la Tabla 1. Estos estudios determinaron una duración de ciclo (huevo - emergencia del adulto) similar la cual transcurre en 16 días (Tabla 1). Las diferencias fueron detectadas en la longevidad de adultos y la fertilidad de la hembra. Mientras Urbina (2018) observó una longevidad de 43 y 37 días para hembras y macho respectivamente, Chirinos et al. (2018) detectaron longevidades de adultos muy inferiores en aproximadamente la mitad del tiempo (25 y 13 días para macho y hembra, respectivamente). En cuanto a la fertilidad, Chirinos et al. (2018) estimaron unos 780 huevos por hembra, y Urbina (2018) detectó un promedio de 100 a 200 huevos por hembra lo que fue evidentemente inferior. Aunque ambos estudios fueron realizados en condiciones de laboratorio, las condiciones climáticas no eran controladas (Chirinos et al., 2018; Urbina 2018), así que probablemente la fluctuación diaria de estos parámetros climáticos pudo haber influido en la longevidad de los adultos y en la fertilidad de la hembra.

Adicionalmente el estudio de Chirinos et al. (2018) calculó los parámetros poblacionales, obteniendo que el tiempo generacional (huevo - huevo) fue de 26 días, y una velocidad de crecimiento de la población de 4 veces (R_o) y una tasa intrínseca de desarrollo poblacional (r_m) de 0,05 lo que le otorga a la especie un alto potencial biótico.

ENEMIGOS NATURALES Y FLUCTUACION POBLACIONAL

Se han reportado varias especies de enemigos de D. citri destacando los parasitoides Tamarixia radiata Waterston (Hymenoptera: Eulophidae), Diaphorencyrtus aligarhensis (Shafee, Alam, & Agarwal) (Hymenoptera: Encyrtidae) y los depredadores en los órdenes Coleoptera: Coccinellidae: Olla v-nigrum (Mulsant), Chilocorus cacti, L., Cycloneda sanguínea, L. (^{Gonzales, 2009}). Nephus sp., Pentilia sp. y Neuroptera: Ceraeochrysa sp., y el entomopatógeno Beauveria bassiana (Rodríguez et al. 2012). Los enemigos naturales reportados en Ecuador se muestran en la Tabla 2.

Parasitoides. En Ecuador se detectaron a partir del año 2017 los parasitoides T. radiata y D. aligarhensis. Tamarixia radiata ha sido reportada en tres provincias de la costa (Guayas, Santa Elena y Manabí) (^{Chávez et al., 2017}; 2019; ^{Portalanza et al., 2017}; ^{Cuadros et al., 2020}; ^{Chirinos et al., 2021}), y una de la región sierra (Loja) (^{Erraez et al., 2020}). Por su parte, D. aligarhensis ha sido referido para Guayas (Portalanza et al., 2017) y para Loja (Erraez et al., 2020).

Ramos et al. (2020) realizó un estudio sobre el ciclo biológico de T. radiata a partir de individuos colectados en el parque Los Samanes, Guayaquil, Guayas, obteniendo los siguientes resultados: ciclo de vida de 10 a 13 días dependiendo de la temperatura evaluada en el estudio que varió de 20 a 35 °C. La hembra adulta deposita un huevo en el lado ventral de la ninfa de D. citri. A una temperatura de 27 °C el huevo tiene una duración 2 días, el estado larval transcurre en 3 días, en los cuales succionará el líquido dentro de sus hospedantes causando su muerte. La pupa tiene una duración de 4,57 días. Estos procesos ocurren dentro de la ninfa parasitada y reciben el nombre de momias. Finalizada la pupa, las avispas adultas emergen a través de un orificio en el tórax o la cabeza. Según este estudio las hembras y los machos de T. radiata tienen una longevidad promedio de 31,48 y 19,81 días, respectivamente.

A esa temperatura (27 °C) la fecundidad de la hembra es de aproximadamente 322 huevos. El Ro resultó aproximadamente 169 y una tasa intrínseca de desarrollo poblacional (r) igual a 0,31. Esto implica un tiempo generacional más corto que del insecto hospedero y una tasa de multiplicación mayor, lo que le confiere atributos como enemigo natural. Las especies más efectivas para el control biológico son aquellas en las que los adultos pueden vivir más tiempo y tienen un ciclo biológico mucho más corto que el hospedero (^{Gordh et al., 1999}).

La presencia de las dos especies de parasitoides T. radiata y D. alighariensis en Ecuador aunado a estos datos del ciclo biológico del principal parasitoide representan información fundamental en caso de establecer programas de control biológico, para el manejo integrado de esta importante plaga D. citri.

Depredadores. En Ecuador se han reportado 14 taxones de depredadores en tres Órdenes (Tabla 2), de los cuales el mayor porcentaje están en el Orden Coleoptera, Familia Coccinellidae (71,4%), seguido de dos taxones de Neuroptera: Chrysopidae y dos Hemiptera (14,3%, cada Orden). Estos depredadores pueden complementar la acción de los parasitoides en el control biológico de esta plaga.

Entomopatógeno. En Ecuador hasta ahora se han observado cuatro taxones de hongos entomopatógeno en la región sierra. ^{Erraez et al. (2020}) refieren que los hongos entomopatógenos, detectados fueron Cladosporium sp., Fusarium sp., Aspergillus sp. y Alternaria sp. con porcentajes de incidencia del 49,47%, 1,05%, 1,05%, y 5,26%, respectivamente (Tabla 3). Es de resaltar que los mismos investigadores señalan que estos hongos no resultaron lo suficientemente agresivos debido a que los especímenes de D. citri de donde se obtuvieron estaban vivos.

Fluctuación Poblacional. ^{Chávez et al. (2019}), observaron la fluctuación poblacional de D. citri y del parasitoide T. radiata en un estudio realizado durante 2016 - 2017, sobre M. paniculata en la provincia de Guayas. Los investigadores refieren que la plaga, D. citri a principios del estudio alcanzó altos niveles poblacionales (80 ninfas por brote de 10 cm) relacionados con bajos porcentajes de parasitismo (10%), pero al final, se observó mayor parasitismo (90%) y bajas poblaciones del fitófago (15 ninfas por brote de 10 cm). Asimismo, señalaron que el parasitoide pudo haberse establecido desde finales de 2015 basado en el incremento de los porcentajes de parasitismo (11,9% a 81,1%) lo que sugiere su importancia como agentes de control biológico de D. citri en Ecuador. ^{Cuadros et al. (2020}), evaluaron la dispersión de D. citri y su parasitoide, T. radiata en cítricos y M. paniculata en Portoviejo y Santa Ana, provincia de Manabí. Este estudio reportó el establecimiento de las poblaciones de este fitófago asociado con parasitismo por T. radiata sobre M. paniculata y la presencia de la plaga en sembradíos de limón sutil.

^{Collahuazo (2020}) realizó su investigación en tres plantaciones, lima (5.810 m 2), mandarina (5.890 m2) y limón (6.900 m2) con un área total de 18.600 m2 en Chaltura, Ibarra. Al realizar la clasificación y el conteo de los insectos en las trampas cromáticas amarillas no se registraron individuos de D. citri, y los investigadores indicaron que esto podría atribuirse en parte a la gran diversidad de enemigos naturales existentes en los cultivos de lima, mandarina y limón de la Granja Experimental La Pradera. También señalaron que, otro de los factores que podrían haber influido en la ausencia del psílido son las condiciones climáticas, en particular la temperatura que no fue el adecuada para el desarrollo de la plaga, debido a que se llegaron a registrar temperaturas de 4 °C.

Más recientemente, ^{Chirinos et al. (2021}) para la provincia de Manabí estudiaron el establecimiento de esta plaga invasora, primero en la hospedera ornamental, M. paniculata y posteriormente en C. aurantifolia, tanto del insecto fitófago como de su principal enemigo natural T. radiata e indican la importancia de los altos niveles de parasitismo detectados, así como la necesidad de disminuir las aplicaciones de insecticidas en cítricos para permitir la acción de los enemigos naturales en la regulación de las poblaciones de la plaga.

ALTERNATIVAS Y PERSPECTIVAS DE MANEJO DE Diaphorina citri

Para el control de enfermedades bacterianas una de las estrategias incluye el uso de plantas libres de bacterias o en su defecto, la exclusión de plantas enfermas por medios voluntarios y regulatorios. En cuanto al vector, para solucionar este problema, el consenso mundial indica que es necesario controlar y reducir al máximo su población con plaguicidas órgano-sintéticos, debido a que el vector, es el principal tipo de transmisión de la enfermedad (^{Pacheco et al., 2012}). Sin embargo, el uso permanente de ingredientes activos, podría incidir en la selección de individuos resistentes, reduciendo o inhibiendo especies benéficas (Restrepo & Soto, 2017). ^{Sornoza-Robles et al. (2020}) sintetizan en su investigación, las diversas apreciaciones de los citricultores acerca de la efectividad de los parasitoides en el control de plagas y en la sostenibilidad agroecológica del limonero, en la parroquia de Riochico, en el cantón Portoviejo. Los resultados de las encuestas mostraron que el 60,61% de los productores no están de acuerdo con el accionar de los parasitoides en el control de plagas en relación a los agroquímicos debido a que los efectos del control biológico son desconocidos para ellos.

Se evidencia así, que el empleo de agroquímicos es el método de control de plagas más utilizado en el cultivo de limonero. Desafortunadamente, las cantidades y frecuencias excesivas aspersiones de agroquímicos están causando desequilibrios en el agroecosistema, dando lugar a plantas más susceptibles a insectos-plagas. Sin embargo, la utilización de parasitoides es de uso restringido por la poca promoción y a la poca credibilidad por parte de los agricultores dedicados al cultivo de limón.

CONCLUSIONES

Se detectó una amplia distribución de D. citri en el país informándose para todas las provincias costeras con excepción de Esmeraldas (80% de la región) y en 5 de las 11 provincias de la región andina (45,5%). En cuanto a enemigos naturales, Ecuador cuenta con dos especies de parasitoides, entre estas la principal avispita parasítica, T. radiata, así como 14 taxones de depredadores y cuatro correspondientes a entomopatógenos.

Estudios biológicos del psílido asiático Diaphorina citri señalan el corto ciclo del insecto y la alta fecundidad.

La primera defensa de un país ante las invasiones biológicas consiste en medidas regulatorias que impidan el ingreso a nuevos territorios. Sin embargo, en caso de ingreso es necesario mantener los niveles de la plaga bajo control especialmente cuando son transmisores de enfermedades y virus como es el caso de D. citri, transmitiendo los agentes causales del Huanglongbing.

Los grandes desafíos se centran en el manejo racional de la enfermedad lo que implica la disminución de las frecuentes aplicaciones de insecticidas químicos, mientras se generan nuevas tecnologías que disminuyan el efecto de este importante problema fitosanitario que incluye el vector y el agente causal.